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利用 CRISPR-Cas9 和体外组装的核糖核蛋白操纵全局调节器 mcrA 上调温曲霉中的次级代谢产物
摘要：丝状真菌基因组测序表明，大多数次级代谢物生物合成基因簇 (BGC) 在标准实验室条件下处于沉默状态。在这项研究中，我们在温氏曲霉中建立了一个体外 CRISPR-Cas9 系统。为了激活原本沉默的 BGC，我们删除了负转录调节因子 mcrA 。当菌株在马铃薯葡萄糖培养基 (PDA) 上培养时，mcrA (mcrA Δ) 的缺失导致总共产生 17 种 SM。在 15 种 SM 中，有 9 种已得到充分表征，包括大黄素 ( 1 )、大黄酸乙酯 ( 2 )、sulochrin ( 3 )、大黄酸乙酯二蒽酮 ( 4 )、14- O-脱甲基sulochrin ( 5 )、( 反式 / 顺式 )-大黄素二蒽酮 ( 6 和 7 ) 和 ( 反式 / 顺式 )-大黄素大黄酸乙酯二蒽酮 ( 8 和 9 )。经发现，这些化合物均由相同的聚酮合酶 (PKS) BGC 产生。随后，我们在 mcrA Δ 背景下针对该 PKS 簇进行了二次敲除。双敲除菌株的代谢物谱揭示了先前未在 mcrA Δ 亲本菌株中检测到的新代谢物。从双敲除菌株中纯化出另外两种 SM，并被鉴定为曲霉酸 B ( 16 ) 和一种结构相关但之前未鉴定的化合物 ( 17 )。这项工作首次提出了一种能够在 A.wentii 中进行靶向基因编辑的简便遗传系统。这项工作还说明了进行双敲除以消除主要代谢产物的实用性，从而能够发现更多的 SM。■ 简介
语法，生物标志物和复杂冠状动脉疾病的生存：次级预防的干预
可以很容易地想象，在照顾多发性疾病或左主冠状动脉疾病（CAD）的患者时做出的最重要的决定是在冠状动脉导管实验室中做出的。在那里，会发生关键决策，包括确定最佳血运重建策略和血运重建时间的确定性，并适当关注解剖学综合性和疾病负担。实施最佳证据和血运重建指南，除了确定双重抗血小板疗法的持续时间外，还要纳入成像和适当的分叉策略，这对于确保最佳的长期结果至关重要。这些复杂的患者需要训练有素的多学科高危心脏团队。但是其他哪些因素严重影响长期死亡率？在当前的欧洲干预期间，HARA等人1列出了来自语法的数据扩展生存研究，评估了预性外部生物学标志物对10年病情的影响。在这项研究中，研究人员发现，我们为导管实验室和操作室以外的患者所做的事情极大地影响了长期死亡率。他们报告说，在语法患者中，10年死亡率的最大预测因子不是生物标志物，而是缺乏他汀类药物的使用。
41 - 市中心次级规划
市中心的公共空间充满活力，全年都可举办各种活动。每个社区的核心区域都有一个公园区，为社区生活提供焦点。海滨已重新融入市中心的肌理，水边有美丽的公园，通往多伦多群岛的交通也更加便利。市中心周围环绕着一系列公园和自然区，有连续的步行和自行车道，鼓励人们积极生活方式。铁路走廊上方的空间等未充分利用的空间的改造为整个城市提供了新的公园绿地。
超级计算机在现实世界中发挥经济和社会效益的例子：百亿亿次级计算时代的前奏
在这项研究中，HPC 驱动的癌症研究为长期癌症幸存者带来了更好的结果。癌症检测和治疗方面的进步大大提高了存活率。但随着存活率的提高，需要尽量减少长期治疗相关的负面影响。特别是，接受放射治疗的儿童以后更容易患上由放射引起的继发性癌症（致癌作用）。研究人员在超级计算机模拟的帮助下进行了临床试验，这些试验有助于提高长期晚期癌症治疗的成功率。模拟驱动的研究产生了宝贵的数据，这些数据被用于指导临床和卫生政策决策
Constellation Energy Generation, LLC 签署信托基金协议修正案和次级信托协议
布雷德伍德核电站 1 号和 2 号机组更新的设施运行许可证号 NPF-72 和 NPF-77 NRC 档案号 STN 50-456 和 STN 50-457 拜伦核电站 1 号和 2 号机组更新的设施运行许可证号 NPF-37 和 NPF-66 NRC 档案号 STN 50-454 和 STN 50-455 卡尔弗特悬崖核电站 1 号和 2 号机组更新的设施运行许可证号 DPR-53 和 DPR-69 NRC 档案号 50-317 和 50-318 克林顿发电站 1 号机组设施运行许可证号 NPF-62 NRC 档案号 50-461 德累斯顿核电站 1 号、2 号和 3 号机组修订的设施运行许可证号 DPR-2更新的设施运营许可证编号 DPR-19 和 DPR-25 NRC 档案编号 50-10、50-237 和 50-249 James。菲茨帕特里克核电站更新设施运营许可证号 DPR-59 NRC 档案号 50-333 拉萨尔县核电站，1 号和 2 号机组更新设施运营许可证号 NPF-11 和 NPF-18 NRC 档案号 50-373 和 50-374 利默里克发电站，1 号和 2 号机组更新设施运营许可证号 NPF-39 和 NPF-85 NRC 档案号 50-352 和 50-353 九英里点核电站，1 号和 2 号机组评级许可证号 DPR-63 和 DPR-69 NRC 档案号 50-220 和 50-410
罗宾逊峡谷次级规划 - 土地利用地图
申请人：4551 Elgin Mills Developments Ltd.、Major Kennedy Developments Ltd. 和 Major Kennedy South Developments Ltd. 4638 Major Mackenize Dr. E.、10225 & 10227 Kennedy Rd、4551 Elgin Mills Rd. E.
次级标本测试及其与Gen IV材料资格的关系
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次级听觉皮层中巧合依赖性感觉结合的抑制门控
未经同行评审认证）是作者/资助者。保留所有权利。未经许可不得重复使用。此预印本的版权所有者（此版本于 2021 年 5 月 27 日发布。；https://doi.org/10.1101/2021.05.26.445794 doi：bioRxiv preprint
次级中风预防中的药物
虽然对依鲁替尼治疗的心血管不良反应的认识越来越高，但较少认识的是与药物（例如Diltiazem）进行严重药物相互作用的潜力，例如用于治疗心律不齐。由于diltiazem是CYP3A4的中等抑制剂，ibrutinib是该酶的底物，因此两种药物的延长共同给药可能会导致Ibrutinib清除率降低，并随后的心脏毒性。4鉴于这种相互作用的严重后果，应更新ibrutinib诱导的房颤的治疗指南，以清楚地说明药物相互作用的风险以及避免使用哪些药物。
太空发射系统次级有效载荷
当猎户座火箭与上级分离后，一旦猎户座火箭与上级火箭保持安全距离，立方体卫星就会被部署。每个有效载荷将通过安装在猎户座级适配器上的分配器通过弹簧机构弹出。SLS 计划为立方体卫星提供了辅助有效载荷部署系统，其中包括部署系统、航空电子设备、分配器的安装支架、电缆线束和减振系统。