KINNEX 16S rRNA试剂盒将扩增的16S扩增子作为输入,并输出一个可进行测序的库,与标准的FL 16S库相比,该库将导致多达12倍的吞吐量增加。Kinnex 16S套件基于多路复用阵列测序(MAS-SEQ)方法(Al'khafaji等,2024),用于FL 16S扩增子(图3A)。结果明显更高,并且对高精度,成本效率的FL 16S测序的测序需求显着降低,每个PACBIO SMRT细胞的多重能力高达1,536个扩增子样品。我们在各种样本中测试了Kinnex 16S rRNA套件,包括模拟社区标准,凳子,唾液,植物,土壤,废水,废水和拭子(皮肤,口腔,阴道和兽医伤口)。然后,我们使用用户友好的生物信息学管道HIFI-16-Workflow分析了数据,该管道为FL 16S HIFI读取提供了快速Q-to-Report分析解决方案(图3B)。我们还检查了读取深度对样本类型中检测到的物种数量的影响(图4)。
所有样本中都包含分析,并且提供了RAW HIFI读取数据,以供客户更喜欢进行自己的分析。PACBIO HIFI全长16S数据使用QIIME2和DADA2进行质量过滤,并“将”“变形”到高质量扩增子单个变体(ASV)。ASV分类采用两种方法:针对基因组分类学数据库(GTDB R207)的共识一致性分类(使用VSEARZERCH)高一致性,以及使用三个数据库的基于贝叶斯的基于机器学习的分类(DADA2),使用三个数据库:GTDB R207,SILVA R207,SILVA RRNA DATABASE(v138)由核糖体数据库项目(RDP)补充,以更好地分类低充足的ASV。
的不同DNA中,并作为模板进行了绝对定量的16S rRNA植物群分析。从获得的标准物质导线中制备了校准曲线,并计算了百日咳芽孢杆菌的16S rRNA基因的拷贝数,并对不同来源的DNA平均计算了百日咳的拷贝数。这表明该产品可用于比较不同样品之间的细菌体积和控制每个分析测试的准确性。
背景:肠道菌群是一个复杂的生态系统,在人类健康和疾病中起着至关重要的作用。但是,肠道菌群与烧伤引起的肠道损伤之间的关系尚不清楚。肠粘膜层对于维持肠道稳态和提供针对细菌侵袭的生理障碍至关重要。本研究旨在研究肠道菌群对烧伤后肠道粘液的合成和降解的影响,并探索烧伤损伤的潜在治疗靶标。方法:采用了修改的组织病理学分级系统来研究烧伤损伤对小鼠结肠组织和肠道粘液屏障的影响。随后,使用16S核糖体RNA测序分析燃烧后第1至10天的肠道菌群的变化。基于此,对在第1、5和10天收集的样品进行了宏基因组测序,以研究与粘液相关的微生物群的变化并探索潜在的潜在机制。结果:我们的发现表明粘液屏障被破坏,小鼠烧伤后第3天发生细菌易位。此外,从烧伤后的第1到第3天,小鼠中的肠道菌群显着破坏,但随着疾病的进展,逐渐恢复到正常。特别是,在燃烧后的第1天,与粘蛋白降解相关的共生和致病细菌的丰度显着增加,但第5天的丰度恢复了正常。相反,与粘蛋白合成相关的益生菌丰度在相反的方向上发生了变化。进一步的分析表明,在烧伤损伤后,能够降解粘液的细菌可能利用糖苷水解酶,叶叶菌和内膜分解粘液层,而合成粘液的细菌可能通过促进短链脂肪酸的产生来帮助恢复粘液层。结论:烧伤损伤导致肠结肠粘液屏障和肠道菌群的营养障碍。一些共生和致病性细菌可能通过糖苷水解酶,叶酸,内膜等参与粘蛋白降解。益生菌可以提供短链脂肪酸
背景:口腔健康取决于复杂的口腔微生物环境。此可变的口服微生物组包括牙齿,牙龈和舌头上的微生物种群。遗传学,食物,口腔卫生和健康状况都影响了这些微生物生态系统。这种生态学是敏感的,中断可能导致口腔失调。口腔粘膜炎和种植体周围感染经常是由于这种失衡而引起的。 这种广泛的分析检查了口腔病原体,例如链球菌,乳酸杆菌和卟啉念珠菌。 16S rRNA基因测序用于研究这些细菌如何引起口腔疾病。 这种强大的分子方法照明了口服微生物动力学。 这项研究通过检查这些致病性微生物与口腔健康之间的复杂相互作用来照亮疾病的发展。 本文还强调需要使用尖端的科学方法来治疗口腔疾病。 它描述了这些工具如何改变了口腔病理研究。 这项研究的发现对于改善治疗和预防方法至关重要。 评论强调口腔卫生并鼓励其他研究。 牙科治疗可能会变得更加个性化和有针对性,从而改善了口腔健康管理。口腔粘膜炎和种植体周围感染经常是由于这种失衡而引起的。这种广泛的分析检查了口腔病原体,例如链球菌,乳酸杆菌和卟啉念珠菌。16S rRNA基因测序用于研究这些细菌如何引起口腔疾病。这种强大的分子方法照明了口服微生物动力学。这项研究通过检查这些致病性微生物与口腔健康之间的复杂相互作用来照亮疾病的发展。本文还强调需要使用尖端的科学方法来治疗口腔疾病。它描述了这些工具如何改变了口腔病理研究。这项研究的发现对于改善治疗和预防方法至关重要。评论强调口腔卫生并鼓励其他研究。牙科治疗可能会变得更加个性化和有针对性,从而改善了口腔健康管理。
这是明尼苏达州卫生部 - 公共卫生实验室(MDH-PHL)和明尼苏达州实验室系统(MLS)的更新。此消息将发送给为明尼苏达州居民提供服务的MLS实验室联系人。您无需回复此消息。**请将其转发给您机构和卫生系统中的所有适当人员**此消息的内容旨在用于公共卫生和卫生保健人员和响应伙伴,他们需要了解信息以履行其职责。仅供官方使用。不要如本消息中所述的预期收件人组超越预期的接收者组。Minnesota Laboratory System Minnesota Department of Health, Public Health Laboratory 601 Robert St. N, St. Paul, MN 55164-0899 651-201-5200 health.mnlabsystem@state.mn.us www.health.state.mn.us/diseases/idlab/mls/index.html To obtain this information in a different format, call: 651-201-5200
文库,并比较了NextSeq 2000和Miseq系统之间的测序性能。在图书馆准备过程中,使用IDT进行Illumina DNA/RNA UD索引设置A到D,使用户可以生成384 16S库。在NextSeq 1000/2000 P2 300M试剂套件(600个周期)上运行384 16S库,具有标准SBS化学或NextSeq 1000/2000 P2 Xleap-SBS™试剂盒(600个循环),每样品可用于分类级别的每样品,以产生100,000至200,000的读取。用户可以在NextSeq 1000/2000 P2 300M试剂盒(600个循环)和400m读取的NextSeq 1000/2000 P2 XLEAP-SBS Reagent套件(600 Cycles)上生成300m总读取。NextSeq 1000/2000 P1 XLEAP-SBS试剂盒(600个循环)和NextSeq 1000/2000 P2 Xleap-SBS试剂盒(600个周期)的测序运行时间为34小时。相比,Miseq Reagent Kit V3(600个周期)的Miseq系统上的测序运行时间〜56小时。
目标。这项研究的目的是使用16S rRNA基因的下一代测序(NGS)来表征并可能区分健康和肥胖马的下肠道(粪便)细菌。方法。这项研究涉及7匹马(4匹马和3匹母马),年龄8-17岁:乌克兰鞍品种1-4匹马(马1运动马匹rebus,10 Y.O.,马匹2马匹2种马santes,15 Y.O.,15 Y.O.,15 Y.O.),重量吃水的5匹马(种马Tsyhan,8 Y.O.)和非透明马6和7(Mare Sne-Zhynka,10 Y.O.,Mare Rumba 12 Y.O.)马匹2、4、5和7是肥胖,马1、3和6是健康的。所有马匹都保留在州生物技术大学的马术中心,乌克兰教育与科学部(乌克兰哈尔基夫)。根据制造商的说明,使用Purelink微生物组DNAPuriÞ阳离子试剂盒(Invitrogen,USA)提取直肠粪便样品的总DNA。准备了细菌16S rRNA的库,我们使用了16S rRNA条形码试剂盒1-24(美国牛津纳米波尔)。为了净化所获得的库,磁性颗粒核元素清理和尺寸选择(Macherey-Nagel,德国根据推荐的快速测序放大器的建议协议 - 16S条形码(SQK-16SS024)(测序套件的手册)。这些条件基于Fujiyoshi等人(2020)中所述的16S rRNA基因扩增阳离子的标准方案,并确保细菌DNA跨各种群分类群的稳健扩增。结果。结论。细菌门的代表(Syn.肌动杆菌),纤维杆菌,小叶虫 - 螺旋杆菌(Syn.螺旋体),杆菌,富公司(Syn.芽孢杆菌),planctomycetota,verrucomicrobiota(Syn.verrucomicrobia),念珠菌Melainabacteria,kiritimatiellota和proteeobacteria(Syn.假单胞菌)。占主导地位的门是坚硬的,其份额是所有检测到的门的50%至82%。与杆菌的数量相比,健康马匹和肥胖马之间的数量差异很大。在健康马1,3和6中,这是企业和肥胖的马2,4,5和7的2.5、3.4和2.9倍,它是8.6、8.2、7.6和5.7倍。与杆菌相比,坚硬的人数在健康马匹和肥胖马之间发生了显着变化。在健康的马1、3和6中,牢固的数量分别为2.5、3.4和2.9倍,而在肥胖的马2、4、5和7中,牢固的数量分别为8.6、8.2、7.6、7.6和5.7倍。在肥胖的马匹2、4、5和7中观察到蛋白杆菌的数量增加,范围为25%至37%,而在健康运动马1、3和6中,蛋白质的水平在1.07至3.43%之间,这对于健康动物的微生物组典型。在研究的马匹粪便中检测到低水平的放线菌(分杆菌):健康运动马3分别为0.09%,健康运动马3分别为0.09%,健康马匹6分别为0.15%。相比之下,肥胖的马2、4、5和7的水平分别从0.21%到0.48%。重要的是要注意,放线菌的门还包括BiÞ多杆菌属,在所研究的任何动物中均未检测到。在乌克兰第一次,我们对七个不同年龄,性别和品种的七匹马的下肠道(粪便材料)的细菌菌群进行了测序。在肥胖马的粪便中,细菌的细菌占主导地位(天细菌粉,粉状,裂缝),尤其是来自振荡性螺丝素和lachnospileceae的家族,并伴随着细菌的降低细菌(fcylumberimteroidota)(FC-fcbe)(FC-fc-
样品比比利时(p = 1.3 x 10 -5,p = 2.0 x 10 -4),智利(p = 4.0 x 10 -4,p = 1.5 x 10 -2)和166
