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World File Search System紫锥菊
在微生物 CRISPR 干扰中使用缩短和随机 sgRNA 文库筛选新靶基因
摘要：CRISPR 干扰（CRISPRi）筛选已用于使用单分子向导 RNA（sgRNA）文库识别与特定表型相关的靶基因。在 CRISPRi 筛选中，包含原始靶标识别序列的随机 sgRNA 文库的大小很大（∼ 10 12 ）。在本文中，我们证明 sgRNA 中的靶标识别序列（TRS）的长度可以从原来的 20 个核苷酸（N 20 ）缩短到 9 个核苷酸（N 9 ），这仍然足以使 dCas9 抑制大肠杆菌木糖操纵子中的靶基因，无论其与启动子还是开放阅读框区结合。基于结果，我们构建了 TRS 长度 5′ 缩短的随机 sgRNA 质粒文库，并通过对从 Xyl − 表型细胞中纯化的 sgRNA 质粒进行桑格测序来识别木糖代谢靶基因。接下来，利用随机 sgRNA 文库筛选靶基因，以增强合成大肠杆菌细胞中紫色素的产生。通过分析深紫色菌落中 sgRNA 质粒中的 TRS 冗余度，选择了 17 个靶基因。其中，已知有 7 个基因（tyrR、pykF、cra、ptsG、pykA、sdaA 和 tnaA）可增加细胞内 L-色氨酸池（紫色素的前体）。17 个细胞中每个靶基因有一个缺失，紫色素的产量显著增加。这些结果表明，使用缩短的随机 TRS 文库进行 CRISPRi 可以简单且经济高效地进行基于表型的靶基因筛选。关键词：CRISPR 干扰、失活 Cas9、随机文库、缩短的 sgRNA、靶标识别序列、紫色素、基于表型的靶标筛选■简介
增加谷物摄入量和减少咖啡摄入量可增加大脑体积：共同的遗传决定因素及其对认知和新陈代谢的影响
作者：康菊娇 MSc 1,2,3†、贾天野博士 2,3,4†*、焦泽宇 MSc 1,2,3、沉春博士 2,3、谢超 MSc 2,3、Wei Cheng 博士 2,3、Barbara J Sahakian DSc 2,3,5,6*、David Waxman 博士 2,3、冯剑峰 博士1,2,3,7,8* 5
使用高效无克隆 CRISPR/Cas9 系统对克氏锥虫中假定的 cAMP 和 Ca2+ 调节蛋白进行基因编辑
摘要 克氏锥虫是恰加斯病的病原体，在其生命周期中必须适应各种环境条件。对这些变化的适应由信号通路介导，这些信号通路协调细胞对新环境的反应。环磷酸腺苷 (cAMP) 和钙 (Ca 2+ ) 信号通路调节此寄生虫中的关键细胞过程，例如分化、渗透调节、宿主细胞侵袭和细胞生物能量学。尽管 CRISPR/Cas9 技术的使用促使人们利用反向遗传学方法对克氏锥虫进行功能分析，但仍有必要扩展此寄生虫的基因组编辑工具箱，例如进行多基因分析。在这里，我们使用了一种有效的 T7RNAP/Cas9 策略来标记和删除三个预测参与 cAMP 和 Ca 2+ 信号通路的基因：假定的 Ca 2+ /钙调蛋白依赖性蛋白激酶 ( CAMK )、鞭毛成员 6 ( FLAM6 ) 和环核苷酸结合域/C2 结构域含蛋白 ( CC2CP )。我们内源性地标记了这三个基因并确定了标记蛋白的亚细胞定位。此外，用于敲除这些基因的策略使我们推测 TcCC2CP 是克氏锥虫上鞭毛体中的必需基因。我们的研究结果将为未来研究这些蛋白质在克氏锥虫中的作用开辟新的途径。
饱糖苷减轻高脂饮食诱导的炎症和2型
这项研究旨在研究叶糖苷对高脂饮食喂养大鼠的生化变化的影响。成年雄性Wistar大鼠通过给予高脂饮食和蔗糖60天诱导糖尿病状态，然后口服甜叶菊（20 mg/kg/day），持续45天。各种参数，包括空腹血糖，口服葡萄糖耐受性，胰岛素，胰岛素耐受性，肝功能（ALT，AST，AST，ALP），肾功能（尿素和肌酐）以及脂质谱（TC，TG，TG，TG，TG，FFA，FFA，HDL-C和LDL-C和LDL-C和LDL-C），诸如LATED pectincin，例如LADETICERID lADETICER LADEPTIN，例如LASTIPINCINCINCINECTIN。Stevioside治疗显着改善了糖尿病大鼠的葡萄糖和胰岛素耐受性，并将其空腹血糖，血清胰岛素和脂质谱的水平归一化。在高脂饮食诱导的2型糖尿病大鼠模型中，甜叶菊有效地恢复了血清水平的改变，证明功效与二甲双胍的疗效相当。因此，Stevioside显示出有望作为管理2型糖尿病的潜在植物医学。
主要文章对诊断方面的系统回顾...
摘要简介：锥虫是一种原生动物，可感染多种家养和野生哺乳动物，在拉丁美洲国家分布广泛。T. rangeli 感染与查加斯病相似，无论是在诊断方面还是在预防方面。因此，本研究的目的是回顾 T. rangeli 作为克氏锥虫感染免疫原的诊断方面和用途。方法：为了进行这项研究，采用了系统评价和荟萃分析的首选报告项目 (PRISMA) 指南，描述符来自 PubMed/MEDLINE 和 SciELO 数据库中的医学主题词 (MeSH) 平台。纳入标准定义为关于“Trypanosoma rangeli”和人类 T. rangeli 感染诊断方面的原创文章和/或使用 T. rangeli 菌株开发用于克氏锥虫感染的可能疫苗的研究。结果：根据纳入和排除标准，共收集到 18 篇文章，其中 4 篇文章涉及使用 T. rangeli 为脊椎动物的 T. cruzi 感染开发的可能疫苗的研究，其余 14 篇文章主要涉及人类 T. rangeli 感染的诊断方面。结论：在本研究中，我们汇编了有关该主题的重要文献，强调需要更准确、更易于获取的技术来鉴别诊断两种原生动物引起的感染，并强调了寻找查加斯病疫苗的几种前景。关键词：Trypanosoma rangeli。克氏锥虫。疫苗。诊断。