受技术、法规和宗派挑战的拖累,在受精时编辑人类胚胎基因组的前景仍然是一个长期目标。考虑到这一现实,2015 年国际人类基因编辑峰会报告了编辑小鼠精子原干细胞,然后进行睾丸移植,从而修复了导致白内障的突变。2 然而,事实证明,该领域的进一步实验工作有限。同样有限的努力也体现在编辑卵子上,尽管随着干细胞衍生配子的前景成为现实,编辑配子可能会蓬勃发展。这一结果必然会将焦点从编辑胚胎的基因组转移到其前身配子。这可能会增加对基因组编辑过程的控制,包括消除胚胎嵌合体的问题。在本文中,我们讨论了编辑精子和卵子
mtt在生物学中被广泛用作细胞活力的探针,因为它能够在强烈的氧化还原酶活性部位产生不溶性甲贡祖的沉积物。这种反应通常以反映线粒体氧化还原活性;但是,在某些细胞类型中也记录了线粒体MTT减少。鉴于这种背景,我们着手确定哺乳动物精子中甲唑沉积的主要地点。在小鼠中,大多数MTT还原发生在广泛的线粒体回旋中,精子头上有一个次要的formazan沉积部位。相比之下,人类精子通常显示出小小的混乱的中件,表现出适度的MTT减少活动,并在精子头的各个位置从脖子到前杂质体的精子头部的各个位置伴随着主要的金属软骨外甲氮杂沉积物。马精子呈现了这两种模式的组合,在线粒体中的主要formazan沉积伴随着大约20%的细胞中的线粒体外甲米唑沉积物。人类精子的功能与一种甲米甲酸甲珠外颗粒的存在正相关。随后的研究表明,存在二苯基碘,锌,2-脱氧葡萄糖,共酶Q,一种模拟和NADPH氧化酶抑制剂的二苯基碘,锌,2-脱氧葡萄糖,锌,锌,2-脱氧葡萄糖,抑制这种线粒体的活性。我们得出的结论是,精子的MTT将MTT降低为特定于物种,并传达了有关线粒体与线粒体外氧化还原活性的相对重要性的重要信息,从而定义了这些细胞的功能质量。繁殖(2020)160 431–443
模块实验室软件链接允许将 AndroVision® 链接到外部软件和外部设备,如秤、光度计、扫描台。IDA、IDEE 和 PRISM 可以与 AndroVision® 集成,形成完整的实验室设置。质量控制模块分析解冻后和保存中的样本,并允许链接到原生精液分析。它提供了在生产过程中分析样本的可能性:可以多次分析一个精液的样本,并将其与原生精液值进行比较。此功能还允许检查已处理精液的质量。要分析保存样本或解冻样本,需要从显示已处理精液的列表中选择捐赠者,这些精液迄今为止尚未进行控制分析。生产链中的多重分析允许在生产的几个步骤中跟踪精液质量。使用质量控制模块可以轻松分析从外部带入或属于较旧库存且需要进行质量检查的现成精液剂量。提供了用于将捐赠者添加到数据库的用户界面。
设备制造和操作。纸基精子 DNA 分析设备在 PowerPoint 中设计,并使用固体蜡打印机(ColorQube 8570N,加拿大施乐)打印在硝化纤维素纸上(平均孔径为 0.45 μm,加拿大 Bio-Rad Laboratories Ltd.)。然后将图案化的硝化纤维素纸在 125 ºC 下加热 5 分钟,让蜡扩散穿过纸张厚度并从疏水边界扩散。为了将 ICP 功能添加到纸张中,在样品通道的开始处用移液器吸取 0.5 L 阳离子选择性纳米多孔 Nafion(20% 重量,低级脂肪醇和水,Sigma-Aldrich,美国),然后在去离子水中对膜进行水合 30 分钟。设备在室温下风干并在使用后存放在培养皿中。要使用该设备,需要将 3 μL 样品移液到样品通道中,然后用去离子水使设备饱和。通过在样品通道上施加 150 V/cm 的电压 15 分钟来诱导 ICP。在此步骤之后,使用直立荧光显微镜(Axiophot,德国卡尔蔡司公司)捕获绿色(dsDNA)和红色(ssDNA)荧光图像。捕获的图像在 ImageJ 中处理,并使用 Matlab 中的书面脚本进行数据量化。