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发现两种新型蝎毒肽激活 TRPML2 以损害 ZIKV 内化
发现两种新型蝎毒肽激活 TRPML2 以损害 ZIKV 内化摘要内溶酶体通道 TRPML2 调节膜运输和自噬等关键过程，这些过程在内吞过程中被许多 RNA 病毒劫持。然而，TRPML2 靶向疗法的发展因明显缺乏高亲和力和选择性肽激活剂而受到阻碍。蝎毒肽经过进化磨练，对不同的膜离子通道具有特殊的特异性，代表了一个有前途的、尚未充分开发的天然库，可用于发现新型药理学探针和药物先导化合物。在这里，我们利用免疫共沉淀结合液相色谱-串联质谱 (LC-MS/MS) 分析马氏巨鲵毒液，筛选并鉴定了与 TRPML2 相互作用的 7 个候选肽。基于分子对接分析，选择前四种候选物（MMTX、BmP05、BmTX1 和 BmKK12）进行化学合成，氧化环化形成其天然二硫桥构象，随后通过分析型 HPLC 和 MS 进行纯化和表征。钙成像证实，四种氧化肽中的两种，BmP05 和 BmKK12，在诱导 Ca2+ 流入急剧增加方面表现出卓越的效力。至关重要的是，BmP05 和 BmKK12 在非细胞毒性浓度下在 RNA 水平上表现出对寨卡病毒 (ZIKV) 复制的有效、浓度依赖性抑制，而较弱的激活剂 MMTX
来源:Arácnido发现两种新型蝎毒肽激活 TRPML2 以损害 ZIKV 内化
摘要
内溶酶体通道 TRPML2 调节膜运输和自噬等关键过程，这些过程在内吞过程中被许多 RNA 病毒劫持。然而，TRPML2 靶向疗法的发展因明显缺乏高亲和力和选择性肽激活剂而受到阻碍。蝎毒肽经过进化磨练，对不同的膜离子通道具有特殊的特异性，代表了一个有前途的、尚未充分开发的天然库，可用于发现新型药理学探针和药物先导化合物。在这里，我们利用免疫共沉淀结合液相色谱-串联质谱 (LC-MS/MS) 分析马氏巨鲵毒液，筛选并鉴定了与 TRPML2 相互作用的 7 个候选肽。基于分子对接分析，选择前四种候选物（MMTX、BmP05、BmTX1 和 BmKK12）进行化学合成，氧化环化形成其天然二硫桥构象，随后通过分析型 HPLC 和 MS 进行纯化和表征。钙成像证实，四种氧化肽中的两种，BmP05 和 BmKK12，在诱导 Ca 2+ 流入急剧增加方面表现出卓越的效力。至关重要的是，BmP05 和 BmKK12 在非细胞毒性浓度下在 RNA 水平上表现出对寨卡病毒 (ZIKV) 复制的有效、浓度依赖性抑制，而较弱的激活剂 MMTX 和 BmTX1 则不然。目前的研究首先报道了动物毒液衍生的肽，其作为特异性 TRPML2 激动剂并具有抗病毒活性。总之，我们的研究结果不仅为剖析 TRPML2 生物学提供了新的分子探针，而且为开发针对依赖于内溶酶体进入的病毒的宿主导向的广谱疗法提供了开创性的策略。