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接种疫苗意愿 (WTV) 和支付意愿 (WTP) ...
小反刍兽疫 (PPR) 仍然是马里小农面临的主要挑战。为了解农民疫苗接种率低的原因，我们分析了在疫苗接种活动期间和没有疫苗接种活动时影响农民 WTV 的社会经济因素。鉴于与疫苗接种相关的成本主要由农民承担，我们评估了与农民愿意支付 (WTP) 高于当前价格 (每剂 150 XOF) 相关的因素，通过考虑疫苗改进的两个属性，这两个属性在经验上被强调为干预的潜在杠杆点：农民获得疫苗的机会 (减少接种疫苗的距离) 和有关疫苗质量信息的可用性 (引入疫苗活力检测仪)。数据来自莫普提和锡卡索地区的 304 家生产商。总体而言 (n = 304)，89% 的受访者在官方疫苗接种活动期间为他们的牛群接种了疫苗。如果信息在礼拜场所传播，并且他们意识到接种疫苗的好处，包括保护第三方，他们就会更快地收到有关活动日程的信息。只有 39% 的受访者在疫苗接种活动之外接种疫苗。它们与私人兽医的信誉和对疫苗至关重要的认识呈正相关，但与对疫苗接种需求的无知和对疫苗副作用的担忧呈负相关。距离效应和质量追踪效应都与农民愿意支付高于当前疫苗价格的价格有关。采用半集约化生产系统的农民愿意支付比当前疫苗价格高出 20% 的费用，相信疫苗接种有益效果的用户、认为疫苗价格公平的用户以及认为某些疫苗比其他疫苗更重要的用户也愿意支付。通过马里当局有针对性的信息传播活动更好地宣传疫苗的好处，可以更有效地管理阻碍生产者接种疫苗或支付更多疫苗费用的因素。在整个疫苗生产和部署链中提高价格透明度至关重要，同时及时提供经过可行性测试的疫苗将增加接种疫苗的意愿并改善获得疫苗的机会。
补充材料
补充材料。材料与方法文库制备和 Miseq (Illumina®) 测序使用文库制备指南 (LPG) ( https://support.illumina.com/downloads/16s_metagenomic_sequencing_library_preparation.html ) 中报告的 Illumina 接头序列和引物悬垂部分（正向和反向）扩增 16S rRNA 基因的 460 bp V3-V4 高变区。使用以下 PCR 反应扩增每个 DNA 样本：2.5 µl 5 ng/ µl DNA、5 µl 引物正向悬垂部分、5 µl 引物反向悬垂部分、12.5 µl 2x KAPA HiFi HotStart ReadyMix (KAPA Biosystems)。使用 LPG 中报告的循环程序。 PCR 产物在 2% 琼脂糖凝胶（GellyPhor LE，Euroclone SPA，意大利米兰）上电泳分离，并用 GelRed™ 核酸凝胶染料（Biotium，美国加利福尼亚州海沃德）染色。通过紫外光透射仪观察预期长度的 PCR 产物的存在。然后，用 NucleoMag 试剂盒纯化 DNA 扩增子以清理和选择 NGS 文库制备反应的大小（Macherey-Nagel），并按照制造商的说明使用 Illumina® DNA/RNA UD Indexes Tagmentation 试剂盒对每个样本进行索引。在验证和定量之前，对文库进行进一步纯化。在 Agilent 4150 TapeStation D1000 ScreenTape 检测仪（安捷伦科技公司）上对文库进行验证，以验证大小，而定量则使用 Qubit 4 荧光计（赛默飞世尔科技，美国）。根据 DNA 扩增子的大小，应用 Illumina LPG 中报告的公式，以 nM 为单位计算最终的 DNA 浓度。最后，将每个文库中的 5 µl 稀释 DNA 等分试样混合，以合并具有唯一索引的文库。在 Miseq 加载之前，根据 Illumina LPG 说明对合并的文库进行变性和稀释。使用 MiSeq Reagent Micro Kit v2（500 个循环）加载合并的文库，运行包括 20% PhiX 作为内部对照。生物信息学分析测序数据包含在包含带有原始读取的 FASTQ 文件的文件夹中（R1 文件包含每个样本的正向读取，R2 文件包含每个样本的反向读取），使用 FastQC（英国剑桥 Babraham Institute）进行质量检查。然后，使用 DADA2 R 包（Callahan 等人，2016 年）处理 R1 和 R2 文件以生成扩增子序列变体 (ASV)（图 1）。最终生成了 ASV 表，总结了每个样本的不同 ASV 的数量。