MaizeCUBIC 是一个免费数据库,描述了玉米 CUBIC 群体(24 个创始种和 1404 个近交后代)的基因组变异、基因表达、表型和数量性状位点 (QTL)。该数据库不仅包含之前已鉴定的超过 1400 万个单核苷酸多态性 (SNP) 和 43000 个插入/缺失信息,还包含本研究中新鉴定的 660000 个结构变异 (SV) 和 600000 个新序列,代表了多样化群体的全面高密度变异图谱。基于这些基因组变异,该数据库将显示每个后代的镶嵌结构,反映亲本基因组之间的高分辨率重组。该数据库还包括在五个地点对亲本和后代测量的总共 23 个农艺性状,这些地点代表了中国玉米的主要种植区。为了进一步探索基因型-表型关系,采用了两种不同的全基因组关联研究 (GWAS) 方法来剖析 23 种农学性状的遗传结构。此外,还开发了基本局部比对搜索工具和引物设计工具,以促进后续分析和实验验证。所有原始数据和相应的分析结果都可以通过用户友好的在线查询和 Web 界面动态可视化以及可下载文件访问。这些数据和工具为玉米和其他作物的遗传和基因组研究提供了宝贵的资源。
摘要 X 型胶原蛋白是一种由肥大性软骨细胞产生的非纤维胶原蛋白,被认为与生长板软骨的钙化过程有关。然而,小鼠中 Col10a1 基因的纯合缺失对生长板形成或骨骼发育无显著影响。为了研究 X 型胶原蛋白在人类软骨细胞中的作用,我们使用双 sgRNA CRISPR/Cas9 系统建立了具有杂合(COL10A1 + / )或纯合(COL10A1 / )COL10A1 基因缺失的人类诱导多能干细胞 (hiPSC)。建立了几个突变克隆,并通过先前报道的 3D 诱导方法将其分化为肥大性软骨细胞。亲本与突变细胞系在分化过程中无明显差异,均分化为具有肥大性软骨细胞特征的细胞,提示X胶原蛋白对于人软骨细胞体外肥大性分化而言并非必不可少。为探究X胶原蛋白缺乏对体内的影响,将增殖期或肥大前期的软骨细胞颗粒移植到免疫缺陷小鼠体内。增殖期颗粒衍生组织显示软骨细胞呈带状分布,并转变为模拟生长板的骨组织,且骨的比例在 COL10A1 / 组织中趋于较大。肥大前期颗粒衍生组织产生具有软骨内骨化特征的骨小梁结构,亲本与突变体衍生组织之间无明显差异。对处于肥大期的软骨细胞颗粒进行转录组分析显示,与亲本细胞颗粒相比,COL10A1 / 颗粒中增殖期基因表达较低,钙化期基因表达较高。这些体外和体内数据表明,胶原蛋白 X 对于人类 iPSC 衍生软骨细胞的肥大分化和软骨内骨化是可有可无的,尽管它可能促进分化过程。因此,COL10A1 / iPSC 系可用于研究胶原蛋白 X 在软骨细胞分化中的生理作用。© 2023 作者。JBMR Plus 由 Wiley Periodicals LLC 代表美国骨矿研究学会出版。
审查了通过全球脊髓灰质炎计划收集的脊髓灰质炎监测和实验室数据。在2021年8月至2023年7月期间,在六个国家中发现了NOPV2起源于61例和39个瘫痪案例和39个环境监测(污水)样本的七个CVDPV2。分离株在VP1衣壳蛋白编码区(6至16个核苷酸取代)中与亲本NOPV2疫苗菌株的差异有限,这表明在疫苗接种后相对较早地检测到的监测发现出现。该活动由CDC审查,认为不是研究,并与适用的联邦法律和CDC政策一致。*
自本世纪初以来,就使用了“临床惯性”一词。Allen等。 (9)提出临床惯性包括三个因素:医师因素,患者因素和办公室系统因素。 临床惯性表示,尽管有大量证据表明这些疗法的好处,但仍未使用有效的疗法来防止严重的临床终点。 在2015年,REACH(10)提供了包括以下临床惯性的描述:“有一个隐式或专家指南,医生意识到该准则,医生认为该指南适用于患者,医师有资源可以应用准则,但所有这些状况都符合所有这些状况,但请遵守该指南,但Dive dive n dive n dive neve neve in Condece 但是,已经注意到,在某些情况下,临床惯性可能代表临床保障措施,如果准则不适用于特定患者(4,11),则可以认为是合适的(4,11)。 这被称为“亲本临床惯性”(4)。 由于缺乏适当的护理知识,也可能发生临床医生无所作为,这也可以被视为临床惯性。 此外,临床惯性不应被称为“临床医生惯性”Allen等。(9)提出临床惯性包括三个因素:医师因素,患者因素和办公室系统因素。临床惯性表示,尽管有大量证据表明这些疗法的好处,但仍未使用有效的疗法来防止严重的临床终点。在2015年,REACH(10)提供了包括以下临床惯性的描述:“有一个隐式或专家指南,医生意识到该准则,医生认为该指南适用于患者,医师有资源可以应用准则,但所有这些状况都符合所有这些状况,但请遵守该指南,但Dive dive n dive n dive neve neve in Condece 但是,已经注意到,在某些情况下,临床惯性可能代表临床保障措施,如果准则不适用于特定患者(4,11),则可以认为是合适的(4,11)。 这被称为“亲本临床惯性”(4)。 由于缺乏适当的护理知识,也可能发生临床医生无所作为,这也可以被视为临床惯性。 此外,临床惯性不应被称为“临床医生惯性”但是,已经注意到,在某些情况下,临床惯性可能代表临床保障措施,如果准则不适用于特定患者(4,11),则可以认为是合适的(4,11)。这被称为“亲本临床惯性”(4)。由于缺乏适当的护理知识,也可能发生临床医生无所作为,这也可以被视为临床惯性。此外,临床惯性不应被称为“临床医生惯性”
背景:膀胱癌是全球十大最常见肿瘤类型之一,是日益严重的医疗保健问题,占医疗保健总成本的很大一部分。化疗对部分患者有效,但会导致严重的副作用。肿瘤发病机制和耐药机制在很大程度上尚不清楚。精准医疗在膀胱癌领域失败了,因为膀胱肿瘤在基因和分子上非常异质性。目前,治疗决策取决于对手术获得的单个肿瘤组织的评估。目标:膀胱癌的新型临床前模型系统对于制定针对个体患者和肿瘤特征的治疗策略是必不可少的。类器官是小型 3D 组织培养物,可“在培养皿中”模拟小尺寸器官,而类肿瘤是一种特殊类型的癌症类器官(即恶性组织)。材料和方法:自 2016 年以来,我们一直与著名的 Hubrecht 研究所合作,提供模仿亲本肿瘤的组织型膀胱类肿瘤的概念验证。我们开发了一个活体生物库,其中包含从 50 多个患者样本中培养的膀胱类器官和肿瘤类,这些肿瘤类反映了膀胱癌发病机制的关键方面。结果:组织学和免疫荧光分析表明,肿瘤类的异质性和亚分类与相应的亲本肿瘤样本相似。因此,尿路上皮肿瘤类模仿了膀胱癌发病机制的关键方面。结论:尿路上皮肿瘤类的研究将为膀胱癌发病机制和耐药性研究以及精准医疗方法开辟新途径。
HK-CRISPR-CAP-H-MEGFP细胞系是一种为晚期基因编辑和荧光应用而设计的人类衍生模型。该细胞系基于亲本人类细胞系,并已使用CRISPR-CAS9技术进行了修改,以表达用单体增强的绿色荧光蛋白(MEGFP)标记的CAP-H(染色体相关蛋白H)基因。这种修饰允许CAP-H的精确可视化和跟踪,CAP-H是冷凝蛋白复合物的组成部分,对于细胞分裂期间的染色体凝结和稳定至关重要。MEGFP标签提供了强烈而稳定的荧光信号,这使该细胞系非常适合活细胞成像和基于荧光的测定。
•探索胰岛素和GLP-1受体激动剂(GLP-1 RAS)的益处和挑战。•能够识别何时合适的胰岛素和/或GLP-1 RA开始。•探索考虑将胰岛素与GLP-1 RAS组合疗法的证据和好处,并解决开始和持续治疗方案。•了解不同的胰岛素类型,时间动作概况并提供设备•熟悉不同GLP-RA和双重激动剂和交付设备的作用方式。•探索正确注射技术,注射现场检查,检测和管理脂肪化亲本的实际方面。•了解如何滴定胰岛素•有效地确定何时需要加强胰岛素治疗。•请注意启动胰岛素和/或GLP-1RA的所有教育元素以及如何向患者传达关键信息。
Köhler和Milstein(1975)对杂交瘤技术的开发通过在研究和开发工作中的常规使用单克隆抗体(MAB)来彻底改变了免疫学领域,从而导致了他们今天在诊所的成功应用。 尽管需要重组良好的制造实践生产技术来生产临床级别的mAB,但学术实验室和生物技术公司仍然依靠原始的杂交瘤系列来稳定而轻松地以适度的价格生产高抗体产量。 在我们自己的工作中,我们在使用杂交瘤衍生的mAB时面临着一个主要问题:无法控制产生的抗体形式,这是重组产生确实允许的灵活性。 我们着手通过直接在杂交瘤细胞的免疫球蛋白(IG)基因座中的基因工程抗体来消除这一障碍。 我们使用了簇状的定期间隔短的短膜重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白9(CAS9)和同源指导修复(HDR)来修改抗体的格式[mAb或抗原结合片段(FAB')]和同型。 本协议在几乎没有动手的时间内描述了一种直接的方法,导致稳定的细胞系分泌高水平的工程抗体。 亲本杂交瘤细胞保持在培养中,并用针对IG基因座感兴趣的指导RNA(GRNA)转染了IG基因座和HDR模板,以敲击所需的插入物和抗生素耐药性基因。 通过施加抗生素压力,在遗传和蛋白质水平上扩展并表征抗性克隆,以产生改良的mAb而不是亲本蛋白。Köhler和Milstein(1975)对杂交瘤技术的开发通过在研究和开发工作中的常规使用单克隆抗体(MAB)来彻底改变了免疫学领域,从而导致了他们今天在诊所的成功应用。尽管需要重组良好的制造实践生产技术来生产临床级别的mAB,但学术实验室和生物技术公司仍然依靠原始的杂交瘤系列来稳定而轻松地以适度的价格生产高抗体产量。在我们自己的工作中,我们在使用杂交瘤衍生的mAB时面临着一个主要问题:无法控制产生的抗体形式,这是重组产生确实允许的灵活性。我们着手通过直接在杂交瘤细胞的免疫球蛋白(IG)基因座中的基因工程抗体来消除这一障碍。我们使用了簇状的定期间隔短的短膜重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白9(CAS9)和同源指导修复(HDR)来修改抗体的格式[mAb或抗原结合片段(FAB')]和同型。本协议在几乎没有动手的时间内描述了一种直接的方法,导致稳定的细胞系分泌高水平的工程抗体。亲本杂交瘤细胞保持在培养中,并用针对IG基因座感兴趣的指导RNA(GRNA)转染了IG基因座和HDR模板,以敲击所需的插入物和抗生素耐药性基因。通过施加抗生素压力,在遗传和蛋白质水平上扩展并表征抗性克隆,以产生改良的mAb而不是亲本蛋白。最后,修饰的抗体在功能测定中的表征。To demonstrate the versatility of our strategy, we illustrate this protocol with examples where we have (i) exchanged the constant heavy region of the antibody, creating chimeric mAb of a novel isotype, (ii) truncated the antibody to create an antigenic peptide-fused Fab' fragment to produce a dendritic cell–targeted vaccine, and (iii) modified both the constant heavy (CH)1 domain of the heavy chain (HC)和恒定的Kappa(Cκ)轻链(LC)引入位点选择性修饰标签,以进一步衍生纯化的蛋白质。仅需要标准的实验室设备,这有助于其在各种实验室中的应用。我们希望该协议能够进一步传播我们的技术并帮助其他研究人员。
本研究旨在确定黄秋葵基因型 Abelmoschus esculentus (L.) Moench 的果实产量相关性状的分子多样性和遗传分析。8 种黄秋葵基因型来自尼日利亚奥约州伊巴丹国家遗传研究和生物技术中心 (NACGRAB) 的黄秋葵种质资源收藏。本研究使用的 8 个 SSR 标记具有高度多态性,平均等位基因数为 6.63,平均多态信息含量为 0.76。引物将黄秋葵基因型分为 3 个簇。分别为 1、4 和 3 个黄秋葵基因型。三种黄秋葵基因型:NCB00303、NCB00396、NCB00466 在每株果实数量方面表现突出。因此,在未来的黄秋葵育种计划中,它们可以被选为有前途的供体亲本基因型。