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重新组合：使用同源重组的细菌基因工程
要进行重新组合，需要表达噬菌体重组系统的细菌菌株。噬菌体可以从其自己的启动子或异源调节启动子中表达。从其内源性噬菌体启动子中表达基因的基因赋予了紧密调控和坐标表达的优势，从而导致更高的重组频率。这是一个重要的优势，因为在许多情况下，高重组频率对于获得所需的重组至关重要。该单元的作者通常使用位于大肠杆菌染色体上的有缺陷的预言，最近将该预言的关键要素转移到了许多不同的质粒中（Thomason等，2005；另请参见评论）。在此预言系统中，噬菌体重组功能受到肉毒噬菌温度敏感的C I 857抑制剂的控制。在低温（30至34 C）下，重组基因会严重抑制，但是当细菌培养的温度转移到42 C时，它们会从P L启动子中高水平表达。在Datsenko和Wanner（2000）的质粒构建体中，重组基因位于质粒上，并从阿拉伯糖启动子表示。DATSENKO和WANNER质粒以及某些作者的质粒构建体具有DNA复制的温度敏感性。基于质粒的系统具有迁移率的优势 - 它们可以在不同的大肠杆菌菌株中转移到鼠伤寒沙门氏菌和其他革兰氏阴性细菌。但是，如果重新组合针对质量，则使用位于细菌染色体上的预言系统更容易。在诱导重组函数后，将修饰的DNA（DS）（DS）PCR产物或合成单链（SS）寡核苷酸（Oligo）引入到预防菌株中，通过电穿孔引入预防菌株中。通过选择或筛选存活电穿孔的细胞种群获得重新组件。一旦获得了所需的构建体，就可以通过另一个重组去除预言。或者，染色体上的工程等位基因可以通过P1转导将不同的宿主移动到另一个宿主中。具有温度敏感复制起源的质粒可能会因在适当温度下的生长而从重组菌株中丢失。
重组工程：利用同源重组进行细菌遗传工程”。引自：分子生物学最新协议
细菌染色体和细菌质粒可通过同源重组在体内进行改造，使用 PCR 产物和合成寡核苷酸作为底物。这是可能的，因为噬菌体编码的重组蛋白可以有效地重新组合同源序列，这些序列短至 35 到 50 个碱基。重组允许插入或删除 DNA 序列，而不考虑限制位点的位置。本单元首先描述了表达重组功能的电转化感受态细胞的制备及其用 dsDNA 或 ssDNA 的转化。然后，它介绍了支持协议，这些协议描述了几种两步选择/反选择方法，这些方法可以在不留下目标 DNA 中任何不必要的变化的情况下进行遗传改变，以及一种从大肠杆菌染色体或共电穿孔 DNA 片段中将遗传标记（通过检索进行克隆）检索到质粒上的方法。附加方案描述了筛选未选择突变的方法、从重组菌株中去除有缺陷的原噬菌体的方法和其他有用的技术。Curr. Protoc. Mol. Biol. 106:1.16.1-1.16.39。C 2014 by John Wiley & Sons, Inc.
使用同源-NCI在Frederick的基因工程
■摘要在过去的几年中，体内技术已经出现，由于其效率和简单性，可能有一天会取代标准的基因工程技术。可以在质粒上或直接通过同源重组从PCR产物或合成寡核苷酸的大肠杆菌染色体上制成。这是可能的，因为噬菌体编码的重组函数有效地将序列与同源性序列短至35至50个碱基对。这项称为重新组合的技术正在提供修改染色体基因和片段的新方法。本综述不仅描述了重新组合及其应用，而且总结了大肠杆菌中的同源重组以及同源重组的早期使用以修饰细菌染色体。最后，基于噬菌体介导的重组功能在复制叉时的前提，提出了特定的分子模型。
采用同轴送丝的激光金属沉积技术，实现固体金属部件的自动化和可靠制造
achristian.bernauer@iwb.tum.de、bthomas.merk@tum.de、cavelino.zapata@iwb.tum.de、dmichael.zaeh@iwb.tum.de achristian.bernauer@iwb.tum.de、bthomas.merk@tum.de、cavelino.zapata@iwb.tum.de、 dmichael.zaeh@iwb.tum.de achristian.bernauer@iwb.tum.de、bthomas.merk@tum.de、cavelino.zapata@iwb.tum.de、dmichael.zaeh@iwb.tum.de achristian.bernauer@iwb.tum.de、bthomas.merk@tum.de、 Cavelino.zapata@iwb.tum.de, dmichael.zaeh@iwb.tum.de achristian.bernauer@iwb.tum.de、bthomas.merk@tum.de、cavelino.zapata@iwb.tum.de、dmichael.zaeh@iwb.tum.de achristian.bernauer@iwb.tum.de、bthomas.merk@tum.de、 Cavelino.zapata@iwb.tum.de、dmichael.zaeh@iwb.tum.de achristian.bernauer@iwb.tum.de、bthomas.merk@tum.de、cavelino.zapata@iwb.tum.de、dmichael.zaeh@iwb.tum.de achristian.bernauer@iwb.tum.de、 bthomas.merk@tum.de, Cavelino.zapata@iwb.tum.de、dmichael.zaeh@iwb.tum.de achristian.bernauer@iwb.tum.de、bthomas.merk@tum.de、cavelino.zapata@iwb.tum.de、dmichael.zaeh@iwb.tum.de
储能系统替代无备用同步发电机调频调速器的运行方法
1 仁济大学能源系统工程系，金海 50834，韩国；dunguyen9003@gmail.com 2 延世大学电气电子工程学院，首尔 03722，韩国；wyshin@yonsei.ac.kr（WS）；khur@yonsei.ac.kr（KH） 3 韩国铁道研究院，义王 16105，韩国；cm2@krri.re.kr 4 韩国西部电力公司西部电力研究院，大田 34056，韩国；chung@iwest.co.kr（I.-YC）；kdh1002@iwest.co.kr（DK）；hyh88@iwest.co.kr（Y.-HH） 5 斗山重工业与建筑公司，龙仁 16858，韩国；juyoung.youn@doosan.com（JY）； jwayoung.maeng@doosan.com (JM) 6 光云大学电气工程系，首尔 01897，韩国；myoon@kw.ac.kr 7 祥明大学电气工程系，首尔 03016，韩国 * 通讯地址：jaewshim@smu.ac.kr；电话：+82-2-2287-6175
使用同时吸收栅极吸收的最佳量子映射
摘要 - 在实现量子误差校正（QEC）之后，Quantum计算机专注于嘈杂的中间尺度量子（NISQ）应用。与需要QEC的众所周知的量子算法（例如Shor's或Grover的算法）相比，NISQ应用具有不同的结构和属性，可以利用编译。编译的关键步骤是将程序中的Qubits映射到给定量子计算机上的物理Qubit，这已被证明是一个难题。在本文中，我们提出了OLSQ-GA，这是一种最佳的量子映射器，具有同时交换闸门吸收期间的关键特征，我们表明这是NISQ应用程序非常有效的优化技术。与其他最先进的方法相比，量子近似优化算法（QAOA）是一个重要的NISQ应用，OLSQ-GA可将深度降低高达50.0％，将深度降低100％，这转化为55.9％的法律改善。OLSQ-GA的溶液最优性是通过精确的SMT公式实现的。为了获得更好的可伸缩性，我们以初始映射或交替匹配的形式增强了方法，从而使OLSQ-GA加快了272倍的速度，而没有最佳损失。
使用同时使用eeg-fmri
当前的视觉意识理论不同意它是在涉及广泛的额叶网络时在感觉大脑区域的早期阶段出现的。此外，从与任务相关的后过程过程（例如报告）中解散有意识的感知，并在不同的神经科学方法中整合结果仍然是持续的挑战。本研究使用同时使用的EEG-FMRI和一个特定的不感状失明范式解决了这些问题，在女性和男性人类参与者中具有三个物理相同的阶段。在第1阶段，参与者执行了干扰器任务，在该任务中，面部和对照刺激的线图被集中呈现。虽然一些参与者自发地注意到了第1阶段的面孔，但其他参与者在不切实际的情况下仍然是盲目的。在第2阶段，所有参与者都意识到了任务 - 涉及到的面孔，但继续了干扰器任务。在第3阶段，面孔变得很重要。贝叶斯对大脑反应的分析表明，有意识的面部感知与梭形回和中的激活以及N170和视觉意识负相关（EEG）最密切相关。在枕骨和前额叶皮层（fMRI）中揭示了较小的意识效应。与任务相关的面部处理导致枕颞，额叶和注意力网络（fMRI）的强烈激活。在脑电图中，它增强了早期的负面影响，并引起了一个明显的P3B组件。总体而言，我们提供了证据表明，有意识的视觉感知与刺激特异性的感觉脑区域的早期处理有关，但可能还涉及前额叶皮层。相反，广泛的大脑网络和p3b的强烈激活更可能与任务相关的过程相关。
使用同步 EEG-fMRI 分离面部感知中意识和任务相关性的神经关联
当前的视觉意识理论对于视觉意识是在感觉脑区处理的早期阶段出现，还是在广泛的额顶叶网络参与之后出现，存在分歧。此外，将意识感知与任务相关的后知觉过程（如报告）区分开来，并整合不同神经科学方法的结果，仍然是持续的挑战。本研究使用同步 EEG-fMRI 和特定的无意视盲范式解决了这些问题，该范式在女性和男性人类参与者中有三个物理上相同的阶段。在第 1 阶段，参与者执行了一项干扰任务，在此任务中，面部线条画和控制刺激被集中呈现。虽然一些参与者在第 1 阶段自发地注意到了面孔，但其他人仍然处于无意视盲状态。在第 2 阶段，所有参与者都知道与任务无关的面孔，但继续干扰任务。在第 3 阶段，面孔变得与任务相关。大脑反应的贝叶斯分析表明，有意识的面部感知与梭状回（fMRI）以及 N170 和视觉意识负波（EEG）的激活最为密切相关。枕叶和前额叶皮质（fMRI）显示出较小的意识效应。另一方面，与任务相关的面部处理导致枕颞、额顶和注意力网络（fMRI）强烈、广泛的激活。在 EEG 中，它增强了早期的负波并引发了明显的 P3b 成分。总体而言，我们提供的证据表明，有意识的视觉感知与刺激特定感觉大脑区域的早期处理有关，但可能还涉及前额叶皮质。相比之下，广泛大脑网络和 P3b 的强烈激活更有可能与任务相关过程有关。
美国能源部同位素计划太空应用同位素的研发和生产
稀有同位素束流设施 (FRIB) 将以独特的方式提供对预测可能存在于自然界的所有同位素的 80% 的探测，包括地球上从未产生的 1,000 多种同位素，从而解答长期存在的“大挑战”问题，例如 NASA 研究非常感兴趣的宇宙中重元素产生的天体物理位置和同位素路径
利用同源性独立的 CRISPR/Cas9 精准基因组编辑快速高效生成敲入人类类器官
预印本（未经同行评审认证）是作者/资助者。保留所有权利。未经许可不得重复使用。此版本的版权所有者于 2020 年 1 月 15 日发布。；https://doi.org/10.1101/2020.01.15.907766 doi：bioRxiv 预印本