由学院编辑 - 编辑:Szczepan BILIŃSKI(发育生物学、胚胎学、细胞骨架、细胞间连接 - 雅盖隆大学动物研究所,30-060 克拉科夫,ul. Ingardena 6)、Jerzy KAWIAK(免疫学、细胞计数、血液学、癌症生物学 - CMKP 临床医院细胞学系,01-813 华沙,ul. Marymoncka 99),Wincenty KILARSKI(肌肉、肌肉收缩、细胞运动 - 雅盖隆大学动物学研究所,30-060 克拉科夫,ul. Ingardena 6), Jacek KUŹNICKI(分子生物学、生物化学 -波兰科学院实验生物学研究所,以 M. Nencki 命名,02-097 华沙,ul. Pasteur 3)。 Jan MICHEJDA(信息通路、细胞膜、细胞能量学 - 亚当密茨凯维奇大学生物能量学系,61-701 波兹南,ul. Fredry 10),Maria OLSZEWSKA(植物细胞、植物和动物细胞中的遗传信息 - 植物细胞学和细胞化学,生理学和细胞学研究所,90-237 Łódź,ul. Banacha 12/16),Maciej ZABEL(普通组织学,内分泌学,组织化学(免疫细胞化学,杂交细胞化学),细胞超微结构 - 弗罗茨瓦夫医科大学组织学系,50 -368 弗罗茨瓦夫,ul. Chałubińskiego 6a)
摘要 盐酸曲马多是一种具有中枢作用的合成阿片类药物,用于治疗中度至中度重度疼痛,据报道具有神经毒性。因此,本研究探讨了曲马多对海马结构中体重、尼氏体和星形胶质细胞变化的影响。对照组大鼠口服2ml/kg蒸馏水,第2组大鼠口服50mg/kg曲马多,连续21天。实验前后称量大鼠体重。对大鼠实施安乐死,取脑并称重。将取下的脑用10%甲醛盐水固定,常规处理,用甲酚固紫(CFV)染色以显示尼氏物质,用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色以显示星形胶质细胞的表达。CFV染色显示曲马多治疗组这些有病理改变的区域染色强度降低。GFAP显示大量反应性星形胶质细胞突起;星形胶质细胞突起重叠和交错;星形胶质细胞增殖;星形胶质细胞细胞体肥大和星形胶质细胞突起增厚。本研究结果揭示了重量、尼氏体和海马形成组织病理学的变化。关键词:海马形成、组织化学、组织病理学、免疫组织化学、神经变性引言阿片类药物滥用已成为一场全球健康危机,影响着世界各地不同背景和社区的个人。在阿片类药物中,曲马多已获得
岗位描述 新泽西州农业部动物健康司的动物健康诊断实验室 (AHDL) 是该州唯一一家致力于通过样本检测来诊断牲畜、家养宠物、野生动物和动物园动物疾病的实验室。有关该实验室的更多信息,请访问网站:www.jerseyvetlab.nj.gov。在农业部动物健康司监督官员的指导下,该职位的职责包括但不限于:计划、监督和执行各种临床化学临床实验室程序;计划、执行和监督血液学(进行血小板计数、全血细胞计数和分化细胞计数);确定血红蛋白的数量和确定红细胞指数;根据既定程序制备、消毒和储存培养基;制备标准试剂、溶液和染色剂;利用理论和实践工作知识,确定测试执行中不可预见的并发症的原因并妥善处理情况;执行更复杂的测试和检查,包括但不限于酶和激素研究、免疫血液学程序、更复杂的病原微生物的鉴定、组织化学研究、染色和病毒学测定;维护必要的实验室记录、报告和文件(电子和/或手动记录);按照认证标准(ISO 17025)维护与实验室完成的所有工作有关的详细、准确的图表和记录;通过将结果输入记录系统来准备必要的报告并维护实验室程序手册(根据需要进行添加、删除和/或修改);根据需要完成其他相关工作。
Redaguje Kolegium - 编辑:Szczepan BILIŃSKI (biologia rozwoju, embriologia, cytoszkielet, połączenia międzykomórkowe - Instytut Zoologii UJ, 30-060 Kraków, ul. Ingardena 6), Jerzy KAWIAK (免疫学,细胞计数、血液学、生物学 - Zakład Cytologii Klinicznej CMKP,01-813 Warszawa,ul. Marymoncka 99), Wincenty KILARSKI (mięśnie, skurcz mięśniowy, ruchy komórek -Instytut Zoologii UJ, 30-060 克拉科夫,ul。Ingardena 6),雅采克KUŹNICKI(分子生物学,生物化学。-Instytut Biologii Doświadczalnej PAN im. M. Nenckiego,02-097 Warszawa,ul. Pasteura 3)。 Jan MICHEJDA (szlaki informacyjne, błony komórek, energetyka komorki - Zakład Bioenergetyki UAM, 61-701 Poznań, ul. Fredry 10), Maria OLSZEWSKA (komórki roślinne, informacjagenetyczna w komórkach roślinnych i zwierzęcych - Zakład Cytologii i Cytochemii Roślin Instytutu Fizjologii i Cytologii UŁ,90-237 Łódź,ul.Banacha 12/16),Maciej ZABEL(组织学、内分泌学、组织化学(免疫细胞化学、 hybrydocytochemia), ultrastruktura komórek - Zakład Histologii AM,50-368 弗罗茨瓦夫,ul。查乌宾斯基戈 6a)
没有可选标记的转基因植物的再生可以促进性状堆叠产品的开发和商业化。已经开发了各种策略来消除可选标记以生产无标记的转基因植物。最广泛使用的无标记方法可能是基于农杆菌的2 T-DNA策略,其中利率基因(GOI)和可选标记基因从独立的T-DNA中传递(Darbani等,2007)。可选标记基因在随后的几代中脱离了GOI。然而,由于T-DNA共转化的不确定和GOI和可选标记基因T-DNA之间的高率,该2 T-DNA系统的效率远小于传统的1 T-DNA系统。相比之下,没有选择转换使用带有GOI的单个T-DNA,因此消除了删除可选标记插入物的需要,并有可能提供可行的替代标记系统。在这项研究中,我们报告了通过无需使用选择性剂的种子分生植物的农杆菌接种种植的转基因棉植物的成功再生。通过GUS组织化学测定,鉴定出推定的转基因植物的再生。通过GUS表达通过花粉粒,未成熟胚胎和T1植物的分离来确定转基因向后代的种系传播。通过南部分析进一步确认了结果。在此无选择系统中,无标记转换频率与当前的分生组织转换系统相似(0.2% - 0.7%)。讨论了进一步改进该系统的策略及其在改善棉花转化管道和开发无基因基因组编辑技术方面的意义。
摘要:嵌合编辑是基因编辑中经常报道的技术。为了评估嵌合编辑的普遍情况,我们构建了携带标记β-葡萄糖醛酸酶基因(gusA)的转基因烟草品系,并将CRISPR-Cas9编辑载体引入转基因烟草品系中以敲除gusA,然后研究T0代及后续代中gusA的编辑效率。编辑载体携带一个由花椰菜花叶病毒35S启动子驱动的Cas9基因,以及两个引导RNA,gRNA1和gRNA2,分别由拟南芥U6(AtU6)和U3(AtU3)启动子驱动。两个gRNA被设计用于敲除gusA编码区的一个42个核苷酸的片段。利用农杆菌介导的转化和潮霉素选择将编辑载体转化到含有gusA的烟草叶中。使用抗潮霉素的独立 T 0 转基因株系通过组织化学 GUS 测定、聚合酶链式反应 (PCR) 和 PCR 扩增子的下一代测序来评估 gusA 编辑效率。94 个 T 0 转基因株系的靶序列图谱显示,这些株系是由未经编辑的细胞再生而来的,随后进行了编辑,并在再生期间或之后在这些株系中产生了嵌合编辑细胞。其中两个株系的 42 bp 核苷酸对的靶片段被去除。详细分析表明,在 4.3% 和 77.7% 的 T 0 转基因株系中分别发现了 AtU6-gRNA1 位点和 AtU3-gRNA2 位点的靶突变。为了解决 T 0 株系中编辑效率极低的问题,我们从嵌合株系进行了第二轮芽诱导,以提高获得所有或大多数细胞都经过编辑的株系的成功率。 T 0 转基因系中的突变谱为理解利用组成型表达的 CRISPR-Cas9 和 gRNA 进行植物细胞中的基因编辑提供了宝贵的信息。
摘要背景:当前的体外模型系统不能完全反映前列腺癌(PCA)的生物学和临床差异。类器官是3D体外细胞培养物,可以更好地概括疾病异质性并保留父母肿瘤的特征。PCA组织的短期离体培养物也可能促进个性化医学中的药物测试。材料和方法:对于有机培养物,我们已经处理了50例接受前列腺术或尿道切除术的50例患者的癌症和正常组织。此外,我们利用了离体组织培养技术,并使用吉西他滨和CHK1抑制剂MU380在10个患者样品中进行了短期化疗测定。结果:总共我们能够从58%的肿瘤(29/50)和69%的正常组织(20/29)中培养类器官。Imo-muno组织化学染色揭示了泛环蛋白的细胞阳性,证实了上皮细胞的存在。然而,在器官中未概括肿瘤中AMACR和ERG蛋白的过表达。另一个局限性是只有3周的类器官的促进,直到第一次通道。接下来,使用体内组织培养的十名患者进行了短期药物测试。前列腺切除术的样品主要显示出低的增殖率,如KI-67染色所评估。这种AP的另一个缺点是特定组织片段中的组织形态不一致。在所有测试样品中,只有一个病例显示药物测试的较高增殖率,肿瘤组织均存在。在我们的工作中,我们还提供了近期研究的概述以及对文化条件的详细比较。结论:我们已经建立了PCA患者样品中的器官和组织片段的培养物。然而,肿瘤标记物的表达未在器官中收回。在大多数情况下,组织碎片和低增殖之间的形态不一致妨碍了对药物测试的解释。仍然,这些方法使用转移性cast割前列腺癌的组织可能有希望。
背景:硬化菌核(SS)是一种广泛的宿主范围,可影响400多种植物物种。ss cys camelina sativa(CS)的茎腐病疾病是一种适用于低输入作物和工业油属性的Allohexaploid crucifer物种,适用于生物燃料和润滑剂。组织化学和分子研究已将C. sativa中的SS抗性与细胞壁木质化联系起来(Eynck等,2012),并报道了CSS抗性线CN114263中的Cinnamoyl-COA还原酶4(CSCCR4)基因的组成型表达。现代繁殖工作(例如基因编辑)需要改善商业线条,并限制农作物损失的风险,这对生产者来说是重要的。目的:为了研究单极生物合成的重要性以及CSCCR4在Camelina对SS耐药性中的作用,我们使用CRISPR/CAS9介导的基因编辑产生了CN114263 Camelina系的CSCCR4敲除突变体。材料和方法:三十T1植物是通过花卉浸入转化产生的,然后是草甘膦喷雾,该植物在筛选程序的第一步中使用,并通过PCR方法确认。使用数字液滴PCR(DDPCR)确定T1和T2祖细胞中T1和T2祖细胞中的T-DNA拷贝数变化T-DNA CNV,并且通过下降测定技术对T1和T2代的CSCCR4同源物的三个副本中的三个副本中的突变发生。为确保T2植物中的突变体是真实的,对其中三个的cas9/ grna特异性裂解点侧面进行了topo ta测序。在T2代生成中,筛选了CSCCR4基因中的潜在突变。结果:在T1代中,确认了25种植物,这些植物在相应的Camelina基因组中具有1至9个TNA拷贝。在CSCCR4的三个副本中证明了各种类型的突变,包括插入和缺失。实际上,CRISPR系统可以分别在编号T2-Plant 10,T2-Plant 15和T2-Plant 19的事件中删除一个,两或三个副本。T3-plant 19在上一代中所有版本的CSCCR4中表现出突变具有易感性的螺旋杆菌侵袭,并保留为实际CSCCR4突变体材料,以进一步研究骆驼 - 螺旋菌相互作用。CSCCR4中的突变是通过容易出错的非同源端连接(NHEJ)核DNA修复途径发生的。ss挑战早期开花的T3一代。与WildType对照母体CN114263相比,在CSCCR4位置217处的突变的T3植物在CSCCR4位置217处的过早停止密码子受到了损害。结论:使用DDPCR很容易识别T1和T2祖细胞中CSCCR4同源物中的T-DNA CNV和突变的发生。我们说明,CRISPR/CAS9介导的突变是一种体面的技术,可以用来加快突变线的发展,可以帮助您弄清CSCCR4基因在防御:sativa C. c. c. c.c。sativa中的活性,作为前瞻性石油种植作物的生物柴油生产。
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