暴露于高浓度 NaCl 的绿豆植株的生长、产量、生理参数、叶绿素含量、离子吸收(Na + 较少和 K + 离子较多)和养分含量均有所变化,冬季作物比夏季作物表现出更高的敏感性。然而,引入 B. pseudomycoides 产生了明显的缓解效果,这反映在植物生长、产量属性、生理参数、离子吸收和养分含量的改善上。研究结果强调了绿豆冬季和夏季作物对 NaCl 胁迫的不同反应,并强调了耐盐细菌作为减少盐分引起损害的可持续解决方案的潜力。这项研究为制定能够减轻盐分胁迫对不同季节绿豆作物的不利影响的弹性农业实践提供了宝贵的见解,从而提高了易受土壤盐渍化影响地区的粮食安全。
基因组编辑工具箱对于探索和利用非常规酵母物种作为细胞工厂至关重要,因为它们促进了基因组研究和代谢工程。非常规酵母中间假丝酵母 (Candida intermedia) 是一种在生物技术上很有趣的物种,因为它能够将多种碳源(包括林业和奶制品行业废弃物和侧流中的木糖和乳糖)转化为增值产品。然而,由于缺乏针对该物种的分子工具,迄今为止,进行基因操作的可能性有限。我们在此描述了一种针对中间假丝酵母 (C. intermedia) 的基因组编辑方法的开发,该方法基于电穿孔和基因删除盒,其中包含白色假丝酵母 NAT1 显性选择标记,两侧是与目标基因座同源的 1000 个碱基对序列。针对 ADE2 基因的线性删除盒最初导致的靶向效率 < 1%,这表明中间假丝酵母 (C. intermedia) 主要使用非同源末端连接来整合外来 DNA 片段。通过开发一种基于分裂标记的 C. intermedia 缺失技术,我们成功提高了同源重组率,实现了高达 70% 的靶向效率。对于无标记缺失,我们还将分裂标记盒与重组酶系统结合使用,从而能够通过标记回收构建双缺失突变体。总体而言,分裂标记技术被证明是一种快速可靠的 C. intermedia 基因缺失方法,这为揭示和增强其细胞工厂潜力提供了可能性。