目的:研究二甲基亚硫氧化二甲基磺代(DMSO)作为牛胚胎发生中的冷冻保护剂和溶剂的作用,并特别关注其对早期和晚期发育阶段中基因表达的影响。方法:使用牛胚胎评估DMSO对凋亡和发育过程至关重要的基因表达的影响。基因表达分析以评估促凋亡和抗凋亡标志物的变化,以及对于生长和生存所必需的基因。结果:二甲基亚氧化二甲基以阶段特异性方式影响基因表达。在早期发育过程中,DMSO诱导促凋亡基因,BAX和下调抗凋亡基因BCl2的过表达,表明凋亡活性增加。此外,对生长和生存至关重要的GDF9和IGF1的表达也发生了变化,这表明干扰了关键发育途径。相反,晚期胚胎表现出较高的Bcl2和HspB1水平,这是抗凋亡活性的标志物,表明DMSO在胚胎发生的晚期阶段的调节作用更为复杂。结论:虽然DMSO作为冷冻保护剂有效,但其对基因表达的影响引起了人们对潜在发展后果的关注。这些发现突出了需要进一步研究,以更好地了解DMSO在辅助生殖技术(ART)的背景下的特定影响。关键词:基因表达,牛胚胎,胚胎发育,DMSO,凋亡
1农村健康研究所,查尔斯·斯特特大学,澳大利亚新南威尔士州奥兰治2号2号传染病系,兽医医学院和热带和新兴全球疾病中心,乔治亚州乔治亚州乔治亚州乔治亚大学3号卫生局3号市政府萨马尔市帕拉帕格市菲律宾研究所4号帕拉帕格市卫生局4号。旧多米尼翁大学,美国诺福克,美国弗吉尼亚州诺福克市6传染病部,QIMR Berghofer医学研究所,布里斯班,澳大利亚澳大利亚7研究学院,澳大利亚国立大学,澳大利亚国立大学,澳大利亚8号公共卫生学院8
母羊、山羊和水牛奶中含有牛奶,这是由于 γ-酪蛋白在纤溶酶分解后发生等电聚焦所致。 该方法基于与认证参考标准的蛋白质模式进行比较,可以定性估计测试样品中的牛奶。
质粒载体整合了编码牛 MBL 蛋白 (21-249aa) 的基因,生成重组质粒,然后将其引入杆状病毒细胞。阳性杆状病毒细胞的选择基于其抵抗特定抗生素的能力。随后,在有利于牛 MBL 基因表达的条件下培养含有重组质粒的杆状病毒细胞。该蛋白质带有 N 端 10xHis 标签。表达后,采用亲和纯化从细胞裂解物中分离和纯化重组牛 MBL 蛋白。变性 SDS-PAGE 用于分离所得重组蛋白,从而可以估计其纯度超过 85%。
大肠杆菌:牛中的常见IMI,导致临床和亚临床乳腺炎。与细胞壁释放脂多糖(LPS)有关的临床体征。经典的大肠杆菌乳腺炎在产犊后的1-2周内与严重的临床体征有关。最近有人提出,乳腺致病性大肠杆菌(MPEC)的某些菌株具有毒力因子,使它们能够持续存在并引起乳房的慢性感染。这些毒力因子包括降低宿主免疫反应,生物膜产生以及侵入乳腺上皮细胞的能力。与其他肠杆菌科的其他成员共同,通常在干旱期间收到感染,一直处于休眠状态,直到饲养在产犊后的头100天内引起临床疾病。(Bradley等,2015)
3 中和疫苗病毒的母源抗体也可能抑制疫苗效力,阻止抗体反应的诱导,但不会阻止 T 细胞反应的诱导。4、5 在同时接种 MLV 疫苗和疫苗后观察到了第三种类型的疫苗干扰。然而,这种疫苗相互作用各不相同,从对抗体反应的轻微影响(对疾病保护没有显著影响)到对免疫反应和疾病保护有显著影响。6、7 因此,在同时接种 2 种或 2 种以上疫苗时必须考虑疫苗干扰。虽然已经针对肠外接种解决了这一问题,但关于同时接种在相同或相邻粘膜部位复制的 2 种 MLV 疫苗时疫苗干扰的信息很少。8 鼻内 (IN) 疫苗接种已被用于新生犊牛,作为一种有效的策略,可以规避母源抗体对疫苗的干扰,并针对上呼吸道 (URT) 快速发育的粘膜免疫系统。 9、10此外,给新生犊牛接种IN疫苗可诱导长期免疫记忆,在加强疫苗接种后可快速诱导保护性免疫。11当只有少量IN疫苗可用于犊牛时,无需调查在接种多种IN疫苗时可能出现的疫苗干扰。然而,用于犊牛的新型IN疫苗不断被开发出来,这就引发了一个问题:如果同时接种多种IN疫苗,是否会发生疫苗干扰。本研究调查了在给2周龄以下的犊牛同时接种2种MLV疫苗后是否会发生疫苗干扰。疫苗干扰的一种可能机制是,2种MLV疫苗在相同或相邻的粘膜部位复制,一种病毒的复制会干扰第二种病毒的复制。 8 目前的 MLV 疫苗同时含有 BHV-1 和牛副流感病毒 3 (PI-3),可诱导新生犊牛上皮内 (URT) 局部产生干扰素 (IFN)。12 BHV-1 感染引起的 IFN 反应与整个 URT 中抗病毒基因表达增加有关,在 48 至 72 小时内,当犊牛受到毒性 BHV-1 攻击时,这种先天免疫反应可以减少病毒复制。13、14 因此,含有 BHV-1 和 PI-3 成分的 MLV 疫苗如果同时注射给药,可能会抑制第二种疫苗病毒的复制,而这种病毒也会在 URT 中复制。牛冠状病毒 (BC) 既与牛的肠道感染有关,也与呼吸道感染有关,市场上有口服或注射给药的减毒活 BC 疫苗,可用于预防新生犊牛腹泻。15 有新证据表明,BC 可能在其他呼吸道病毒感染的背景下发挥呼吸道病原体的作用,这为在新生犊牛中同时接种 BC 疫苗和针对病毒性呼吸道病原体的多价 MLV 疫苗提供了理论依据。16–18 干扰素可抑制 BC 的复制,并且该病毒已发展出抑制受感染细胞内 IFN 产生和信号传导的机制。19 如果
病毒呼吸道疾病是严重临床症状和牛育种经济损失的主要原因。这项研究旨在评估包括牛病毒腹泻病毒/粘膜病毒病毒/粘膜病毒(BVDV/MDV),包括牛病毒腹泻病毒/感染性牛促进性促进性促进性促进性促进性促牛/感染性浮力性脉孔炎病毒(IBR/Bovine synirial synirial niveratory niveratory niveration nive and bovaine notiagine niv> div> Parainfluenza病毒3型(PI3)。从242个未接种的牛群中收集了总共1,741个血液样本。这些动物包括1314名女性和427名男性,年龄在6个月至5岁之间。种群包括纯品种(荷斯坦或蒙特贝利亚德品种)和杂交(本地 - 霍尔斯坦或当地的蒙特比亚特),位于摩洛哥六个地区的89个乡村公社,包括卡萨布兰卡·塞塔特(Casablanca-Settat),拉巴特·萨尔(Rabat-Salé-kénitra) fès-meknès和东方。使用I-Elisa技术分析样品。结果指示的血清阳性率分别为56.1、21.5、86.4和85.4%,分别为BVD/MD,IBR/IPV,BRSV和Parainfluenza-3。共同感染,其中95%的牛被四种病毒中的至少一种感染。血清阳性率随着年龄,性别,品种,繁殖系统和实践而差异很大。这些发现证实了牛呼吸道病毒疾病的地方性地位,并强调了它们对摩洛哥牲畜损失的直接和间接影响。
体细胞核转移或细胞质显微注射已用于产生基因组编辑的农场动物。但是,这些方法具有降低其效率的几个缺点。这项研究旨在开发电穿孔条件,使CRISPR/CAS9系统的传递到牛为有效的基因敲除。我们优化了电穿孔条件,以传递CAS9:SGRNA核糖核蛋白到牛合子,而不会损害胚胎发育。较高的电穿孔脉冲电压导致膜渗透性增加。但是,高于15 v/mm的电压降低了胚胎发育潜力。牛胚胎的Zona卵石不是有效的RNP电穿孔的障碍。使用针对最大膜通透性进行优化的参数,同时我们在靶向牛OCT4时达到了高基因编辑的速率,这导致100%评估的胚胎和预期在莫拉拉阶段对胚胎发育的预期停滞的100%蛋白质。总而言之,CAS9:SGRNA核糖核蛋白可以通过电穿孔到Zona-Intact牛合子的能力递送,从而导致有效的基因敲除。
简单摘要:在这项研究中,我们专注于从母牛的脂肪组织中获得间充质干细胞(MSC)并研究其特征和功能。我们从健康的母牛中收集了脂肪组织样品,并使用了特定方法来分离MSC。我们测试了细胞形成菌落,生长和分裂,在细胞表面表达干细胞标记,分化为骨和脂肪细胞的能力,并产生一种称为吲哚胺2,3-二氧酶(IDO)的物质,有助于调节免疫系统。结果表明,MSC从母牛的脂肪组织中成功分离出来,这些脂肪组织可以长期在培养中生长和扩展。MSC还分泌了大量的IDO,表明它们有可能调节免疫系统和控制炎症。这项研究对牛业具有重要意义,因为它表明自体(来自同一个人)源自脂肪组织的MSC可以用作对牛的各种疾病的补充治疗。与常规治疗相比,这些MSC可以通过解决与常见牛疾病相关的炎症和组织疤痕相比提供额外的好处。本研究中使用的方法可以由兽医疗法实验室采用,以准备MSC,以管理来自同一个人或其他捐助者的牛的疾病。
牛鼻炎 B 病毒 (BRBV)(属:口蹄疫病毒,科:小核糖核酸病毒科)是牛呼吸道疾病综合征的重要病原体。尽管全球都有关于 BRBV 的报道,但日本菌株的基因组数据尚未登记。在此,我们旨在分析日本 BRBV 的遗传特征。在 66 头牛的鼻拭子中,有症状和无症状的牛分别在 7/10 和 4/56 中检测到 BRBV。宏基因组测序和桑格测序确定了两种日本 BRBV 菌株 IBA/2211/2 和 LAV/238002,它们与已知的 BRBV 菌株具有显著的遗传相似性,并表现出独特的突变和重组事件,表明受区域环境和生物因素影响的动态进化。值得注意的是,LAV/238002 的领导基因位于不同的进化谱系中,与其他 BRBV 菌株有显著差异。基于前导蛋白氨基酸序列的系统发育分析表明,两株日本毒株与其他BRBV毒株处于明显不同的分支,表明存在显著的遗传多样性。该研究结果有助于我们深入了解日本BRBV毒株的遗传组成,丰富其遗传多样性和进化机制的认识。