作为治疗方法的靶向蛋白质降解已经看到了惊人的发展和巨大的投资[1]。蛋白水解 - 靶向嵌合体(protac)和诱导靶向蛋白质降解的相关分子具有很大的价值,主要是因为与常规目标占用驱动抑制剂相比,对于给药,安全性,有效性,选择性和调节“不可用的”目标[2] [2]。这些异常小分子具有三个化学特征:与靶蛋白的部分结合,另一种与E3泛素连接酶结合,以及与这两个元素结合的接头[3]。除了protac,还有某些称为分子胶地的非晶状体小分子蛋白蛋白二聚体,它们还结合了泛素E3连接酶和募集蛋白质以降解,类似于带有靶向蛋白质降解的Protacs [4]。
今天的摘要,诸如使用免疫毒素的靶向疗法增加了靶向特定抗原或受体在肿瘤细胞表面上。成纤维细胞生长因子诱导14(FN14)是一种细胞因子受体,涉及几种细胞间信号通路,并且可以在癌细胞表面高度表达。由于furin蛋白酶在一步中出现了假单胞菌毒素A(PE)的酶结构域的裂解,因此我们将类似志贺毒素的2a(STX2A)的酶亚基与结构域II和PE的一部分PE融合在一起,以增加STX的毒性。然后,我们将抗FN14单克隆抗体(P4A8)的FV片段融合到STX2A-PE15,并评估了STX2A-PE15-P4A8嵌合蛋白作为新的免疫毒素候选者。在计算机分析中表明,STX2A-PE15-P4A8是一种稳定的嵌合蛋白,对FN14受体具有高亲和力。尽管,STX2A-PE15-P4A8可以与B细胞受体结合,但由主要的组织相容性复合物II(MHC-II)薄弱地提出。因此,它可能具有一些免疫原性。根据我们的内部研究,我们预测STX2A-PE15-P4A8可以是癌症免疫疗法的良好候选者。
结果:从137个表位中选择了最高分数的九种肽(20AA),并将五个肽视为抗原表位(E1 – E5)。E3作为有效抗原(得分:0.939537)和E1作为最佳疫苗候选者(得分:0.9803)。Solpro将所有表位视为可溶性肽。Protparam预测显示E3和E5作为稳定蛋白,保质期为3.5和1.9 h,具有负肉汁值。PSORTB服务器预测GACS蛋白序列作为细胞质膜蛋白的最终定位评分为7.88。IEDB保护分析显示,GACS序列中的100%保守序列,I类保护均为所有表位产生正值。聚类分析显示出很强的相互作用,并且与TLR-2最终检测到的E5的蛋白质肽相互作用是最佳相互作用的肽(H键= 14),其次是E3(H键= 12)。