在成虫成熟过程中,嗜人蚊对人类宿主线索(如体味和二氧化碳)的吸引力逐渐增强。这种寻找宿主行为的习得与嗅觉受体 (OR) 转录本丰度和嗅觉传感神经元 (OSN) 敏感性的年龄依赖性变化相关。人类疟疾媒介按蚊 (Anopheles coluzzii) 的一个 OR 基因 AcolOR39 在成熟雌性中显著下调,而 AcolOR39 的同源配体 sulcatone(人类散发的主要成分)介导了观察到的新生雌性对人体气味的行为抑制。使用 CRISPR – Cas9 诱变敲除 AcolOR39 ,选择性地消除了位于毛状感器中的 OSN 对 sulcatone 的检测。然而,敲除 AcolOR39 既不会改变风洞中幼虫雌性的反应率,也不会改变其飞行行为,这表明在调节蚊子寻找宿主能力的获得方面,还有其他基因参与其中,因此存在冗余。
摘要 创新工具对于推进疟疾控制至关重要,并且取决于对疟蚊传播疟原虫的分子机制的理解。基于 CRISPR/Cas9 的基因破坏是一种揭示媒介-病原体相互作用的潜在生物学原理的有效方法,其本身可以成为蚊虫控制策略的基础。然而,用于对蚊子(尤其是疟蚊)进行基因改造的胚胎注射方法既困难又低效,特别是对于非专业实验室而言。在这里,我们采用了 ReMOT 控制(受体介导的卵巢货物转导)技术,将 Cas9 核糖核蛋白复合物递送至成年蚊子卵巢,从而无需注射胚胎就在疟疾媒介斯氏疟蚊中产生有针对性的可遗传突变。在疟蚊中,ReMOT 控制基因编辑与标准胚胎注射一样有效。 ReMOT 控制对按蚊的应用,为缺乏设备或专业知识进行胚胎注射的疟疾实验室揭示了 CRISPR/Cas9 方法的威力,并建立了 ReMOT 控制对不同蚊子物种的灵活性。