2019 冠状病毒病 (COVID-19) 大流行导致全球诊断检测用品短缺,尤其是在发展中国家。COVID-19 严重程度的危险因素包括既往合并症、高龄和男性,但其他变量也可能影响疾病结果。确实有越来越多的证据支持宿主遗传学在 COVID-19 结果的易感性中的作用。与 SARS-CoV-2 感染病程相关的遗传因素的识别依赖于 DNA 提取方法。本研究比较了使用患者鼻咽样本进行 COVID-19 宿主遗传研究的三种 DNA 提取方法(Chelex ® 100 树脂、苯酚-氯仿和 QIAamp DNA 提取试剂盒)。比较了这些方法的执行步骤数、样品处理时间、提取材料的质量和数量以及在遗传研究中的应用。我们发现 Chelex ® 100 方法最便宜(分别比商用试剂盒和苯酚-氯仿便宜 33 倍和 13 倍),DNA 产量最高(分别比商用试剂盒和苯酚-氯仿高 306 倍和 69 倍),处理步骤最少,同时为下游应用提供足够的 DNA 质量。总之,我们的结果表明 Chelex ® 100 树脂是一种廉价、安全、简单、快速且适合从 COVID-19 患者鼻咽样本中提取 DNA 以进行遗传学研究的方法。这在发展中国家尤其重要,因为成本和处理是材料加工的关键步骤。
本实验将让您在双自旋系统上执行一系列简单的量子计算,演示一和两个量子位量子逻辑门,以及实现 Deutsch-Jozsa 量子算法的电路。您将使用 NMR 技术来操纵氯仿分子中质子和碳核的状态,测量整体核磁化。您应该熟悉 Matlab 才能成功完成此实验!此外,您应该已经完成初级实验室实验 12:脉冲 NMR,并了解 NMR 的基本物理原理。您将测量描述氯仿质子和碳核自旋之间电子介导相互作用的耦合常数;受控非门的经典输入输出真值表;Deutsch-Jozsa 量子算法的数值输出;以及可选的 Grover 量子搜索算法的输出和振荡行为。
- 比四氢呋喃,氯仿或甲苯等常见的有机溶剂(例如,更高的粘度(例如三氯苯)或氯磷灰甲)所需的较高的温度,最高220°C。在高温下操作该仪器可降低粘度,从而降低柱压力,并相应地提高效率。
我们报告了金纳米粒子 (AuNP) 修饰的石墨烯-硅肖特基势垒二极管的电流-电压特性和低频噪声的结果。测量在环境空气中添加两种有机蒸气四氢呋喃 [(CH 2 ) 4 O; THF] 和氯仿 (CHCl 3 ) 中的任一种进行,在黄光照射 (592 nm) 期间也是如此,接近于测量的金纳米粒子层的粒子等离子体极化频率。当加入四氢呋喃蒸气时(在金修饰的石墨烯-硅肖特基二极管中),我们观察到正向电压 (正向电阻区域) 的直流特性发生变化,而当添加氯仿时(在未修饰的石墨烯-硅肖特基二极管中),在黄光照射下会发生微小的变化。与无照射相比,在黄光照射期间观察到两种气体的低频噪声差异明显较大。与没有 AuNP 层的石墨烯-Si 肖特基二极管相比,AuNP 抑制了噪声强度。我们得出结论,所研究的金装饰肖特基二极管产生的闪烁噪声可用于气体检测。
推荐采用市售商品化的DNA提取纯化试剂盒。如使用CTAB法提取DNA所需试剂如下: a) 乙二胺四乙酸二钠(Na 2 EDTA,C 10 H 14 N 2 O 8 Na 2 ·2H 2 O)。 b) 氢氧化钠(NaOH)。 c) EDTA 溶液:ρ(EDTA)=0.02 mol/L:称取5.8448 g EDTA 溶于适量超纯水中,NaOH 固体调节pH 至8.0,定容至1000 mL,121℃灭菌18 min,冷却后常温保存。 d) 三羟甲基氨基甲烷(Tris,C 4 H 11 NO 3 )。 e) 浓盐酸:ρ(HCl)=1.19 g/mL。 f) Tris-HCl 溶液:ρ(Tris-HCl)=0.1 mol/L:称取15.76 g Tris-HCl 溶于适量超纯水中,浓盐酸调pH 至8.0,定容至1000 mL,121℃灭菌18 min,冷却后常温保存。 g) 十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)。 h) 氯化钠(NaCl)。 i) CTAB 提取液:称取4 g CTAB 和16.38 g NaCl,分别溶于适量超纯水中,加入0.02 mol/L EDTA 溶 液(5.3 c)8 mL 和0.1 mol/L Tris-HCl 溶液(5.3 f)20 mL,定容至200 mL,121℃灭菌18 min, 冷却后常温保存。 j) Tris 饱和酚(pH=8.0)。 k) 三氯甲烷(CHC l3 )。 l) 异戊醇(C 5 H1 2O )。 m) 酚氯仿:Tris 饱和酚、氯仿和异戊醇按25:24:1 体积比配制。 n) 乙酸铵(CH 3 COONH 4 )。 o) 乙酸铵溶液,ρ(CH3COONH4)=7.5 mol/L:称取5.78 g 乙酸铵溶于10 mL 超纯水中。 p) 乙酸钠(CH 3 COONa·3H 2 O)。 q) 乙酸钠溶液,ρ(CH 3 COONa)=3 mol/L:称取102.06 g 乙酸钠溶于适量超纯水中,冰醋酸调节pH 至5.2,定容至250 mL,121 ℃灭菌18 min; r) 无水乙醇(C 2 H 6 O)。 s) 冰乙酸(C 2 H 4 O 2 )。 t) 蛋白酶K:400 U/mL。 u) 超纯水:经121 ℃,0.1 MPa 灭菌30 min,无细菌无DNA 酶。
我们报告了金纳米粒子 (AuNP) 修饰的石墨烯-硅肖特基势垒二极管的电流-电压特性和低频噪声的结果。测量在环境空气中添加两种有机蒸气四氢呋喃 [(CH 2 ) 4 O; THF] 和氯仿 (CHCl 3 ) 中的任一种进行,以及在黄光照射 (592 nm) 期间进行,接近测量的金纳米粒子层的粒子等离子体极化频率。当加入四氢呋喃蒸气时(在金修饰的石墨烯-硅肖特基二极管中),我们观察到正向电压 (正向电阻区域) 的直流特性发生变化,而当添加氯仿时(在未修饰的石墨烯-硅肖特基二极管中),在黄光照射下会发生微小的变化。与无照射相比,在黄光照射期间观察到两种气体的低频噪声差异明显较大。与没有 AuNP 层的石墨烯-Si 肖特基二极管相比,AuNP 抑制了噪声强度。我们得出结论,所研究的金装饰肖特基二极管产生的闪烁噪声可用于气体检测。
从果蝇中的基因组DNA制备该方案可以从40-100 mg的成年蝇(蝇重约1 mg)中分离出高度纯的基因组DNA。首先,在核保持完整的条件下,蝇是在缓冲液中磨碎的,然后使用SDS将DNA从断裂的组织中释放出来。接下来,进行常规的苯酚提取(去除蛋白质)和氯仿提取(去除苯酚),并用乙醇沉淀核酸。离心后(去除脂质和小细胞分子),将核酸沉淀溶解并用rnasea(降解RNA)和蛋白酶K(降解rNASEA和其他蛋白质)串行消化。其他苯酚/氯仿沉淀和乙醇沉淀产生高度纯化的基因组DNA。我们的目标是完整的基因组DNA - 避免通过过度的移液和涡旋剪切DNA。1。将50个成年果蝇放入装有微型植物的1.5 mL微管中,并在500 µl的缓冲液中彻底磨碎A。用500 µl的缓冲液B冲洗杵,将冲洗液加入匀浆中;通过反转微管轻轻混合。在37°C下孵育1小时2。切断P1000微量移动尖端的尖端,然后使用它将匀浆(500 µL)的一半转移到第二个微管中。苯酚通过在每个管,帽和混合物中添加相等的体积(500 µL)Te饱和苯酚来提取样品。离心5分钟。3。使用截止P200尖端将透明顶层(水相)绘制为两个新的微管(每个微管)。避免绘制接口材料。离心5分钟。4。5。通过在每个管,帽和混合物中添加等体积(500 µl)苯酚的苯酚来重新提取样品。使用截止P200尖端将透明顶层(水相)绘制为两个新的微管(每个微管)。避免绘制接口材料。氯仿通过在每个管,帽和混合物中添加等体积(500 µl)的氯仿提取样品。离心1分钟。使用截止尖端将透明顶层(水相)绘制为两个新的微管(每个微管)。将NaCl添加到0.1m的最终浓度。乙醇通过在每个微管中添加2卷(〜850 µl)的EtOH来沉淀您的样品;轻轻混合。观察核酸的沉淀。将微管放在-20°C过夜以鼓励沉淀。6。离心10分钟。丢弃上清液;短暂地干燥SpeedVac中的颗粒(将显示使用)。7。如下,将样品组合到单个微管中。然后,使用截止P200尖端将500 µl TE缓冲液加到一个管中
印度泰米尔纳德邦塞勒姆佩里亚尔大学生命科学学院动物学系助理教授。电子邮件:mahes1380@gmail.com 这是一篇开放获取期刊/文章,根据知识共享署名许可 (CC BY-NC-ND 3.0) 条款分发,允许在任何媒体中不受限制地使用、分发和复制,前提是正确引用原始作品。版权所有。大自然从植物中提供了大量的生物活性物质来治疗各种可怕的传染性和非传染性疾病。Gloriosa superba 属于百合科,是一种重要的多年生草本植物,也被称为“光荣百合”。使用氯仿和甲醇提取 G. superb 的花,并在 1000、500、250、125 和 62.5 ppm 浓度下评估其对人类媒介蚊子(致倦库蚊、斯氏按蚊、埃及伊蚊和白纹伊蚊)的植物化学物质和杀虫活性。G. superb 花的氯仿提取物的植物化学分析显示生物碱、黄酮类化合物、皂苷、蛋白质和类固醇的数量较少。G. superb 花的甲醇提取物显示生物碱、黄酮类化合物、鞣酸、酚、皂苷和类固醇的数量较高。G. superba 的两种提取物中均不含蒽醌。甲醇提取物的杀虫活性在 1000 ppm 浓度下分别对致倦库蚊、斯氏库蚊有 100% 的杀虫活性,对埃及伊蚊有 98% 的杀虫活性,对白纹伊蚊有 96% 的杀虫活性。大花金花的氯仿提取物对致倦库蚊、斯氏库蚊、埃及伊蚊和白纹伊蚊的杀虫活性分别为 92%、84%、80% 和 78%。结果表明,大花金花的甲醇提取物可用作生物农药,用于控制引起蚊虫疾病和各种生物应用。
索纳教授、奥斯特里科夫教授以及包括辛格先生在内的研究团队与格里菲斯大学的李秦教授合作,在《可持续材料与技术》杂志上发表了进一步的研究成果,探讨了如何利用由人类头发制成的碳点来开发一种传感器,用于实时监测水处理系统中的氯仿含量。