摘要:证明是卵巢Betaceum(tamarillo)中的体细胞胚发生,因为可以从不同的epplants中诱导胚胎胜任的细胞系,因此可以从不同的植物中诱导胚胎胜任的细胞系,这是研究形态发生的有效模型系统。然而,尚未针对该物种实施胚胎愈伤组织(EC)的有效遗传转化系统。在这里,描述了使用tumefaciens的遗传转化的优化较快的遗传转化方案。确定了EC对三种抗生素的敏感性,卡纳米霉素被证明是tamarillo愈伤组织的最佳选择剂。两种农杆菌菌株EHA105和LBA4404都带有p35sgusint质粒,含有β-葡萄糖醛酸酶的记者基因(GUS)和标记基因neomycin phosycin phossforsfransferase(NPTIII),用于测试该过程。采用了基于抗生素耐药性的遗传转化,冷震处理,椰子水,聚乙烯基吡咯烷酮和适当的选择时间表的成功。通过GUS分析和基于PCR的技术评估了遗传转化,并在耐卡那霉素的EC团中确定了100%的效率。用EHA105菌株遗传转化导致基因组中GUS插入的值更高。 提供的协议为功能基因分析和生物技术方法提供了有用的工具。遗传转化导致基因组中GUS插入的值更高。提供的协议为功能基因分析和生物技术方法提供了有用的工具。
蜡状芽孢杆菌是一种常见的食源性病原体,是人类食物中毒的重要原因。蜡状芽孢杆菌引起的疾病通常表现出两种主要症状,即呕吐或腹泻,具体取决于产生的毒素。据推测,在摄入受污染的蔬菜或加工食品后,产肠毒素的蜡状芽孢杆菌孢子会到达肠道,在那里发芽并产生导致食物中毒的肠毒素。在我们的研究中,我们观察到,孢子形成是蜡状芽孢杆菌在叶子中生存所必需的,但在即食蔬菜(如菊苣)中是可有可无的。我们证明,最初在孢子形成方面受损但在生物膜形成方面没有受损的蜡状芽孢杆菌营养细胞能够到达肠道并在小鼠模型中引起严重疾病。此外,我们的研究结果
新孢子虫主要感染牛,导致牛流产,估计每年对全球经济造成 10 亿美元的损失。然而,对其生物学的研究一直被忽视,因为既定范式认为它与其近亲、广泛研究的人类病原体弓形虫几乎完全相同。通过使用第三代测序技术重新审视基因组序列、组装和注释,我们在此表明,新孢子虫基因组最初是在与弓形虫同源的假设下错误组装的。我们表明这些物种之间发生了重大染色体重排。重要的是,我们表明最初命名为 Chr VIIb 和 VIII 的染色体确实融合了,从而将新孢子虫和弓形虫的核型都减少到 13 条染色体。我们重新注释了新孢子虫基因组,揭示了 500 多个新基因。我们对非光合质体和线粒体基因组进行了测序和注释,并表明尽管顶质体基因组几乎相同,但物种和菌株之间存在高水平的基因碎片化和重组。我们的结果纠正了目前在 N. caninum 和 T. gondii 基因组数据库中广泛分布的组装伪影,更重要的是,突出了线粒体是以前被忽视的变异源,并为改变同源性范式铺平了道路,鼓励重新思考基因组作为这些病原体比较独特生物学的基础。
未经同行评审认证)是作者/资助者。保留所有权利。未经许可不得重复使用。此预印本的版权所有者(此版本于 2020 年 4 月 8 日发布。;https://doi.org/10.1101/2020.04.07.029629 doi:bioRxiv preprint
图 1. 通过靶向 HER2 阳性细胞的 SSHEL 递送阿霉素可减轻小鼠肿瘤异种移植模型中的肿瘤负担。 (A) SSHEL 粒子组装示意图。 1 µm 直径的介孔二氧化硅珠 (灰色,SiO 2 ) 装载货物 (阿霉素,红色),然后将脂质双层 (磷脂酰胆碱) 应用于表面 (黄色) 以创建货物包裹的球形支撑脂质双层 (SSLB)。 然后将 SSLB 与 SpoVM 肽 (蓝色) 和 SpoIVA 蛋白 (绿色) 和 ATP 一起孵育以促进 SpoIVA 聚合。 插图:SpoIVA 含有与反式环辛烯 (TCO) 结合的工程 Cys。与同源点击化学分子四嗪结合的抗 HER2 亲和体 (蓝色星号) 孵育会形成共价二氢哒嗪键,从而导致亲和体显示在 SSHEL 表面。(B) 显示用 Alexa Fluor 488 (AF488) 荧光染料标记的共价连接亲和体的 SSHEL 的荧光显微照片。左图:使用 DIC 可视化的 SSHEL;右图:来自 AF488 的荧光。(C) 使用流式细胞术测量显示抗 HER2 AF488 (绿色) 的 SSHEL 的荧光,并与显示已知数量的等效可溶性荧光染料分子 (MESF) 的珠子产生的荧光进行比较,以计算每个 SSHEL 颗粒显示的抗 HER2 AF488 的数量。(D) 用 SpoIVA AF488 制成的载阿霉素 SSHEL 的荧光显微照片。左上:DIC;右上:SpoIVA AF488 的荧光;左下:阿霉素的荧光;右下:叠加,阿霉素和 SpoIVA AF488 。B 和 D 中的比例尺:1 µm。(EF)无胸腺裸鼠皮下(sc)接种 SKOV3 HER2 阳性卵巢癌细胞。当肿瘤体积达到 ~100 mm 3 时,在异种移植后的几天内,用 PBS(黑色圆圈)、(E) 60 µg 或 (F) 120 µg 阿霉素(红色方块)、含有等效剂量阿霉素的载阿霉素 SSHEL(绿色三角形)或不含货物的等效数量 SSHEL(蓝色倒三角形)对小鼠进行静脉内 (iv) 治疗,箭头所示(试验 1 为 18、21、25、28、32、35、39、43、46、50、54;试验 2 为 13、16、20、23、27、30、34、37),并测量肿瘤体积。数据点代表平均值;误差为 SD;n=7 只小鼠。P 值:*<.05;****<.001。 (GH) 分别在 (G) 第 60 天、(H) 第 41 天 (H,左) 或第 47 天 (H,右) 从 (EF) 小鼠体内切除的肿瘤。红色星号:溃疡肿瘤;蓝色星号:肿瘤 >1500 mm 3 ;橙色星号:从体重减轻 >10% 的小鼠体内切除的肿瘤。比例尺:10 mm。
换算系数 大气花粉或真菌孢子浓度应表示为每立方米空气中每日平均花粉粒或真菌孢子的数量。这可以使用以下公式计算,该公式考虑了所有相关因素。
Immunotherapy for Pancreatic Cancer (Principal Investigators: Peter A. Cohen, MD and Sandra J. Gendler, PhD) builds on findings that immunotherapy and chemotherapy can synergize against pancreatic cancer, also building on a newly perfected ability to activate and expand T-cells in culture which recognize cancer- associated MUC1, a novel form of vaccination performed entirely outside the body.I-II期试验,将环磷酰胺化疗与在Folfirinox之后的二线治疗中将环磷酰胺化学疗法与重新输注的T细胞接种疫苗相结合,将有助于优化针对胰腺癌的这种创新策略。
摘要:开发了一种采用 Percoll™ 梯度离心法从大西洋鲑 Salmo salar 的体肌组织中纯化 Kudoa thyrsites 孢子的方法。然后用高度纯化的孢子免疫近交系 BALB/c 小鼠,以衍生分泌 Kudoa 特异性单克隆抗体 (mAb) 的杂交瘤。通过免疫荧光显微镜和流式细胞术对 mAb 进行分析表明,几种 mAb 对 K. thyrsites 孢子表面的抗原具有特异性,而其他 mAb 与 K. thyrsites、K. paniformis 和 K. crumena 孢子的极性荚膜或极性细丝发生反应。使用表面结合 mAb 对孢子裂解物进行免疫印迹,结果显示 46 至 >220 kDa 的宽条带,而针对极性荚膜和极性细丝抗原的特异性 mAb 检测到不同分子量的更清晰条带,具体取决于 Kudoa 物种。K. thyrsites 孢子表面抗原的主要表位被证明是碳水化合物,这是由其对无水三氟甲烷磺酸处理的敏感性和对蛋白酶 K 处理的抗性决定的。使用 K. thyrsites 特异性 mAb 对分离的、完整的、透化的疟原虫和含有疟原虫的体细胞肌肉组织薄切片进行免疫荧光显微镜检查,发现在产生孢子的疟原虫和受感染的大西洋鲑鱼肉中都有孢子的强烈标记。通过免疫印迹法检测到的孢子只有 100 个,表明这些 mAb 具有用于开发基于现场的诊断测试的潜力。