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轮状病毒疫苗对降低轮状病毒相关腹泻的发病率和死亡率做出了巨大贡献 [1,2]。据报道,轮状病毒疫苗已经能够避免大约 28,000 名五岁以下儿童死亡;然而,尽管取得了这些巨大进步,撒哈拉以南非洲和亚洲的腹泻发病率下降并不像其他地区那么明显 [1]。这是因为与高收入国家相比,中低收入国家 (LMIC) 的轮状病毒疫苗效力降低 [3-5]。有几种原因可以解释 LMIC 轮状病毒疫苗效力降低。其中包括母体免疫和非免疫因素;其中包括抗体免疫球蛋白A (IgA) 和G (IgG)、人乳低聚糖和聚糖、粘蛋白和先天成分、乳铁蛋白 (LF)、乳粘蛋白 (LA) 和腱糖蛋白C (TNC),这些成分均存在于母乳中,并通过母乳喂养被婴儿获得 [6-10]。据推测,这些母乳成分通过其抗病毒中和活性影响轮状病毒疫苗的免疫原性,这种中和活性可能抑制活疫苗病毒在婴儿肠粘膜中成功复制并诱导免疫反应。众所周知,中低收入国家的母亲接触天然轮状病毒感染的可能性更高,因此轮状病毒特异性IgA (RV-IgA) 和IgG (RV-IgG) 水平也更高 [11,12]。通过母乳转移到婴儿的抗体可能会与活疫苗病毒结合并中和它,从而影响免疫原性。我们前期工作表明,母亲体内轮状病毒特异性抗体滴度越高,婴儿接种疫苗后发生血清转化的可能性就越小 [11]。据报道,乳铁蛋白 (LF) 和乳凝集素 (LA) 具有抗病毒和抗菌活性 [13-16],我们前期工作表明,LA 水平升高与婴儿血清转化能力下降有关 [17]。其他被认为会影响血清转化的因素包括缺乏各种微量营养素(如锌和维生素 A)、肠道微生物组干扰以及其他疾病状态(如 HIV 感染和腹泻),但本文未将其包括在内 [18,19]。其他因素(如轮状病毒株变异)也被认为是导致观察到的效力改变的原因 [20,21]。
。CC-BY-NC-ND 4.0 国际许可证(未经同行评审认证)是作者/资助者,他已授予 bioRxiv 永久展示预印本的许可。它是此预印本的版权持有者此版本于 2025 年 1 月 11 日发布。;https://doi.org/10.1101/2025.01.09.632058 doi:bioRxiv 预印本
摘要:嵌合现象是使用 CRISPR/Cas9 在胚胎中进行一步基因编辑的最重要限制,因为切割和修复有时会在受精卵的第一次 DNA 复制后发生。为了尽量降低嵌合现象的风险,本研究在细胞中释放 CRISPR/Cas9 后使用了可逆性 DNA 复制抑制剂。之前没有关于在猪胚胎中使用阿非迪霉素的信息,因此首先评估了不同浓度的该药物对 DNA 复制的可逆抑制和对胚胎发育的影响。用不同浓度和不同递送方法的 CRISPR/Cas9 测试了与阿非迪霉素孵育的效果。结果观察到了对 DNA 复制的可逆抑制,并且它具有浓度依赖性。确定了 0.5 µ M 的最佳浓度并将其用于后续实验。将该药物与 CRISPR/Cas9 一起使用后,观察到嵌合性减半,同时对胚胎发育产生不利影响。总之,使用可逆的 DNA 复制抑制提供了一种减少嵌合性的方法。然而,由于胚胎发育的减少,必须达到平衡才能使其使用可行。
附加信息:这是一个预先复制的,作者制作的版本的文章,在同行评审后接受了FEMS微生物学的发表。唱片的乔安娜·韦兰(Joanna Verran)和其他人的版本,动手生物膜!在公民科学项目中利用公众观众在培养康普茶膜时评估产量变异性,FEMS微生物学信件,第370卷,2023年,FNAD073'''可在线获得:https:///doi.org/10.1093/10.1093/femsle/femsle/femsle/fnad073。
SV40病毒基因组包括负责转录和复制的控制区域。该区域包含用于细胞和病毒蛋白的各种结合位点,促进了病毒基因表达和DNA复制的调节。1.启动子区域:tata-box和sp1结合位点与早期mRNA的转录有关。sp1是一种与SP1位点相互作用以启动转录的转录因子,对于早期基因表达至关重要。2.复制的原始(ORI):位于SP1位点附近,这种复制的最小起源跨度为65个碱基对,是DNA复制的起点。起源对于宿主细胞中病毒基因组的复制是必需的。3. Enhancer区域:位于原点的下游,增强子包含重复的72个BP段,以提高转录水平。该区域对于提高早期和晚期转录过程的效率至关重要。4. late启动子区域:该区域控制晚期mRNA的转录,对于病毒生命周期的后期,对病毒capsid蛋白的合成至关重要。5.T抗原结合位点:这些结合位点标记为1、2和3,在复制调节中起作用。T-抗原蛋白在这里结合,启动和控制SV40基因组的复制。6.蛋白结合位点(AP1,OBP,AP2,AP3):特定蛋白与AP1,OBP,AP2和AP3结合,影响转录和复制过程。这些位点是与宿主或病毒因素相互作用以促进病毒传播的调节元素。