预印本(未经同行评审认证)是作者/资助者。保留所有权利。未经许可不得重复使用。此版本的版权所有者于 2024 年 11 月 12 日发布。;https://doi.org/10.1101/2024.11.11.622957 doi:bioRxiv 预印本
图4球体行为作为球间距离的函数。(a)球体间距离的球体融合的示意图(I. D.)。(b)球体区域的散点图是囊中距离的函数,用于封装在缓慢松弛(SR)或快速放松(FR)水凝胶中,在无PDGF(PDGF)或PDGF取消( + PDGF)( + PDGF)培养基中培养长达5天。水平和垂直虚线分别表示平均球体面积和平均接触球体的平均球间距离分别在第0天。黄色和紫色点表明分别与至少一个相邻球体直接接触(融合)的球体。所有球体由小鼠骨髓MSC组成。数据点代表单个球体,基于n = 178 - 939个球体,每组分析了三到四个生物学独立的实验。
图1。cts stemscale培养基提供的性能与Ruo Stemscale培养基相似。如表1所示,与在Ruo Stemscale培养基中生长的球体相比,在CTS茎层培养基中生长的球体将需要额外的生长一天才能达到相似的细胞收率。(a)通过日的球体形态。在Ruo Stemscale培养基中生长的球体通常在5天内平均直径为400 µm,而在CTS茎尺度培养基中生长的球体将需要额外的一天才能达到类似的直径。(b)通过日的累积细胞扩展。通过在第5天收集在Ruo Stemscale培养基中生长的球体,并在第6天在CTS Stemscale培养基中生长的球体,可以实现相似的总细胞产量(报道为折叠膨胀)。(c)球体直径比较。在RUO茎谱培养基中生长的球体的球体直径和CTS Stemscale培养基中生长的球体在各自的收获天数相似,两者都接近直径400 µm的上部建议。
摘要。背景/目的:在筛选可选择性抑制含有突变型 (mt) KRAS 的癌症球体生长的化合物时,发现了 NPD10621,并研究了相关衍生物。材料和方法:用 12 种 NPD10621 衍生物处理表达野生型 (wt) KRAS (HKe3-wtKRAS) 和 mtKRAS (HKe3-mtKRAS) 的 HCT116 衍生 HKe3 球体的球体区域,并在三维漂浮 (3DF) 培养中进行测量。在 3DF 培养中用 NPD1018 (pyra-metho-carnil:PMC) 治疗几种癌症。在裸鼠测定中,确定了 50% 细胞生长抑制 (GI 50 ) 值。结果:在这 12 种衍生物中,PMC 是 HKe3-mtKRAS 球体生长最有效的抑制剂,毒性最小。此外,在所有测试的癌细胞系中均观察到 PMC 介导的生长抑制,与组织环境、驱动基因突变和耐药性无关,这表明 PMC 靶标对于癌症生长至关重要,且与环境无关。裸鼠试验中 PMC 的 GI 50 值为 7.7 mg/kg
摘要。背景/目标:在天然产物的化合物中,选择性抑制了具有突变体(MT)Kras,NP910的癌症生长的化合物,并探索了其衍生物。材料和方法:表达野生型(WT)KRAS(HKE3-WTKRAS)和MTKRAS(HKE3-MTKRA)的HKE3球体面积在三维浮动(3DF)培养物中测量,并用18 NP910衍生物处理。通过长期3DF(LT3DF)培养和裸小鼠测定法测定50%细胞生长抑制(GI50)。结果:我们选择了NP882(命名为STAR3)作为HKE3-MTKRAS球体生长的最有效抑制剂,NP910衍生物中毒性最少。Gi50s和裸鼠测定法分别为6μm和30.75 mg/kg。然而,在50%的细胞系中观察到与KRAS突变无关的细胞系抑制,这表明Star3的靶标与KRAS突变和KRAS相关信号没有直接相关。结论:STAR3是一种低毒性化合物,可抑制某些肿瘤细胞的生长。
目标:本研究对三维(3D)培养方法在富集和分离乳腺癌干细胞(BCSC)中的功效进行了比较分析。该研究比较了在母质和悬浮液中生长的多细胞球体与常用的二维(2D)单层培养方法。方法:实验涉及9天3D多细胞球体培养物,然后使用两种乳腺癌细胞系进行24小时单层培养,即MCF7和MDA-MB-231。为了评估BCSC,该研究评估了包括CD44/CD24,Vimentin和Aldh1在内的各种表面标记的表达,以及多能干细胞基因(如SOX2,OCT4,KLF4和Nanog)。另外,测量了阿霉素的耐药性和从每种方法中得出的单个细胞的能力,以在无血清悬浮培养中形成球体。结果:研究结果表明,在悬浮液中生长的3D培养多细胞球体显示出干细胞标记物和阿霉素耐药性的显着增加。此外,这些球体在无血清培养基中形成具有超过50 µm的单细胞球体具有更高的能力。结论:总的来说,与2D单层和3D单基质甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基酯和3D Matrigel Meths相比,这种3D培养方法在悬浮液中具有增强的BCSC,具有增强的自我更新和增殖能力。因此,这种方法可以使用任何可用的BCSC隔离方法从细胞系中隔离BCSC的关键初步步骤。关键词:乳腺癌,抗癌性,癌症干细胞,阿霉素,3D培养
MMC对RH30和RD球体的影响。 a如果在Rh30 -arms-(左)(左)和RD -erms-(右)球体上染色(FN; Green)和胶原I(大肠杆菌;红色),则在不存在MMC处理的情况下冷冻切片(DAPI,cell核,蓝色),比例尺=50μm。 B胶原蛋白I的平均荧光强度(MFI)和球体冷冻切片中的纤连蛋白表达。 c离开。 在所有测试条件下播种在ULA板中的球体的相对形图像,以及井底RH30粘附细胞的细节。 比例尺=右200μm。 如果在RH30和RD球体中用MMC处理的纤连蛋白和胶原蛋白I的染色显示RH30球体下方的粘附细胞的存在。 比例尺=50μm。 d无需MMC处理的RH30和RD球体的形状参数(面积,周长,圆度和坚固),n = 12,Student t -test*p <0.05,** p <0.01,**** p <0.0001。 (为了解释该图传奇中对颜色的引用,读者被转介给本文的网络版本。)MMC对RH30和RD球体的影响。a如果在Rh30 -arms-(左)(左)和RD -erms-(右)球体上染色(FN; Green)和胶原I(大肠杆菌;红色),则在不存在MMC处理的情况下冷冻切片(DAPI,cell核,蓝色),比例尺=50μm。 B胶原蛋白I的平均荧光强度(MFI)和球体冷冻切片中的纤连蛋白表达。c离开。在所有测试条件下播种在ULA板中的球体的相对形图像,以及井底RH30粘附细胞的细节。比例尺=右200μm。如果在RH30和RD球体中用MMC处理的纤连蛋白和胶原蛋白I的染色显示RH30球体下方的粘附细胞的存在。比例尺=50μm。 d无需MMC处理的RH30和RD球体的形状参数(面积,周长,圆度和坚固),n = 12,Student t -test*p <0.05,** p <0.01,**** p <0.0001。(为了解释该图传奇中对颜色的引用,读者被转介给本文的网络版本。)
图2:普鲁士白色材料,其立方体和菱形晶体结构。在这些结构中,高旋转过渡金属离子由红色球表示,低旋转过渡金属离子由绿色球体表示。配位polyhedra略微透明,根据其中央原子的颜色进行颜色。氮原子由蓝色球体,灰色球体的碳原子和黄色球体代表。
上图中的点代表两个相同的球体,X 和 Y,它们固定在原地,中心位于页面平面内。两个球体都带电,Y 球体上的电荷为正。这些线是电势等值线,
2. 学生使用上图所示的装置进行实验,研究两个带电物体之间的力。该装置包含两个相同的导电球。上部球体连接到绝缘绳上,绝缘绳可用于将球体向下移动。下部球体位于绝缘杆上,绝缘杆位于电子天平上。在下部球体和绝缘杆就位之前,电子天平已归零。