大多数肿瘤类型要么对激酶抑制剂没有反应,要么产生耐药性,这通常是由于癌细胞更广泛的信号传导回路中存在补偿性促生存途径。在这里,我们发现,通过将激酶网络重塑为赋予药物敏感性的拓扑结构,可以克服培养的原代急性髓系白血病 (AML) 细胞对激酶抑制剂的内在耐药性。我们确定了几种染色质修饰酶的拮抗剂,这些拮抗剂使 AML 细胞系对激酶抑制剂敏感。其中,我们证实赖氨酸特异性脱甲基酶 (LSD1;也称为 KDM1A) 的抑制剂重新连接了 AML 细胞中的激酶信号,从而增加了激酶 MEK 的活性,并广泛抑制了其他激酶和反馈回路的活性。因此,AML 细胞系和大约一半的原代人类 AML 样本对 MEK 抑制剂曲美替尼具有敏感性。具有 KRAS 突变和 MEK 通路活性高的原代人类细胞对 LSD1 抑制剂和曲美替尼顺序治疗反应最好,而具有 NRAS 突变和 mTOR 活性高的原代人类细胞反应较差。总体而言,我们的研究揭示了 MEK 通路是 AML 中对 LSD1 抑制剂产生耐药性的机制,并展示了一种调节激酶网络回路以潜在克服对激酶抑制剂治疗耐药性的方法。
摘要 .目的 .食管癌是我国常见的消化道肿瘤,发病率较高。组蛋白去甲基化酶4在染色体结构修饰和基因表达调控中起重要作用,成为肿瘤治疗的新靶点。GASC1是KDM4家族的重要成员,与肿瘤的恶性程度密切相关。方法 .构建KDM4C基因(又称GASC1)的短发夹状干扰RNA质粒和空白对照质粒,分别转染人食管鳞状细胞癌细胞株(KYSE-150和KYSE-30),根据细胞活力筛选最佳治疗浓度。细胞克隆实验分析各组细胞的增殖特性。细胞迁移和划痕愈合实验分析肿瘤的恶性转移和侵袭能力。免疫荧光分析检测蛋白GASC1的表达特性。采用Western blot方法分析各组细胞株中蛋白Notch1、HIF1A、Flt-1、c-myc、c-fos的表达情况。结果.本实验通过加入咖啡酸及干扰RNA质粒调控各组GASC1蛋白的表达水平,之后通过一系列表征方法确定食管癌细胞的转移和增殖能力与GASC1蛋白表达水平呈正相关。通过测定各癌相关蛋白的表达情况,进一步证明GASC1蛋白的调控作用。结论.GASC1基因在食管癌的进展中起着至关重要的作用,通过抑制GASC1基因的表达,与癌症发展密切相关的NOTCH、MAPK等通路也会受到抑制,最终可能控制恶性发展。
对照载体转染的 LNCaP-ctl 细胞(图 1C)。为了测试 KDM4B 在 PCa 进展中的临床相关性,我们对接受雄激素剥夺疗法的局部或转移性激素敏感性 PCa(AJCC III 期和 IV 期)患者的前列腺活检组织样本进行了 KDM4B 表达染色。在肿瘤样本中观察到显著的 KDM4B 染色,而在正常组织中发现的染色很少(图 1D)。KDM4B 表达较高的患者的存活率明显较短(图 1E)。我们在体内测试了 KDM4B 过表达的影响。在注射 LNCaP-4B 细胞的小鼠中观察到 30% 的肿瘤形成率,而注射对照 LNCaP-ctl 细胞的小鼠没有肿瘤(图 1F)。LNCaP-4B 细胞未能在阉割动物中形成肿瘤(未显示数据)。
简单总结:横纹肌肉瘤 (RMS) 是儿童年龄段中常见的软组织肉瘤。目前标准的多模式治疗可能导致所有亚型的严重终生副作用,并且高风险 RMS 患者的预后不佳。迫切需要为这些儿童找到新的、更有针对性的治疗方法。研究表明,多种组蛋白去甲基化酶的高表达支持 RMS 细胞的增殖,在这里我们将注意力集中在 KDM4B 上,它已成为最近药物发现工作的焦点。我们表明 KDM4B 在 RMS 细胞中调节细胞周期基因,并证明 KDM4B 的长期沉默在功能上由另一个 KDM4 家族成员 KDM4A 补偿。KDM4A 和 KDM4B 的预先减少会杀死 RMS 细胞,表明针对两个组蛋白去甲基化酶家族成员的治疗方法是可取的,可以避免功能冗余。