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凝胶和PCR纯化系统
。WB（80％ETOH）。（*）3。您需要将其与UB混合到PCR产品。•如果UB不混合，直到UB完全反应，则可以降低纯化效率。•加入Bu e e e e e e e e ef bu o o a和样品后，将其轻轻移动约4至5次。4。在EB使用前将列送给列以删除ETOH。（*）。根据 pcr产品纯化目的选择二聚体去除条件，高收率条件和凝胶提取。 （凝胶提取通过高产量方法进行）6。 为提高凝胶提取的效率，我们使用高质量的琼脂糖。 •将凝胶块放入UB中，完全溶解在50〜65℃中，然后将其添加到列中。 •在琼脂糖凝胶中的百分比百分比中，在纯化时将UB超过6倍。 7。 DNA柱绑定您可以在获得更高的屈服DNA之前使用heldbbs获取列。 8。 当周围温度降低时，可以确定 UB。 在这种情况下，在微波炉或干烤箱中加热后使用。 9。 当 DNA洗脱时，EB在50°C下预热10分钟，洗脱将提高效率。 （特别是对于大型DNA片段）10。 请参阅Cadalog的Q.C数据页，以获取其他高收益率。 （*）仅当您使用WB为80％EtOH 时才pcr产品纯化目的选择二聚体去除条件，高收率条件和凝胶提取。（凝胶提取通过高产量方法进行）6。为提高凝胶提取的效率，我们使用高质量的琼脂糖。•将凝胶块放入UB中，完全溶解在50〜65℃中，然后将其添加到列中。•在琼脂糖凝胶中的百分比百分比中，在纯化时将UB超过6倍。7。DNA柱绑定您可以在获得更高的屈服DNA之前使用heldbbs获取列。8。UB。在这种情况下，在微波炉或干烤箱中加热后使用。9。DNA洗脱时，EB在50°C下预热10分钟，洗脱将提高效率。（特别是对于大型DNA片段）10。请参阅Cadalog的Q.C数据页，以获取其他高收益率。（*）仅当您使用WB为80％EtOH
纯化外泌体 - 方法和...
1简介1 2背景2 2.1什么是外泌体？2 2.2 Exosome structure and interaction 4 2.3 Application of exosomes 6 2.4 Isolation of exosomes 7 2.5 Quality control measures 8 2.6 The focus of this report 8 3 Non-chromatography methods for exosome purification 9 3.1 Ultracentrifugation 9 3.1.1 Advantages and disadvantages of ultracentrifugation 10 3.2 Ultrafiltration 10 3.2.1 Advantages and disadvantages of ultrafiltration 11 3.3 The principle of immunoaffinity 11 3.3.1 Advantages and disadvantages of immunoaffinity 11 3.4 Precipitation 12 3.4.1 Advantages and disadvantages of precipitation 12 3.5 Scalability of UC, UF and precipitation 13 4 Exosome purification using agarose chromatography techniques 14 4.1 Purification of exosomes based on size 16 4.1.1 Size-exclusion chromatography (SEC) 16 4.1.1.1 sec在EV和外部组中研究16 4.1.1.2使用SEC 17 4.1.1.3隔离EV的交联的Sepharose树脂，用于外部和EV-溶解的预包装的SEC柱18 4.1.1.4
纯化的小鼠抗DNA聚合酶Δ
描述DNA序列中的误差是由环境因素引起的，或在复制过程中由DNA聚合酶造成的。如果未检查，这些错误可能会累积遗传损害，以使细胞无法再起作用。因此，DNA修复过程涉及切除受损序列的机制以及适当序列的重新合成和连接。在哺乳动物细胞中，该校对功能在50kDa亚基的异二聚体（POL）δδ二个亚基的DNA聚合酶（POL）δ中取决于，在PCNA（增殖细胞核抗原）和125KDA催化亚基的存在下刺激POLδ活性。催化亚基具有3'至5'的核酸外切酶活性，将polδ与polα和polβ区分开。 polδ也是DNA复制的核心，在复制叉处的铅链合成中起作用。该催化亚基被G1依赖性激酶 - 周期蛋白复合物磷酸化，并通过其N末端249氨基酸与CDK2相互作用。但是，磷酸化对POLδ活性几乎没有影响。因此，DNA聚合酶ä对于DNA复制至关重要，并且在DNA切除修复过程中替换受损序列的能力是独一无二的。
血液或体液中的DNA纯化（自旋方案）
开始之前要做的事情■将样品平衡到室温（15–25°C）。■将水浴或加热块加热到56°C以供步骤4使用。■在步骤11中平衡缓冲液或蒸馏水到室温。■确保根据第16页的说明准备了缓冲液AW1，Buffer AW2和Qiagen蛋白酶。■如果在缓冲液中形成沉淀物，请在56°C下孵育。
白色念珠菌的克隆、纯化和特性
胸苷酸合酶 (TS) 已在多种生物体中得到鉴定，并且是癌症化疗中已证实的靶点 (25)。TS 应该是白色念珠菌（一种常见的真菌病原体）的良好化疗靶点，因为该酶的产物 dTMP 只能在酵母中从头合成；酵母缺乏胸苷激酶，并且胸腺嘧啶、胸苷和 dTMP 无法渗透 (6)。有效抑制酵母中的 TS 会导致死亡，因为这些生物体无法产生自己的 dTMP 或从环境中获取它。5-氟胞嘧啶可在体外和体内抑制白色念珠菌和几种其他真菌 (3)。此外，用 5-氟胞嘧啶 (9) 处理白色念珠菌会导致 5-氟-dUMP 积累并抑制 TS，因此表明该酶是真菌的化疗靶点。从体外靶酶表征中获得的信息有助于设计新的潜在化疗剂。大量纯酶的可用性促进了此类研究。由于白色念珠菌培养物中存在低水平的 TS，因此在大肠杆菌中克隆和过表达了白色念珠菌 TS。我们报告了通过功能补充缺乏 TS 的酿酒酵母菌株分离白色念珠菌 TS 基因。该基因的序列包括基因 5' 端约 400 个碱基对 (bp) 的 DNA 和一段较短的 3' 侧翼区，并使用 T7 表达载体在大肠杆菌中表达。制备了来自白色念珠菌和大肠杆菌的纯化酶，并检查了其特性，以确保在大肠杆菌中表达的克隆 TS 酶与白色念珠菌的天然 TS 酶相同。
通过流式细胞术和分选测量和纯化人类染色体
分离染色体的流式细胞术是细胞遗传学的一种新方法，可快速测量单个中期染色体。在这种方法中，用适当的荧光染料染色的水悬浮液中的染色体被限制在激发染料的窄激光束中高速流动。发射的荧光通过光度法测量，累积的数据形成染色体荧光的频率分布。该频率分布的峰值归因于单个染色体或具有相似荧光的染色体组；峰值平均值与染色体荧光成正比，峰值面积与染色体出现频率成正比。因此，频率分布可作为核型（1、2）。此外，流式分选可根据染色体的染色特性分离染色体（3、4），这与传统的中期染色体纯化方法不同，后者依赖于速度或等密度沉降、区域离心或选择性过滤（5）。纯化单个中期染色体很重要，原因如下。富集或纯染色体部分已进行生化分析，以提供有关 DNA 或蛋白质结构的信息（6），将遗传信息转移到整个细胞（7-9），或通过体外杂交绘制基因图谱（10）。但一般来说，传统技术无法提供足够纯度的染色体，无法进行高分辨率生物或生化研究。通过基于溴化乙锭荧光的流式分选，我们以 90% 的纯度将雄性鹿 Muntiocus muntjak (2n = 7) (4) 的每个染色体和中国仓鼠 M3-1 细胞系的 14 种染色体类型分离成 8 个染色体组 (1, 3)。在我们之前对溴化乙锭染色的人类染色体的研究中，我们仅从雄性 (2n = 46) 的 24 种染色体类型中分辨出 8 个染色体组 (2, 3)。在本研究中，使用 DNA 荧光染料 33258 Hoechst 和改进的仪器，
纯化的抗catalase抗体
描述过氧化氢酶是一种含血红素的同型蛋白，将过氧化氢分解为水和氧气，以防止细胞中羟基自由基的产生。已广泛研究过氧化氢酶在细胞氧化应激防御中的作用。过氧化氢酶的过表达使细胞对过氧化氢诱导的毒性和氧化剂介导的缺氧损伤具有更大的抗性。过表达过氧化氢酶的转基因小鼠受到adriamycin治疗后的心肌损伤。尽管过氧化氢酶基因敲除小鼠，但它们显示出对氧化组织损伤的差异敏感性。大脑特别容易受到氧化应激的影响。过氧化氢酶的异常和功能障碍已在神经退行性疾病（例如帕金森氏病和阿尔茨海默氏病）中表明。过氧化氢酶的活性显示在帕金森衍生的黑质和壳质组织中降低。在阿尔茨海默氏病的体外细胞模型中，聚集的淀粉样蛋白β表现出对过氧化氢酶的高亲和力，导致过氧化氢的积累和氧化应激增加。
纯化的抗Cox IV抗体
仅用于研究使用。不是用于诊断或治疗用途。此产品提供遵守条款和条件的约束，包括位于www.biolegend.com/terms上的有限许可（“条款”），并且只能按条款提供。在不限制上述内容的情况下，Biolegend产品不得用于该术语中定义的任何商业目的，以任何形式转售，用于制造或反向工程，测序或以其他方式研究或用于学习或用于学习其设计或组合的情况，而无需明确的书面批准。不管本文档中给出的信息如何，用户都全权负责确定用户预期使用所需的任何许可要求，并假设使用产品所带来的所有风险和责任。Biolegend对专利侵权或任何其他风险或负债概不负责。Biolegend，Biolegend徽标和所有其他商标都是Biolegend，Inc。或其各自所有者的财产，并且所有权利都保留。8999 Biolegend Way，圣地亚哥，加利福尼亚州92121 www.biolegend.com免费电话：1-877-bio-legend（246-5343）电话：（858）768-5800传真：（877）455-9587
纯化的抗药抗体-F38P7H9
仅用于研究使用。不是用于诊断或治疗用途。此产品提供遵守条款和条件的约束，包括位于www.biolegend.com/terms上的有限许可（“条款”），并且只能按条款提供。在不限制上述内容的情况下，Biolegend产品不得用于该术语中定义的任何商业目的，以任何形式转售，用于制造或反向工程，测序或以其他方式研究或用于学习或用于学习其设计或组合的情况，而无需明确的书面批准。不管本文档中给出的信息如何，用户都全权负责确定用户预期使用所需的任何许可要求，并假设使用产品所带来的所有风险和责任。Biolegend对专利侵权或任何其他风险或负债概不负责。Biolegend，Biolegend徽标和所有其他商标都是Biolegend，Inc。或其各自所有者的财产，并且所有权利都保留。8999 Biolegend Way，圣地亚哥，加利福尼亚州92121 www.biolegend.com免费电话：1-877-bio-legend（246-5343）电话：（858）768-5800传真：（877）455-9587
纯化的抗VDAC1抗体（以前的Covance目录＃MMS-5205）
仅用于研究使用。不是用于诊断或治疗用途。此产品提供遵守条款和条件的约束，包括位于www.biolegend.com/terms上的有限许可（“条款”），并且只能按条款提供。在不限制上述内容的情况下，Biolegend产品不得用于该术语中定义的任何商业目的，以任何形式转售，用于制造或反向工程，测序或以其他方式研究或用于学习或用于学习其设计或组合的情况，而无需明确的书面批准。不管本文档中给出的信息如何，用户都全权负责确定用户预期使用所需的任何许可要求，并假设使用产品所带来的所有风险和责任。Biolegend对专利侵权或任何其他风险或负债概不负责。Biolegend，Biolegend徽标和所有其他商标都是Biolegend，Inc。或其各自所有者的财产，并且所有权利都保留。8999 Biolegend Way，圣地亚哥，加利福尼亚州92121 www.biolegend.com免费电话：1-877-bio-legend（246-5343）电话：（858）768-5800传真：（877）455-9587