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国际Ceplas/IPK暑期学校2024翻译...
下午12:00-1：00 午餐会议1-主席：劳拉·阿姆布鲁斯（Laura Armbruster）1：30 - 下午2:15 Alain Tissier，IPB Halle从淘汰赛到淘汰赛：Cas-Exo技术在植物繁殖中的应用2:15 - 3:00凯瑟琳·韦佩尔（Kathrin Wippel咖啡休息时间2-主席：Stanislav Kopriva 3：30 - 下午3:45 Nina Trubanova，都柏林大学学院特定于基因组特定协会研究（GSAS），用于探索大麻3:45 - 4:00 pm的变异性。 Tracyline Jayo Manyasi，内罗毕大学的护理点诊断，莫桑比克的香蕉镰刀木枯萎病4:00 - 4:15 Alessandra Renella，莫利斯大学的代谢组学表征，来自意大利阿皮宁地区的自动扁豆生态型3-主席：Gabriel Oliveira Ragazzo 4:15 - 5:00 Stefan Heckmann，IPK Gatersleben朝着大麦（Hordeum vulgare）的减数分裂重组，下午5:00 - 5:45 Nicolaus von Wiren，IPK Gatersleben氮营养作为根可塑性的多功能因素6：15 - 7:30 pm。晚餐7:30 - 晚上9:00海报会议i下午12:00-1：00午餐会议1-主席：劳拉·阿姆布鲁斯（Laura Armbruster）1：30 - 下午2:15 Alain Tissier，IPB Halle从淘汰赛到淘汰赛：Cas-Exo技术在植物繁殖中的应用2:15 - 3:00凯瑟琳·韦佩尔（Kathrin Wippel咖啡休息时间2-主席：Stanislav Kopriva 3：30 - 下午3:45 Nina Trubanova，都柏林大学学院特定于基因组特定协会研究（GSAS），用于探索大麻3:45 - 4:00 pm的变异性。 Tracyline Jayo Manyasi，内罗毕大学的护理点诊断，莫桑比克的香蕉镰刀木枯萎病4:00 - 4:15 Alessandra Renella，莫利斯大学的代谢组学表征，来自意大利阿皮宁地区的自动扁豆生态型3-主席：Gabriel Oliveira Ragazzo 4:15 - 5:00 Stefan Heckmann，IPK Gatersleben朝着大麦（Hordeum vulgare）的减数分裂重组，下午5:00 - 5:45 Nicolaus von Wiren，IPK Gatersleben氮营养作为根可塑性的多功能因素6：15 - 7:30 pm。晚餐7:30 - 晚上9:00海报会议i
CD对接MPK4的基本作用在植物免疫，生长和发育中
MAPK是通用的真核信号传导因子，其功能被认为取决于其激活剂，底物和iNactivators对公共对接基序（CD）的识别。我们通过执行相互作用的基础并确定结合配体结合的MPK4晶体结构来研究拟南芥MPK4的CD结构域的作用。我们揭示了MPK4的CD域对于其上游MAPKKS MKK1，MKK2和MKK6对于相互作用和激活至关重要。cys181被证明是对活性氧的体外响应的磺酰基的。为了测试C181在体内的功能，我们生成了野生型（WT）MPK4-C181，Nonsulfenylabable MPK4-C181S，并在MPK4淘汰赛中模仿MPK4-C181D线的潜在硫乙基。我们分析了MPK4-C181S具有WT活性并补充MPK4表型的生长，发育和压力反应中的表型。相比之下，MPK4-C181D不能被上游MAPKK激活，并且不能补充MPK4的现场类型。我们的发现表明，CD基序是必不可少的，并且是由上游MAPKK激活MPK4功能所必需的。此外，生长，发育或免疫功能需要上游激活MPK4蛋白激酶。
靶向敲除基因OSHOL1去除水稻植物的甲基碘化物排放
碘缺陷代表了全球一个公共卫生问题。为了增加饮食中碘的量，已经尝试了植物的生物强化策略。他们依靠碘的外源给药来增加其吸收和积累。但是，碘在植物中不稳定，可以通过由无害对臭氧层（HOL）基因编码的特定甲基转移酶的作用挥发为碘化甲基。大气中碘化甲基的释放是由于其臭氧耗竭潜力而对环境的威胁。稻田是碘化甲基最强的生产者之一。因此，碘生物化化的农艺学方法不适合这种作物，从而进一步增加了碘排放。在这项工作中，我们使用了基因组编辑CRISPR/CAS9技术来淘汰稻米基因并研究其功能。oshol1由于淘汰赛废除了该过程，因此导致了碘化甲基甲基生产的主要参与者。此外，它的过表达加强了它。相反，Oshol2的敲除未产生效果。我们的实验有助于阐明水稻基因的功能，提供工具来开发新的水稻品种，并减少碘排放，因此更适合于生物实力化计划而不进一步影响环境。
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橱柜单个独立式或壁挂式NEMA 1型钢柜粉末涂有腐蚀和刮擦性。前访问设计。顶部和左侧导管带有淘汰赛。使用IGBT/PWM技术的逆变器逆变器将电池提供的直流电压转换为精确稳定振幅和频率的交流电压，适用于大多数复杂的电气设备。真正的正弦输出波形，失真非常低（线性载荷小于3％）。16个线周期的超负荷能力高达150％。充电器全自动，温度补偿，微处理器控制的充电器充电器在标称AC输入电压下最多24小时充分放电电池。交流输入电流限制和过电压保护。电池系统提供10年，无维护的密封阀调节的铅钙电池。30分钟。在正常工作温度下全负载的标准排放时间。包括低压断开保护。无需特殊通风。自我诊断自动自动测试由每月5分钟和全运行时间的年度功能组成。正式的控制面板包括4行20个字符的OLED显示屏，以及一个控制和监视内部系统的键盘。这允许操作员在发生时轻松“观察”系统功能并检查
工程永生的细胞快速启动指南
1。Editco建议尽快（在1-3个段落内）尽快对细胞进行基因分型。要评估您编辑的单元格的基因型，您可以使用下一代测序（NGS）或Sanger测序。用于单个指南淘汰赛和CRISPR编辑，如果您想使用NGS分析基因型，我们建议使用Crispresso。ngs启动序列可在质量控制报告中为您的项目提供，您可以使用Editco的CRISPR编辑（ICE）工具来分析单指，多指定和敲门CRISPR编辑，该工具依赖于Sanger测序。值得注意的是，Editco的ICE工具是目前唯一用于分析多指南派生CRISPR编辑的公开选项。对于Sanger测序，将根据要求提供PCR引物。您可以联系technicalsupport@editco.bio，以获取有关您的订单的Sanger Primer建议。 请注意，我们的Sanger底漆建议是使用标准生物信息学算法计算的。 它们未通过Editco在功能上验证。 有关如何隔离基因组DNA，PCR扩大靶向区域以及为Sanger测序准备的说明，可以在我们的基因分型方案中获得。 分别在我们的ICE基因敲除和敲入分析方案中详细介绍了使用ICE评估敲除或敲入编辑效率的说明。 对于小敲门剂，我们建议通过Sanger测序和冰分析来识别细胞的编辑基因型。 对于大型敲击，可以使用PCR产物的Junction PCR和Sanger测序来识别插入的序列。您可以联系technicalsupport@editco.bio，以获取有关您的订单的Sanger Primer建议。请注意，我们的Sanger底漆建议是使用标准生物信息学算法计算的。它们未通过Editco在功能上验证。有关如何隔离基因组DNA，PCR扩大靶向区域以及为Sanger测序准备的说明，可以在我们的基因分型方案中获得。分别在我们的ICE基因敲除和敲入分析方案中详细介绍了使用ICE评估敲除或敲入编辑效率的说明。对于小敲门剂，我们建议通过Sanger测序和冰分析来识别细胞的编辑基因型。对于大型敲击，可以使用PCR产物的Junction PCR和Sanger测序来识别插入的序列。
AMPK在抑制自噬和长期氨基酸剥夺作者中MTORC1信号的重新激活中的意外作用
摘要AMPK促进分解代谢并抑制合成代谢的细胞代谢，以在能量应激期间促进细胞存活，部分通过抑制MTORC1，这是一种合成代谢激酶，需要足够水平的氨基酸。我们发现缺乏AMPK的细胞显示出在氨基酸剥夺长期导致的营养应激期间凋亡细胞死亡增加。我们假定自噬受损解释了这种表型，因为一种普遍的观点认为AMPK通过ULK1的磷酸化启动了自噬（通常是亲生响应）。出乎意料的是，在缺乏AMPK的细胞中，自噬仍然没有受损，正如多个细胞系中的几个自噬读数所监测的那样。更令人惊讶的是，在氨基酸剥夺期间，不存在AMPK的ULK1信号传导和LC3B脂质增加，而AMPK介导的ULK1 S555的磷酸化（拟议启动自噬的站点）在氨基酸戒断或药理学MTORC1抑制后降低了ULK1 S555（拟议启动自噬）的磷酸化。此外，用化合物991，葡萄糖剥夺或氨基酸戒断引起的AICAR钝化自噬的AMPK激活。这些结果表明AMPK激活和葡萄糖剥夺抑制自噬。作为AMPK控制的自噬在意外方向上，我们检查了AMPK如何控制MTORC1信号传导。矛盾的是，我们观察到在长时间氨基酸剥夺后缺乏AMPK的细胞中MTORC1的重新激活受损。这些结果共同反对既定的观点，即AMPK促进自噬并普遍抑制MTORC1。这些发现促使对AMPK及其对自噬和MTORC1的控制如何影响健康和疾病进行了重新评估。此外，在延长氨基酸剥夺的背景下，它们揭示了AMPK在抑制自噬和MTORC1信号传导中的意外作用。关键字：mtor; S6K1; 4EBP1; lc3b; ULK1; ATG16L1;化合物991;葡萄糖剥夺； aicar;细胞存活缩写：AAS：氨基酸； ADP：双磷酸腺苷； AICAR：5-氨基咪唑-4-羧酰胺核糖核苷酸； AMP：单磷酸腺苷； AMPK：AMP激活的蛋白激酶； ATG14：自噬相关14； ATG16L1：自噬相关16，如1； ATG5：自噬相关5; BAFA1：Bafilomycin A1； DKD：双重击倒； DKO：双淘汰赛； ECL：增强的化学发光； LC3B：微管相关蛋白1A/1B轻链3B； MEF：小鼠胚胎成纤维细胞； MTORC1：雷帕霉素复合物1的机械靶标； MTORC2：雷帕霉素复合物2的机械靶标； p62：泛素结合蛋白p62，又名SQSTM1/secestosoms 1; S6K1核糖体蛋白S6激酶1; 4EBP1，EIF4E [真核起始因子4E]结合蛋白1； TEM：透射电子显微镜； ULK1：UNC-51样激酶1； VPS34，液泡蛋白排序34。