Alu 是高拷贝数散在重复序列,在灵长类和人类进化过程中积累在基因附近。它们是现代人类结构变异的普遍来源。Alu 插入对基因表达的影响尚不明确,但有些影响与表达数量性状位点 (eQTL) 有关。在这里,我们直接测试多态性 Alu 插入与相同单倍型上的其他变体分离的调控作用。为了筛选具有此类影响的插入变体,我们使用了异位荧光素酶报告基因检测并评估了 110 种 Alu 插入变体,其中 40 多种可能在疾病风险中发挥作用。我们观察到了一系列效应,其中有显著的异常值会上调或下调荧光素酶活性。使用一系列报告基因构建体(包括 Alu 周围的基因组背景),我们可以区分 Alu 破坏另一个调节器的情况和 Alu 引入新调节序列的情况。接下来,我们重点研究了与乳腺癌相关的三个多态性 Alu 基因座,这些基因座在报告基因检测中表现出显著的影响。我们使用 CRISPR 修改内源序列,建立 Alu 基因型不同的细胞系。我们的研究结果表明,Alu 基因型可以改变与癌症风险有关的基因的表达,包括 PTHLH 、 RANBP9 和 MYC 。这些数据表明,常见的多态性 Alu 元素可以改变转录水平并可能导致疾病风险。
CRISPR–Cas9 方法已被用于在植物中产生随机插入和缺失、大量缺失、短序列的靶向插入或替换以及精确的碱基变化 1 – 7 。然而,用于功能基因组学研究和作物性状改良所需的长序列和基因的靶向插入或替换的通用方法很少,并且很大程度上取决于选择标记的使用 8 – 11 。基于在哺乳动物细胞中开发的方法 12 ,我们利用化学修饰的供体 DNA 和 CRISPR–Cas9 将长达 2,049 个碱基对 (bp) 的序列(包括增强子和启动子)插入水稻基因组,效率为 25%。我们还报道了一种依赖于同源性定向修复、化学修饰的供体 DNA 和目标位点串联重复序列的基因替换方法,以 6.1% 的效率实现了长达 130 bp 的序列的替换。在哺乳动物细胞中,使用平端的、5'-磷酸化的双链寡脱氧核苷酸 (dsODN),在两条 DNA 链的 5' 和 3' 端带有两个硫代磷酸酯键,可导致寡脱氧核苷酸 12 的强有力靶向整合。硫代磷酸酯键修饰旨在稳定细胞中的寡核苷酸,而 5'-磷酸化可促进非同源末端连接 (NHEJ),这是修复双链断裂 (DSB) 的主要途径,尤其是在培养细胞中。在用于再生小植株的培养植物细胞中,例如水稻愈伤组织细胞,NHEJ 也是主要的 DSB 修复途径 10,13。因此,这种类型的修饰 dsODN 可能会提高植物细胞中靶向插入的效率。为了验证这一假设,从水稻ADH1(酒精脱氢酶1)14 的5′非翻译区(UTR)中取出一个60bp的翻译增强子(ADHE)作为供体DNA,插入水稻的主要耐盐基因座SKC1(补充表1)15。如图1a所示,体外合成的ADHE供体DNA两侧有两个带有硫代磷酸酯键和5′-磷酸化修饰的核苷酸(ADHE;见补充图1b)。为了与传统供体DNA进行比较,还合成了未修饰的单链和双链寡脱氧核苷酸(ssADHE和dsADHE),带有三核苷酸多态性以供检测(图1b和补充图1b)。设计了一个针对 5 ʹ UTR 的单向导 RNA (sgRNA) (sgRNA-1),并将其构建到 CRISPR–Cas9 载体 pCBSG032 中(图 1c 和补充图 1a)。将三个供体 DNA 寡核苷酸按等摩尔比例混合,然后通过粒子轰击法将其与 CRISPR–Cas9 质粒 DNA (sgRNA-1) 一起引入中花 11 (ZH11) 水稻愈伤组织中。
辐射风险•为了安全地执行,您的程序需要在X射线指导下插入该行。X射线是一种电离辐射。研究表明,暴露于高剂量的电离辐射的人在暴露几年或几十年后会增加患癌症的机会。但是,尽管更复杂或更困难的病例可能需要更高的辐射剂量,但与此过程相关的辐射暴露量很小。•是对您的医生和放射医生的评估,将执行该程序的好处大于暴露于辐射的风险。专业的放射科医生和放射线照相师将确保在手术过程中保持辐射暴露尽可能低。•我对在此过程中接触辐射的风险有任何疑问,您可以在同意过程中与将执行您的程序执行的放射科医生进行进一步讨论。•如果您认为自己可能怀孕,请通知临床团队。
PLSVC 是胸腔体静脉回流中最常见的先天性静脉异常。在普通人群中发病率为 0.3–0.5%,在有其他先天性心脏异常记录的个体中发病率高达 12%。3 PLSVC 是由于位于无名静脉尾部的左上主静脉未能退化 8 而引起的(见图 3)。PLSVC 有几种解剖变异。最常见的是,在 80%–90% 的病例中,PLSVC 可与右侧 SVC 共存。双侧 SVC 的大小也可以有不同程度的差异。在 65% 的双侧 SVC 病例中,左无名静脉缺失。3 在 80%–92% 的病例中,PLSVC 经冠状窦流入右心房,不会改变血流动力学状态,我们的患者就是这种情况。相反,10-20% 的 PLSVC 病例可通过冠状窦、左心房顶部或左上肺静脉引流到左心房。3 与 PLSVC 同时发现的其他异常包括房间隔缺损、室间隔缺损、二尖瓣主动脉瓣和主动脉缩窄。9,10
∗ 通讯作者 † 航空航天工程系助理教授,elena.fantino@ku.ac.ae。‡ 副研究教授,UPC 北校区,Gran Capitán s/n,rflores@cimne.upc.edu。§ 正教授,空间动力学组,ETSIAE,Pza. Cardenal Cisneros 3,j.pelaez@upm.es。¶ 博士,空间动力学组,ETSIAE,Pza. Cardenal Cisneros 3,v.raposo.pulido@upm.es。
正式培训信息的数据库,确保及时收集和传播信息给海军、国防部各部门、机构、服务、承包商和授权外国政府的各个层面。信息系统旨在支持海军培训活动、校舍、学习中心、培训支持中心等的管理和行政职能。CeTARS 包括各种功能,如人员管理、学生培训管理、课堂支持管理、课堂活动资源调度、出版物和设备管理、系统实用程序、学生测试和评估、用户反馈报告和相关行政支持。CeTARS 是培训课程描述和统计信息的官方来源,并根据海军的要求提供学生和培训信息。有关 CeTARS 的进一步描述,请参阅参考资料 (a)。
该出版物报告了使用氧化化学蒸气沉积(OCVD)方法制造的聚(3,4-乙二醇)(PEDOT)薄膜中载体迁移率的主要增强。通过采用纳米结构工程,研究团队成功地优化了π-π堆积距离,从而实现了准二维(1D)电荷传输途径。这些进步导致了载流子的迁移率和热电性能,证明了OCVD制作的PEDOT薄膜用于下一代能量和电子应用的多功能潜力。这一显着的成就是M.S.出色的研究贡献的结果。学生Brian Dautel和Ph.D.学生Kafil Chowdhury,在Meysam博士在AMED实验室的监督下。
“对于电池电动汽车(BEV),有许多培训,但其中大多数尚未符合整个行业的标准。接受这些培训的工人认为他们在进行维修时是完全安全的。但是,如果没有标准,没有人能确信他们具有在BEV工作时保持安全的所有必要技能和知识。这是一个重大的安全问题,影响了全国行业。我们在加拿大I-CAR的目标是确保每个人都具有进行安全和适当维修所需的技能和知识,这就是为什么在没有北美标准的情况下,我们的EV培训是为欧洲标准ECER100建造的。”
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