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World File Search System莱茵
TIM，一种利用 CRISPR/Cas9 在莱茵衣藻中进行的定向插入诱变方法
突变体的产生和随后的分析对于理解基因和蛋白质的功能至关重要。在这里，我们描述了 TIM，一种高效、经济、基于 CRISPR 的针对模型生物莱茵衣藻的靶向插入诱变方法。TIM 利用 Cas9 引导 RNA (gRNA) 核糖核蛋白 (RNP) 与外源双链（供体）DNA 一起递送到细胞中。供体 DNA 包含基因特异性同源臂和一个完整的抗生素抗性基因，该基因插入由 Cas9 产生的双链断裂处。在优化该方法的多个参数后，我们能够在两种不同的细胞壁菌株中为六种不同基因中的六种产生突变体，突变效率范围为 40% 到 95%。此外，这些高效率允许在单个实验中同时靶向两个不同的基因。 TIM 在许多参数方面都很灵活，可以使用电穿孔或玻璃珠法来传递 RNP 和供体 DNA。TIM 在 C . reinhardtii 中实现的突变率远高于之前报道的任何基于 CRISPR 的方法，并且有望对许多（如果不是全部）非必需核基因有效。
AMTC先进制造技术会议
ƒ Melinda Crane 博士，主持人 ƒ Johannes Henrich Schleifenbaum 教授，亚琛工业大学，DAP RWTH 教授兼主任，ACAM 总经理 ƒ Michael Süß 教授，欧瑞康，主席 ƒ Nikolaus A. Adams 教授，慕尼黑工业大学，空气动力学和流体力学系主任、机械工程学院院长 ƒ Armin Laschet，北莱茵-威斯特法伦州总理，北莱茵-威斯特法伦州总理 ƒ Achim Peltz，西门子股份公司，运动控制首席执行官
地理信息论坛
德国联邦国防军地理信息中心（ZGeoBw）司令基兴于 2020 年开始改造该训练区。目前，射击训练室已投入使用，森林作战区也将于明年投入使用。该工厂已经被北莱茵-威斯特法伦州和莱茵兰-普法尔茨州的众多单位使用。经过两年的紧张准备，铁拳射击场如今首次被训练部队使用。在奥伊斯基兴，目前已创造了所有条件，以便小队或小型战斗小组能够根据作战原则，在各种情况下从阵地上和移动中练习灭火。北莱茵-威斯特法伦州司令部司令、准将迪特尔·迈尔霍夫对北威州第四大射击场的建设进展给予了积极评价：“位于 Schavener Heide 的反坦克射击场是该州唯一的射击场，可供现役部队和国土安全部队使用。步兵训练的基础已经建立。”
使用 CRISPR/Cas9 技术敲除莱茵衣藻中的 Cia5 基因并评估对照和突变分离株中的二氧化碳封存
摘要：CRISPR/Cas9 技术是基因组编辑和靶基因突变的常用方法之一，最近已用于操纵莱茵衣藻等微藻。此外，该技术还可以通过研究遗传途径来改良藻类菌株，在对抗温室气体（例如二氧化碳）产生方面发挥作用。在藻类中，有几种对 CO 2 作出反应的基因和控制每种基因表达的调节剂；Cia5 是最关键的转录调节剂之一。在本研究中，我们使用 CRISPR/Cas9 技术敲除 Cia5 基因，并分析了莱茵衣藻进行 CO 2 封存的能力。我们的结果表明，在 0.5% CO 2 浓度下，莱茵衣藻在对照和突变体物种中的表现（即对 CO 2 处理的响应）均优于其他浓度。然而，对照微藻种群和突变种群之间的差异在于 CO 2 去除效率。此外，我们的研究结果显示，对照型分离物在 CO 2 浓度为 0.04%、0.5% 和 1% 时去除效率分别为 27%、37% 和 21%。然而，对于相同浓度的突变种群，观察到的去除效率分别为 16%、23% 和 9%。
莱茵衣藻乙酰辅酶A羧化酶（CrACCase）的计算机基因组编辑鉴定和功能蛋白变化
莱茵衣藻中的乙酰辅酶a羧化酶（CrACCase）是一种编码三酰甘油（TAG）和脂质（油体）合成的基因。CrACCase基因研究很少，尚未进行过计算机或体内遗传改造。在本研究中，我们为基因组编辑，特别是CrACCase提供了生物信息学精确信息。本研究旨在构建sgRNA并预测CrACCase假定突变蛋白的功能区域。根据分子鉴定结果，可以对最佳的CrACCase（GeneBank XM_001703135）进行计算机遗传改造。本研究中最佳的潜在 sgRNA 构建体为 GCGTCTGCTCAATCACACGGCGG、TTGAGGTCGGAACTCCAGCGG 和 AGGCAATACCCTCAATTGGGTGG，效率值分别为 79.27%、68.25% 和 65.17%。获得的最佳寡核苷酸 sgRNA 具有一个带有 NGG 的原间隔区相邻基序 (PAM) 位点，尤其是 CGG 和 TGG 的形式。工程化的 CrACCase 基因突变的位置位于莱茵衣藻基因组的 XM_001703135.1:1089 区域，尤其是在负链中。预测 CrACCase 蛋白具有 ACC 的羧基转移酶亚基、假定 PCC 的羧基转移酶亚基、酵母乙酰辅酶 A 羧化酶的人源化羧基转移酶结构域和乙酰辅酶 A 羧化酶的结构。 CrACCase 基因中的移码突变的变化影响了残基 D:C 92、95、111 和 114 处配体-蛋白结合位点功能区的结构变化，这些位点是锌离子结合位点。这种结构变化导致 CrACCase 蛋白的功能发生变化。这种生物信息学信息对于将来对 CrACCase 进行体内基因组编辑非常重要，这样就可以获得具有最高 TAG 产量或最高生物柴油（油体）产量的突变体。分子生物学家和生物技术专家可以将对莱茵衣藻中 CrACCase 基因的操纵应用于脂质百分比最高的其他微藻生物，以增加未来的生物能源产量。
tuv-rheinland-企业报告-2018-en.pdf
为持续增长设定的方向 我们预计，在未来几年中，这些价值将继续可持续地增长。随着2016年发起的集团内部重组的完成，将全球收益和客户责任交到了业务流手中，额外的优化项目旨在创建卓越的管理结构，例如已经部分完成的共享服务中心的建立，以高效处理内部服务请求，以及对IT基础设施改进的重大投资，执行委员会已经为持续的成功增长设定了方向。在今年，这一前瞻性定位将通过制定未来十年TÜV莱茵新战略来完成。总之，在这样的背景下，TÜV莱茵股份公司可以满怀信心地期待2019年及未来的岁月。
邀请到北莱茵河的联合立场...
#NRWWERDKLIMANEUTRALLARLAL：北莱茵 - 韦斯特帕利亚希望成为欧洲第一个类似气候的工业区。以这种方式，国家能源和气候防护公司NRW.Energy4Climimimplimim clime北莱茵 - 韦斯特帕利亚的公司和市政当局支持有效地实施气候保护措施并从中受益。的目标是加快能源行业，工业，热量和建筑物以及流动性的四个相关部门的转变，这些领域与NRW中共同负责90％以上的温室气体排放，以使北rhine-westphalia在未来的工业和服务位置尽快加强北部rhine-Westphalia。