27. Shultz, J., MD、Stehlik, J., MD、FACC 和美国心脏病学会 (2022) 供体来源的无细胞 DNA 监测在心脏移植中的出现:排斥监测的未来。网址:https://www.acc.org/latest-in-cardiology/articles/2022/05/05/12/45/emergence-of-donor-derived-cell-free-dna-monitoring-for-heart-transplant。
ben-ami ,1 Qiao-li Wang,Ana Babic,2 Ehsan Irajizas,4个桌子David,6 Zick的6福音,6 Ayala Hubert,6 Daniel Neiman,Natalia,Natalia,Natalia Boos,2 Jajoo Society,2 Jajoo Society,2 Jajoo Society,8 Linda Lee,Stanganger,Stanganger,,,Stanger,,,Stanger,,,Stanger,,,Stanger,,,Stanger,,Stanger,,Stanger,,,Stanger,,Stanger,,Stanger,,,地,
唾液是一种新兴的疾病生物标志物来源,特别是对于头颈部癌症而言。尽管唾液中的游离 DNA (cfDNA) 分析有望成为一种用于癌症检测的液体活检方法,但目前尚无用于研究 DNA 的唾液收集和分离标准化方法。在本文中,我们评估了各种唾液收集容器和 DNA 纯化技术,比较了 DNA 数量、片段大小、来源和稳定性。然后,我们使用优化的技术,测试了从患者唾液样本中检测人乳头瘤病毒 (HPV) DNA(头颈部癌症亚群中的真正癌症生物标志物)的能力。对于唾液收集,我们发现 Ora-gene OG-600 容器可产生最高浓度的总唾液 DNA 以及对应于单核小体游离 DNA 的 < 300 bp 的短片段。此外,与其他唾液收集容器相比,这些短片段在收集后 48 小时仍然保持稳定。对于从唾液中纯化 DNA,QIAamp 循环核酸试剂盒可产生最高浓度的单核小体大小的 DNA 片段。唾液样本的冻融不会影响 DNA 产量或片段大小分布。发现从 OG-600 容器中分离的唾液 DNA 由单链和双链 DNA 组成,包括线粒体和微生物来源。虽然核 DNA 水平随时间保持一致,但线粒体和微生物 DNA 水平变化更大,并在收集后 48 小时增加。最后,我们发现 HPV DNA 在 OG-600 容器中稳定,在 HPV 阳性头颈癌患者的唾液中可以可靠地检测到,并且在单核小体大小的无细胞 DNA 片段中含量丰富。我们的研究已经确定了从唾液中分离 DNA 的最佳技术,这将有助于未来基于液体活检的癌症检测应用。
胺是有机合成和药物化学中的关键功能团。游离胺和氮杂环在许多具有生物活性的小分子中普遍存在。1 此外,由于其亲核特性,游离胺通常用作有机合成中的化学投入物,包括许多成熟的反应,例如 SN 2 加成、还原胺化、酰胺偶联和 Buchwald-Hartwig 胺化。2–4 二胺是一个特别受重视的子类,因为它们在药物、配体和有机催化剂方面具有独特的应用。5 因此,从简单的起始材料制备结构复杂且取代不同的二胺的新策略在学术界和工业界都很有价值。在此背景下,我们寻求开发一种方法,将各种简单的烯基胺(一级或二级)(一类易于获取的起始材料)直接转化为不同功能化的二胺,其中预先存在的胺通过催化胺化 1,2-双功能化指导第二个胺的安装。近年来,定向三组分烯烃双功能化已成为一种有效的策略,可从简单的化学输入中选择性合成高度取代、多功能和立体化学定义的产品(方案 1A)。在这种情况下,成功的基于胺的导向基团包括基于双齿导向助剂的基团。6-8 和单齿保护基(例如酰胺和磺酰胺)(方案 1B)。 9 在这些情况下,将吸电子基团连接到胺上至关重要,因为它会减弱布朗斯台德和路易斯碱度,从而降低其干扰催化的能力。虽然这种方法本身很有价值,但当需要相应的游离胺产物时,需要两个额外的步骤进行保护和脱保护。此外,除了极少数例外,9h 这些导向基团不能直接进行 N 官能化,需要进一步操作才能安装所需的 N -烷基或 N -芳基取代基。因此,
5.1。一般描述和预期用途HI97771是一种自动诊断便携式光度计,从Hanna®年代作为分析仪器制造商的经验中受益。它具有高级光学系统,该系统使用发光二极管(LED)和狭窄的带干扰过滤器,该过滤器允许准确且可重复的读数。光学系统与外部灰尘,污垢和水密封。仪表使用一个独特的正锁定系统来确保每次将比色杯放置在相同位置的架中。使用CAL Check™功能,用户可以随时验证乐器的性能并应用用户校准(如有必要)。HannaInstruments®CalCheck Cuvettes由NIST可追溯标准制成。内置教程模式可以通过测量过程逐步指导用户。它包括样品制备,所需试剂和数量的所有步骤。HI97771米的测量为0.00至5.00 mg/L(ppm),总氯从0到500 mg/L(ppm)。游离氯的方法是美国EPA方法330.5,DPD色彩法的适应。总氯的方法是对水和废水检查的标准方法的适应,第20版,4500-CL。
器官移植的目的是挽救生命和提高生活质量。移植界迫切的战略目标是增加接受移植的患者数量、改善所有人的移植机会以及改善长期移植结果。改善长期移植结果受到的关注少于前两个目标,但对于实现这些战略要务至关重要,因为更好的长期同种异体移植存活率将导致更少的候选人回到候补名单。尽管在移植努力的其他阶段取得了巨大成功,但长期同种异体移植存活率的显着改善却难以实现。其中一个主要原因可能是移植界继续使用数十年前的传统模式来监测同种异体移植功能。例如,在肾移植功能的情况下,临床医生仍然主要依靠监测血清肌酐、尿蛋白和供体特异性抗体。分子诊断技术的出现有可能改变这种模式,并可能显着改善长期同种异体移植功能。我们评论这个主题的目的是让临床医生清楚了解这些测试的临床原理和适当使用,并提倡我们服务的患者以临床适当的方式使用这些测试。
工作场所的尘埃是损害工人健康的职业疾病危害的主要原因之一。灰尘中的游离二氧化硅是造成菌丝症的主要原因,因此分析灰尘中的自由二氧化硅的含量是职业健康监测的重要组成部分。游离二氧化硅是指未与金属或金属氧化物结合的自由状态。在工作场所中,粉状含量大于10%的粉末称为二氧化硅灰尘。游离二氧化硅可以分为三种类型;结晶,隐态和无定形二氧化硅根据其晶体结构。在中国,工作场所尘埃中自由二氧化硅的定量确定通常遵循GBZ/T192.4- 2007年标准方法“确定工作场所第4部分空气中灰尘中的自由二氧化硅含量”。 “该测量标准包括确定游离二氧化硅的几种方法,包括焦磷酸法,红外光谱和X射线衍射法。焦磷酸方法可以确定自由二氧化硅的总量,但是它是一种手动方法,因此遵守分析师的化学分析技能,既耗时又繁琐。根据GBZ/T192.4-2007标准,红外光谱仪可用于建立α-SIO2(晶体)标准曲线,然后替换由样品测量的吸光度值以获得其定量值。将红外方法与焦磷酸方法进行比较,该操作要简单得多,无需溶剂,分析是快速准确的,并且是更流行的方法。
开发了一种优化的针对肝细胞癌 (HCC) 的甲基化下一代测序检测方法,可直接从尿液中发现与 HCC 相关的甲基化标记物,以进行 HCC 筛查。从 31 名非 HCC 和 30 名 HCC 患者的发现队列中分离的尿液无细胞 DNA (ucfDNA) 用于生物标志物发现,鉴定出 29 个具有差异甲基化区域 (DMR) 的基因。开发了甲基化特异性 qPCR (MSqPCR) 检测方法以验证对应于 8 个基因 (GRASP、CCND2、HOXA9、BMP4、VIM、EMX1、SFRP1 和 ECE) 的选定 DMR。使用存档的 ucfDNA,发现 HCC 患者和非 HCC 患者的 GRASP、HOXA9、BMP4 和 ECE1 的甲基化存在显著差异 (p < 0.05)。使用逻辑回归模型,在 87 名非 HCC 患者和 78 名 HCC 患者的独立训练队列中,将这四种标记物与之前报道的 GSTP1 和 RASSF1A 标记物作为 6 种标记物组合进行评估。6 种标记物组合与 AFP 的 AUROC 为 0.908(95% CI,0.8656–0.9252),显著高于单独使用 AFP(AUROC 0.841(95% CI,0.778–0.904),p = 0.0026)。应用后向选择方法,发现 4 种标记物组合与 6 种标记物组合的性能相似,AFP 的敏感性为 80%,而单独使用 AFP 的敏感性为 29.5%,特异性为 85%。这项研究支持甲基化跨肾 ucfDNA 在 HCC 筛查中的潜在应用。