分离染色体的流式细胞术是细胞遗传学的一种新方法,可快速测量单个中期染色体。在这种方法中,用适当的荧光染料染色的水悬浮液中的染色体被限制在激发染料的窄激光束中高速流动。发射的荧光通过光度法测量,累积的数据形成染色体荧光的频率分布。该频率分布的峰值归因于单个染色体或具有相似荧光的染色体组;峰值平均值与染色体荧光成正比,峰值面积与染色体出现频率成正比。因此,频率分布可作为核型(1、2)。此外,流式分选可根据染色体的染色特性分离染色体(3、4),这与传统的中期染色体纯化方法不同,后者依赖于速度或等密度沉降、区域离心或选择性过滤(5)。纯化单个中期染色体很重要,原因如下。富集或纯染色体部分已进行生化分析,以提供有关 DNA 或蛋白质结构的信息(6),将遗传信息转移到整个细胞(7-9),或通过体外杂交绘制基因图谱(10)。但一般来说,传统技术无法提供足够纯度的染色体,无法进行高分辨率生物或生化研究。通过基于溴化乙锭荧光的流式分选,我们以 90% 的纯度将雄性鹿 Muntiocus muntjak (2n = 7) (4) 的每个染色体和中国仓鼠 M3-1 细胞系的 14 种染色体类型分离成 8 个染色体组 (1, 3)。在我们之前对溴化乙锭染色的人类染色体的研究中,我们仅从雄性 (2n = 46) 的 24 种染色体类型中分辨出 8 个染色体组 (2, 3)。在本研究中,使用 DNA 荧光染料 33258 Hoechst 和改进的仪器,
在造血细胞移植(HCT)之前检测到的最小残留疾病(MRD)与高危急性白血病患者的不良结局有关。然而,在这种情况下,移植后MRD评估的理想时间点以及残留疾病的临床意义尚不清楚。我们对77名急性白血病患者进行了移植前后(第30、60和100天)之前和之后进行的高敏性流式细胞仪MRD进行了前瞻性现实分析。目的是评估消除疾病的动力学,并将其与移植结果相关联。前移植MRD为42(MRD-)为阴性,35例患者(MRD+)为阳性。移植后MRD评估在第30天(n = 30,38.9%),第60天(n = 27,35.0%)和第100天(n = 60,77.9%)时可行。复发发生在MRD +组的8例中(22.9%),在MRD阴性组中发生3例(7.1%),p = 0.02。前移植MRD与总生存率降低(OS; MRD; MRD+54.0%MRD+)和无事件生存期(EFS; 85.3%MRD- vs. 51.1%MRD+)相关,P = 0.001。复发的累积发生率(CIR)为17.5%,在MRD-中为2.6%(p = 0.049)。非释放死亡率(NRM)为31.4%,在MRD-中为12.1%(p = 0.019)。在D100下MRD阴性的患者(92.4%,95%CI:0.81-0.971)的一年OS高于阳性D100 MRD(53.3%,95%CI:0.177–0.796),p <0.0001。疾病状态和D100 MRD与OS,EFS和CIR有关。 还观察到白血病类型之间的NRM差异(所有:MRD-vs. 50%MRD+和AML 0%MRD- vs. 21.7%MRD+,P = 0.0158)。疾病状态和D100 MRD与OS,EFS和CIR有关。还观察到白血病类型之间的NRM差异(所有:MRD-vs. 50%MRD+和AML 0%MRD- vs. 21.7%MRD+,P = 0.0158)。总而言之,通过高度敏感的流式细胞术评估了移植前的MRD准确鉴定出不良预后的患者。HCT后持续的MRD可以通过高特异性和临床灵敏度预测复发。 这些结果强调了将移植周围的MRD动力学纳入急性白血病的常规治疗,尤其是在低/中收入国家的常规治疗中的重要性。HCT后持续的MRD可以通过高特异性和临床灵敏度预测复发。这些结果强调了将移植周围的MRD动力学纳入急性白血病的常规治疗,尤其是在低/中收入国家的常规治疗中的重要性。
ISIS Criouet,Jean-Christophe Viennet,Etienne Balan,Fabien Baron,Arnaud Buch等。iCarus,2023,406,pp.115743。10.1016/j.icarus.2023.115743。hal-04300810
肾细胞癌(RCC)是一种恶性肿瘤,占成年癌症的3%,20% - 30%的患者在开始时被诊断为转移性RCC,而转移性RCC全身治疗的中位总生存期(OS)范围为16个月至16个月至50个月。免疫疗法是一种依赖于免疫细胞和肿瘤细胞特异性结合的新型疗法,可能是晚期肾细胞癌的潜在疗法。虽然已经在各种实体瘤中研究了嵌合抗原受体NK细胞(CAR-NK)疗法,但几个团队也报道了对其在RCC的应用的特定研究。在这篇综述中,我们介绍了NK细胞的细胞毒性机制,总结了RCC和NK细胞之间的联系,并对肾细胞癌Carcinaloma Car-NK治疗发布了新的见解。迄今为止,重点关注肾细胞癌和NK细胞的大多数研究仅声称NK细胞细胞毒性和NK细胞免疫抑制甚至免疫逃生的机制,但所涉及的分子也可能是肾细胞癌Carcinaroma carcinoma carcinoma car-NK疗法的有趣靶标。
•流程术的基础:技术的原理,设计一个用于细胞仪分析的面板,数据分析工具(门,门控层次结构,统计,统计,点图,直方图),设置仪器,定量细胞仪和质量控制。
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Geneva Campia a, Manuel Beltrán-Visiedo A, Ruth Soler-Agest A, B, Ai Sato A, Norma Bloy A, Lewei Zhao C, D, Peng Liu C, D, Oliver Kepp C, D, Guido Kroemer C, D, E, Lorenzo Galluzzi A, F, G, *, and Claudia Galassi A, * Oncology, Weill Cornell Medical College, New York, NY, United States B University of Zaragoza/Arago´n Health Research Institute, Biochemistry and Molecular and Cell Biology, Zaragoza, Spain C Equipe Labellis Ee Par La Ligue Contre Le Cancer, University and De Paris, Sorbonne Universit and, Centro de Recheche des Cordeliers,法国大学,法国,法国,D代谢组学和细胞生物学平台,Gustave Roussy,University and Paris Saclay,Villejuif,France和P ^ ole de Biologie,H ^ Opital europe Europe Europe Europe Euroge Een Georges een Georges een Georges Pompidou,Pompidou Caryl and Israel Englander Precision Medicinate,纽约,纽约州,美国 * Corpsontding作者:电子邮件地址:Deadoc80 @ gmail.com; clg4005 @ med.cornell.edu