NucleOmag®HMWDNA试剂盒设计用于从细胞,组织和植物材料中分离出高分子量DNA。此外,还显示了全血(EDTA),唾液,颊拭子以及细菌和酵母样品的兼容性。该程序基于在适当的缓冲液条件下核酸对顺磁珠的可逆吸附。样品裂解是使用裂解缓冲液HM1或HMB和蛋白酶K进行酶促的。用于将核酸与顺磁珠,结合缓冲液HM2和核瘤®B-珠的结合添加到转移和清除的裂解物中。磁分离后,使用洗涤缓冲液HM3,HM4和70%乙醇洗涤顺磁珠以去除污染物和盐分。使用冲洗缓冲液HM5去除以前的洗涤步骤的残留乙醇。接下来,高度纯化的DNA用洗脱缓冲液HM6洗脱,可直接用于下游应用。可以手动使用NucleOmag®HMWDNA试剂盒,也可以在标准的液体处理仪器和自动磁分离器上自动化。
描述NF-κBp65,也称为NFKB3和RERA,是核因子KB(NF-KB)/RER家族的五个成员之一。非活性NF-κBp65在细胞质中被隔离为IκB抑制蛋白的复合物。激活NF-κB途径后,IκB蛋白会降解,从而将NF-κBp65释放到核。NF-κBp65与转录辅助因子的结合是通过丝氨酸276、529、536和471的磷酸化诱导的。作为转录因子,NF-κBp65对于细胞增殖,免疫反应,存活和凋亡至关重要。通过调节软骨细胞和成骨细胞分化和存活,NF-κBp65在骨骼发育中具有至关重要的作用。在几种癌症中过表达NF-κBp65充当癌基因,并与肿瘤发生,转移,肿瘤血管生成和化学抗性有关。
先前用于质粒DNA(PDNA)纯化的小规模方法无法满足该行业对足够数量的需求。大量的细菌裂解物是较大的体积发酵的结果,传统的大规模下流净化过程具有一些缺点和局限性。市场被认为会继续扩展,因此需要有效,具有成本效益和可扩展的纯化过程的需求显而易见。在pDNA产量和纯度之间存在至关重要的权衡,因此需要在色谱量化步骤中进行仔细考虑。每个步骤都会提高纯度,同时牺牲产量。为了达到更高程度的pDNA产量,最佳纯化需要一个单一的构图步骤,特别是与过滤结合的阴离子交换色谱(AEX)。另外,建议采用涉及AEX的两步纯化方法,然后是疏水相互作用色谱法(HIC),以消除互补杂质并达到高纯度。此外,建议使用整体色谱支撑物的利用来促进纯粹的纯化策略。这是由于整体促进了较高的结合能力,即使在高流速下,也可以确保稳健和一致的结果。
图 3. Bioanalyzer 2100 DNA 12000 右侧尺寸选择日期。A1:通过右侧去除步骤去除的 DNA 片段 – 0.5 倍。B1:通过右侧去除步骤去除的 DNA 片段 – 0.6 倍。C1:通过右侧去除步骤去除的 DNA 片段 – 0.7 倍。D1:通过右侧去除步骤去除的 DNA 片段 – 0.8 倍。E1:通过右侧去除步骤去除的 DNA 片段 – 1.0 倍。F1:通过右侧去除步骤去除的 DNA 片段 – 1.4 倍。A2:右侧尺寸选择后回收的 DNA 片段 – 0.5 倍/2.0 倍。B2:右侧尺寸选择后回收的 DNA 片段 – 0.6 倍/1.9 倍。C2:右侧尺寸选择后回收的 DNA 片段 – 0.7 倍/1.8 倍。 D2:右侧尺寸选择后回收的 DNA 片段 — 0.8×/1.7×。E2:右侧尺寸选择后回收的 DNA 片段 — 1.0×/1.5×。F2:右侧尺寸选择后回收的 DNA 片段 — 1.4×/1.1×。
仅供研究使用。不可用于诊断或治疗。本产品受条款和条件(包括有限许可,位于 www.biolegend.com/terms )(“条款”)的约束,并且只能按照条款中的规定使用。在不限制上述条款的情况下,未经 BioLegend 明确书面批准,不得将 BioLegend 产品用于条款中定义的任何商业用途、以任何形式转售、用于制造、逆向工程、测序或以其他方式研究或用于了解其设计或成分。无论本文档中提供的信息如何,用户均应全权负责确定用户预期用途所需的任何许可要求,并承担因使用产品而产生的所有风险和责任。BioLegend 对因使用其产品而导致的专利侵权或任何其他风险或责任概不负责。BioLegend、BioLegend 徽标和所有其他商标均为 BioLegend, Inc. 或其各自所有者的财产,保留所有权利。 8999 BioLegend Way,San Diego,CA 92121 www.biolegend.com 免费电话:1-877-Bio-Legend(246-5343) 电话:(858)768-5800 传真:(877)455-9587
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描述DNA序列中的误差是由环境因素引起的,或在复制过程中由DNA聚合酶造成的。如果未检查,这些错误可能会累积遗传损害,以使细胞无法再起作用。因此,DNA修复过程涉及切除受损序列的机制以及适当序列的重新合成和连接。在哺乳动物细胞中,该校对功能在50kDa亚基的异二聚体(POL)δδ二个亚基的DNA聚合酶(POL)δ中取决于,在PCNA(增殖细胞核抗原)和125KDA催化亚基的存在下刺激POLδ活性。催化亚基具有3'至5'的核酸外切酶活性,将polδ与polα和polβ区分开。 polδ也是DNA复制的核心,在复制叉处的铅链合成中起作用。该催化亚基被G1依赖性激酶 - 周期蛋白复合物磷酸化,并通过其N末端249氨基酸与CDK2相互作用。但是,磷酸化对POLδ活性几乎没有影响。因此,DNA聚合酶ä对于DNA复制至关重要,并且在DNA切除修复过程中替换受损序列的能力是独一无二的。
NucleOmag®HMWDNA试剂盒设计用于从细胞,组织和植物材料中分离出高分子量DNA。此外,还显示了全血(EDTA),唾液,颊拭子以及细菌和酵母样品的兼容性。该程序基于在适当的缓冲液条件下核酸对顺磁珠的可逆吸附。样品裂解是使用裂解缓冲液HM1或HMB和蛋白酶K进行酶促的。用于将核酸与顺磁珠,结合缓冲液HM2和核瘤®B-珠的结合添加到转移和清除的裂解物中。磁分离后,使用洗涤缓冲液HM3,HM4和70%乙醇洗涤顺磁珠以去除污染物和盐分。使用冲洗缓冲液HM5去除以前的洗涤步骤的残留乙醇。接下来,高度纯化的DNA用洗脱缓冲液HM6洗脱,可直接用于下游应用。可以手动使用NucleOmag®HMWDNA试剂盒,也可以在标准的液体处理仪器和自动磁分离器上自动化。
系统是一种逆流离心系统,与手动离心相比,具有提高的分离效率。通过将离心力与流体的反流相结合,旋转系统可以根据其密度和尺寸来精确地分离细胞悬浮液中的不同组件。这项技术提供了增加的吞吐量,减少的处理时间以及改善的可重复性。Rotea系统的多功能性以其处理大量起始材料和更高的处理流速的能力突出显示,使其适合工业规模的生产。它与多种细胞类型和应用兼容,使其成为生物制药公司,研究机构和临床实验室的宝贵工具。
仅用于研究使用。不是用于诊断或治疗用途。此产品提供遵守条款和条件的约束,包括位于www.biolegend.com/terms上的有限许可(“条款”),并且只能按条款提供。在不限制上述内容的情况下,Biolegend产品不得用于该术语中定义的任何商业目的,以任何形式转售,用于制造或反向工程,测序或以其他方式研究或用于学习或用于学习其设计或组合的情况,而无需明确的书面批准。不管本文档中给出的信息如何,用户都全权负责确定用户预期使用所需的任何许可要求,并假设使用产品所带来的所有风险和责任。Biolegend对专利侵权或任何其他风险或负债概不负责。Biolegend,Biolegend徽标和所有其他商标都是Biolegend,Inc。或其各自所有者的财产,并且所有权利都保留。8999 Biolegend Way,圣地亚哥,加利福尼亚州92121 www.biolegend.com免费电话:1-877-bio-legend(246-5343)电话:(858)768-5800传真:(877)455-9587