这项研究得到了日本学术振兴会 (JSPS) KAKENHI(资助编号:18H03974、19KK0401、22K19238、23H00367、24K02010、22H04922(AdAMS))、日本科学技术振兴机构 COI-NEXT(JPMJPF2010)和日本医疗研究发展机构 (AMED)(24bm12230009)的支持。 名词解释(注1) CRISPR-Cas3:许多细菌都有一种名为CRISPR-Cas系统的防御系统,类似于适应性免疫。 CRISPR-Cas3属于1类CRISPR系统,2019年被报道为一种使用多蛋白复合物人工切割DNA的国产基因组编辑工具。 (注2)脱靶突变:在基因组编辑技术中,DNA序列中非预期的突变发生在特定目标序列以外的位置。最大限度地减少脱靶突变被认为对于基因组编辑技术的高度安全性至关重要。 (注3)长读测序:与传统方法相比,一次分析更长片段的DNA或RNA碱基序列的技术。在本研究中,我们使用了纳米孔测序方法,这是一种通过将序列穿过纳米级孔(纳米孔)实现高速解码的技术。
摘要目的:这项研究旨在比较各种抗氧化剂在防止阿霉素诱导的睾丸毒性和随后在大鼠中的男性不育症的组织学影响。研究设计:横断面研究。研究的地点和持续时间:这项研究是在2023年5月至2024年4月在巴基斯坦白沙瓦白沙瓦医学院的动物室和组织病理学实验室进行的。方法:研究中包括120只雄性大鼠。将大鼠分为六组:对照组,仅阿霉素组和四个接受阿霉素的治疗组以及不同的抗氧化剂。施用的抗氧化剂是维生素C,维生素E,辅酶Q10和硒。组织学分析,以评估抗氧化剂的损伤和保护作用的程度。结果:仅阿霉素组显示出具有统计学意义的组织学损害,包括精子发生和生精小管的变性的明显减少。抗氧化剂治疗的组表现出显着的保护作用,硒组表现出最高的保护水平,非常类似于对照组,其次是维生素E和辅酶Q10,这也提供了睾丸结构的实质性保存。结论:该研究得出的结论是,抗氧化剂,尤其是硒,维生素E和辅酶Q10,为大鼠抗霉素诱导的睾丸毒性提供了重大保护。这些发现表明可能使用这些抗氧化剂来缓解与阿霉素治疗相关的雄性不育症。
抽象造血是一个连续的过程,其中前体细胞在整个生命中都会增殖和分化。但是,控制这一过程的分子机械尚未明确定义。编码DNA结合同源域的含同源物基因是一个高度保守的基因网络。它们是在具有位置层次结构的发育胚胎中表达的簇中组织的。我们已经分析了四个人HOX基因座在红血病,叶虫细胞和单核细胞系中的表达,以研究人类HOX基因的物理组织是否反映了造血细胞分化过程中涉及的调节性层次结构。我们的结果表明,代表血液 - 诗分化的各个阶段的细胞显示出HOX基因表达的差异模式,并且HOX基因在可能包括整个基因座的块中协调或关闭。在分析的所有线路中,整个HOX4基因座都保持沉默,几乎所有HOX2基因在红血球细胞中都活跃,并在髓样限制的细胞中关闭。我们的观察结果提供了有关HOX基因调控的信息,并表明这些基因的坐标调节可能在血液早期阶段的谱系确定中起重要作用。
摘要DNA甲基化酶已从再生大鼠肝脏中的核中纯化660倍。该酶能够甲基化单链(SS)和双链(DS)DNA,唯一的反应产物是5-甲基胞霉素。先前未甲基化的双链DNA来自原核生物(M.luteus)以及Euka-ryotes(Ascaris suis)可以用作底物。合成共聚物(DG-DC)n。(DC-DG)N和(DG,DC)N也被甲基化。虽然SV40 DNA几乎不是甲基化的,但即使以超涂层形式,PM2 DNA也是一个很好的底板。甲基化酶在异源性luteus dna中的17个碱基中的1个,但在同源大鼠肝脏DNA中只有590分之一。M. uteus DNA的高甲基化水平,对甲基化嘧啶等属菌的分析和初步的二核苷酸分析表明,DNA中的所有CpGs都可以甲基化。
基因选择性转录因子通过与其靶基因调节区域内的特定DNA元件结合(1)。但是,并非完全定义此DNA结合的序列要求。几个参数,例如蛋白质 - 蛋白质相互作用与相邻结合的因素,DNA结构的影响(弯曲等)。),重要的是,结合位点与认知因子的比率确定给定转录因子是否可以有效地与相应的结合位点相互作用。体外和大概也在体内也是如此,对于确定转录因子是否会与其最佳识别序列的变体结合,因此,它的基因调节。在这些考虑因素中提示,我们询问是否存在一种蜂窝机制,该机制是否存在在转录因子活动和可用目标位点的繁琐之间保持平衡。对AP-1家族成员的特征良好转录因子C-Jun进行了实验(2-4)。包含AP-1结合位点的启动子是C-Jun调节的目标。C-Jun的活性受到多种机制的紧密控制,并且对蛋白质的异常调节会导致恶性转化和致癌作用(5)。在这项研究中,我们描述了一种机制,该机制通过改变其磷酸化态的DNA结合活性,取决于细胞中存在的C-Jun结合位点的浓度。这种机制可以用来设置和微调C-Jun与其结合位点的比率。有趣的是,与这种现象有关的磷酸化位点与以前据报道经历信号依赖性去磷酸化相同。
通过刺激的人外周血淋巴细胞表达IL-13。用佛波尔12-溶解剂13-乙酸盐(PMA; Sigma,Cat。编号p-8139; 50 ng/ml)和离子霉素(Sigma,Cat。编号I-0634; 1μg/ml)在Golgistop™蛋白传输抑制剂的存在下(CAT。 编号 554724)。 用BD Cytofix™固定缓冲液固定细胞(CAT。 编号 554655),然后用BD/WASH™缓冲液洗涤并染色(CAT。 编号 554723)fitc小鼠抗人CD4抗体(CAT。) 编号 566911)和任何BD Horizon™RY610 RY610 RY610 IgG1,κ同种型对照(CAT。 编号 571676;左图)或BD Horizon™RY610大鼠抗人IL-13抗体(Cat。 编号 571260/571320;右图)使用BD Biosciences的细胞内细胞因子免疫荧光染色用于流式细胞仪分析方案。 双变量伪色密度图显示IL-13(或Ig同型对照染色)的相关表达与CD4的相关表达是从具有完整淋巴细胞的正向和侧面光片段特征的封闭事件中得出的。 使用BD Symphony A5™单元分析仪系统和FlowJo™软件进行流式细胞仪和数据分析。I-0634; 1μg/ml)在Golgistop™蛋白传输抑制剂的存在下(CAT。编号554724)。用BD Cytofix™固定缓冲液固定细胞(CAT。编号554655),然后用BD/WASH™缓冲液洗涤并染色(CAT。编号554723)fitc小鼠抗人CD4抗体(CAT。编号566911)和任何BD Horizon™RY610 RY610 RY610 IgG1,κ同种型对照(CAT。编号571676;左图)或BD Horizon™RY610大鼠抗人IL-13抗体(Cat。编号571260/571320;右图)使用BD Biosciences的细胞内细胞因子免疫荧光染色用于流式细胞仪分析方案。双变量伪色密度图显示IL-13(或Ig同型对照染色)的相关表达与CD4的相关表达是从具有完整淋巴细胞的正向和侧面光片段特征的封闭事件中得出的。使用BD Symphony A5™单元分析仪系统和FlowJo™软件进行流式细胞仪和数据分析。
摘要目的:在多发性硬化症的大鼠模型中,确定辅酶Q10&L-肉碱对少突胶质细胞坏死和髓鞘的协同作用。研究设计:基于实验室的实验研究。研究的地点和持续时间:该研究是在2022年3月至2022年5月与NIH伊斯兰堡合作的12周期间,于2022年3月至2022年在巴基斯坦伊斯兰国际医学院拉瓦尔品第进行了研究。方法:总共五十只雄性Sprague Dawley大鼠分为五个随机组,每个组都有一个独特的治疗计划。虽然第1组接受了标准饮食,但剩下的四组被多发性硬化症诱导,并在12周的时间内给予0.2%的Cuprizone(CPZ)。四周后,将第3组的辅酶Q10/泛氨酸酮(COQ10)的150 mg/kg/天提供,第4组接受了100 mg/kg/kg/day l- carnitine(l car),而第5组则通过两者的组合进行治疗,同时仍接受CPZ。完成为期12周的方案后,牺牲了大鼠,并提取了大脑。H&E染色,以评估少突胶质细胞坏死的任何变化,而Luxol Fast Blue(LFB)染色用于可视化髓鞘中的改变。结果:在控制少突胶质细胞坏死和控制髓磷脂的液泡方面,COQ10和L型车的组合明显好于单个药物,这是ANOVA和F-TEST的证明。因此,强烈建议同时针对患有多发性硬化症患者的两种药物开出两种药物,因为它可能为患者提供更大的优势。结论:这项研究明确地证明,与单独使用相比,将COQ10和L型车一起同时对促进髓鞘性和防止少突胶质细胞坏死具有更大的作用。
糖尿病微血管病是糖尿病患者的典型且严重的问题,包括糖尿病性视网膜病,糖尿病性肾病,糖尿病神经病和糖尿病性心肌病。2型糖尿病和糖尿病微血管并发症患者的不对称二甲基精氨酸(ADMA)的水平显着升高,这是一种一氧化氮合酶(NOS)的内源性抑制剂。ADMA通过其对内皮细胞功能,氧化应激损伤,炎症和纤维化的影响,促进了2型糖尿病中微血管并发症的发生和进展。本文回顾了糖尿病的ADMA和微血管并发症之间的关联,并阐明了ADMA导致这些并发症的潜在机制。它为预防和治疗2型糖尿病的微血管并发症提供了一种新的想法和方法。
摘要 目的:比较特级初榨橄榄油和苹果醋对 2 型糖尿病大鼠的抗氧化作用。研究设计:随机对照试验。研究地点和持续时间:本研究于 2021 年 5 月至 2021 年 6 月在巴基斯坦拉合尔研究生医学研究所动物房进行。方法:在本研究中,将 40 只雄性 Sprague Dawley 大鼠分成 4 组,即第 I 组为 NC(阴性对照),第 II 组为 PC(阳性对照),第 III 组为 EVOO(特级初榨橄榄油)和第 IV 组(苹果醋),每组 10 只大鼠。除 NC 组大鼠外,所有大鼠在研究开始时均通过腹膜内注射烟酰胺诱发糖尿病,15 分钟后注射链唑嗪 (STZ)。第 III 组每天给予 1ml/100gBW/ 毫升 EVOO,第 IV 组每天给予 2ml/kg BW/ 毫升用蒸馏水以 1:5 的比例稀释的 ACV,持续 4 周。4 周后取样以确定血清中的氧化应激标志物丙二醛、超氧化物歧化酶和总抗氧化状态。结果:与阳性对照组相比,EVOO 和 ACV 的摄入显示血清丙二醛水平降低,P 值分别为 0.000 和 0.014。阳性对照组血清超氧化物歧化酶活性和总抗氧化状态最低,而两个治疗组的这些参数与阳性对照组相比均显着增强,P 值 = 0.000。结论:特级初榨橄榄油和苹果醋均对 2 型糖尿病大鼠具有抗氧化作用。然而,特级初榨橄榄油更有效。
肥胖和超重状况分别或与II型糖尿病(T2DM)共同发生,现在在全球范围内发生,整个工业化社会的发病率令人震惊。1-4无序的胃生理学是糖尿病中的常见观察结果,包括T2DM早期快速排空的过程和T2DM和类型1型的后期,胰岛素依赖性糖尿病(IDDM)的过程。5肽激素淀粉蛋白与胰岛素共同分泌,以响应餐食,并促进代谢作用,这些作用通常与胰岛素的互补作用,并且两种激素都在T2DM和胰岛素抵抗中无序。6此外,加速胃排空的常见的SIRT-1动作也可能导致胃功能的失调,包括T2DM中的食欲。7-9因此,胰岛素分泌和组合调节功能的损害通常也会以Amylin分泌和SIRT1动作的畸变反映。6-9包括淀粉蛋白的各种激素作用中,激素通常有助于通过位于胃上皮的Antrum上的淀粉蛋白受体的胃排空生理过程,在此有效地延迟了胃空的一致性和时机。6激活后,链淀粉蛋白受体调节酸辣椒消化剂从胃到近端十二指肠的时机和过渡,然后消化剂可以暴露于腔葡萄糖酶和胰腺中和成分和消化酶。6相比,在IDDM中,因此,与SIRT1作用共同调节淀粉蛋白受体活性的失调可能导致T2DM和IDDM糖尿病形式的胃功能失调。5-9此外,肥胖和T2DM的高胰岛素血症和高氨基血症至少在某种程度上导致了胰岛素和氨基蛋白耐药性现象,因为它在这些条件下通过激素受体受体活性的原发性或次要下调在这些条件下发生。