Open Access本文在创意共享属性下获得许可 - 非商业 - 非洲毒素4.0国际许可证,该许可允许以任何中等或格式的任何非商业用途,共享,分发和复制,只要您与原始作者提供适当的信誉,并为您提供了符合创造性共识许可的链接,并提供了持有货物的启动材料。您没有根据本许可证的许可来共享本文或部分内容的适用材料。本文中的图像或其他第三方材料包含在文章的创意共享许可中,除非在信用额度中另有说明。如果本文的创意共享许可中未包含材料,并且您的预期用途不受法定法规的允许或超过允许的用途,则您需要直接从版权所有者那里获得许可。要查看此许可证的副本,请访问h t p://c r e a t i v e c o m m o ns。or g/l i c e n s e s/b y-n c-n c-n c-n d/4。0/。
完全培养基配置 DMEM培养基;15%胎牛血清;1% GlutaMAX-1谷氨酰胺;MEM NEAA非必需氨基酸;Sodium Pyruvate丙酮
Castro,J。,&Color,M。(1987)。伸展的效果用于镜子答案:1。避免灵敏度的变化。回顾了行为的墨西哥,13(1-2),135-143。Coffees,M。和Colwell,D。D.(1995)。傻瓜在女性小鼠中不情愿的答案。行为动物,50(5),1161-1 https://doi.org/10.1016/0003-3尾悬浮测试:新方法尖叫着抗逆向趋势。Psychosharmagolog(Berl),85(3),367–370。Suvrathan,A.,Tomar,A。和Chattarji,S。(2010年)。 编年史的影响,这是生命的根源。 压力,13(6),533-540。 Villafuerte,G.,Miguel-Puga,A.,Rodriguez,EM,Machado,S.,Manjar,E。,&Arias-Carrión,O。 (2015)。 动物模型中的睡眠抑郁和氧化街:弃权系统。 氧化医学和凯尔特医学,2015年,1-15。 Walsh,R。N.和Cummins,R。A. (1976)。 开放式测试:关键审查。 Bulletin心理学,83(3),482–504。 Weiss,JM和Glazer,H。I. (1975)。 急性应激的影响我们随后行为甲维剂escape。 医学心理,37,499-521。 伸展的效果用于镜子答案:1。 (2015)。Suvrathan,A.,Tomar,A。和Chattarji,S。(2010年)。编年史的影响,这是生命的根源。压力,13(6),533-540。 Villafuerte,G.,Miguel-Puga,A.,Rodriguez,EM,Machado,S.,Manjar,E。,&Arias-Carrión,O。(2015)。动物模型中的睡眠抑郁和氧化街:弃权系统。氧化医学和凯尔特医学,2015年,1-15。 Walsh,R。N.和Cummins,R。A.(1976)。开放式测试:关键审查。Bulletin心理学,83(3),482–504。Weiss,JM和Glazer,H。I.(1975)。急性应激的影响我们随后行为甲维剂escape。医学心理,37,499-521。伸展的效果用于镜子答案:1。(2015)。Camboos是Evitación秒的资源。conducta,诱导动物行为,50(5),1161-1(10.1016/0003-3472(95)80032-8STeru,L。Chermat,R.尾悬架测试:心理药理学(Berl),85(3),367–370.Suvrathan,A.,Tomar,A。,&Chattarji,S。(2010)。。压力,13(6),533-5 ht ht ht://do.org.org,2010.410.4镜像模型:https://do.org/10.115/2015/2 (1976)。 心理公告,83(3),482–5 (1975)。 心身,37,499-5https://do.org/10.115/2015/2(1976)。心理公告,83(3),482–5(1975)。心身,37,499-5
大理石爆炸测试是一种经过药理验证的范式,用于研究实验室啮齿动物中的焦虑样行为。我们的实验室已将此测定作为行为筛查的一部分,以检查药物引起的负面情感状态。从历史上看,我们先前的大多数暴饮暴食研究都专门且可靠地检测到了基础和酒精戒断引起的负面影响的青少年差异。然而,在实验设计中包括女性受试者时,在我们先前的工作中,与年龄相关的大理石行为差异要么是不存在的,要么是相反的。据报道,由于雌性的化学感应提示是男性的抗焦虑性,因此本研究检查了相反的成年成员的气味如何影响成人以及青少年小鼠的大理石养成行为。对照研究研究了在存在新型中性(香草)和厌恶(茶树)气味的情况下小鼠的反应性。成年男性在存在女性床上用品的情况下表现出焦虑样行为的迹象,而两性的成年女性和青少年小鼠在存在男性和女性床上用品的情况下增加了大理石居民行为。在存在厌恶气味的情况下,所有小鼠都表现出更多的埋葬,而只有青少年才能响应新的中性气味而增加大理石居民。这些数据表明性别相互作用在性别和非挥发性气味的影响中,从性别不佳的成人种子中的挥发性和非挥发性气味在与实验设计的大理石爆炸性测试中,对实验设计和程序的相关性测试在包括性别作为生物学变量的大理石爆炸性测试中。
2型糖尿病被认为是全世界十大威胁生命的疾病之一。为经济增长,肥胖和代谢综合征成为2型糖尿病的最常见危险因素。在这方面,高脂饮食喂养的C57BL/6J小鼠模型被广泛用于2型糖尿病发病机理和新型疗法发育。然而,在该小鼠模型中,用于对2型糖尿病进行分类的严重性疾病尚未确定,这导致了实验终点决策的困难。在这项研究中,我们以45%的高脂饮食喂食C57BL/6J雄性小鼠,该饮食在生理上接近人类的高脂作用,并评估了2型糖尿病的进展。在食用高脂饮食4周后,小鼠出现了代谢综合征,包括肥胖症,快速血浆胆固醇水平的显着增加,C肽升高和空腹血糖水平。通过将空腹血糖测试和2小时的口腔葡萄糖耐受性测试结合起来,我们的结果表明了从代谢综合征进行明确的渐进阶段,然后在C57BL/6J小鼠中2型糖尿病开始前,给定了45%的高脂饮食。此外,在代谢测量中,可以将积累体重增加> 16.23 g 12周,可以用作预测C57BL/6J小鼠中2型糖尿病发育的潜在参数。因此,这些结果可能会在选择适当的饮食饮食饮食C57BL/6J小鼠模型中选择适当的疾病阶段的期限来支持未来的研究,以研究2型糖尿病的早期预防和治疗。
营养物质通过血脑验室(BBB)的各种转运蛋白(BBB)积极吸收。老年大脑缺乏特定的营养,包括doco-sahexaenoic酸(DHA)的水平降低与记忆和认知功能障碍有关。要补偿脑DHA的减少,必须通过运输载体将口服的DHA从Cir-Culting Acculting Acculting Flows运输到大脑,包括主要的辅助超家族域含有领域的蛋白2A(MFSD2A)和脂肪酸结合蛋白5(FABP5),这些蛋白5(Fabp5)具有运输和非遗传性DHA。尽管众所周知,BBB的完整性在衰老过程中发生了变化,但衰老对跨BBB的DHA转运的影响尚未完全阐明。我们使用原位跨心脑灌注技术使用了2-,8-,12个和24个月大的雄性C57BL/6小鼠,以评估[14 C] DHA的脑摄取,作为非层化形式。使用大鼠脑内皮细胞(RBEC)的原发性培养物来评估siRNA介导的MFSD2A敲低对[14 C] DHA的细胞摄取的影响。我们观察到,与2个月大的小鼠相比,脑摄取[14 C] DHA的脑摄取显着降低了[14 C] DHA的脑摄取显着降低,并且MFSD2A蛋白表达降低,与2个月大的小鼠相比,MFSD2A蛋白表达降低。然而,FABP5蛋白表达随着年龄的增长而上调。[14 C] DHA的脑摄取被过量未标记的DHA抑制。将MFSD2A siRNA转染到RBEC中,将MFSD2A蛋白表达水平降低了30%,并将[14 C] DHA的细胞摄取降低20%。这些结果表明MFSD2A参与了BBB的非固定DHA运输。因此,随着衰老而发生的DHA跨BBB的下降可能是由于年龄相关的MFSD2A而不是FabP5引起的。
超排卵和体外受精 (IVF) 等生殖技术已广泛用于产生转基因动物。目前小鼠超排卵的黄金标准是使用马绒毛膜促性腺激素 (eCG) 和人绒毛膜促性腺激素 (hCG) 的一致治疗。最近报道了一种使用抑制素抗血清 (IAS) 代替 eCG 的替代方法。在这里,我们评估了 C57BL/6J 和 B6D2F1 小鼠中的不同超排卵策略。首先,我们发现使用 5 周大的 C57BL/6J 和 4 周大的 B6D2F1 捐赠者可以获得更好的超排卵结果。然后,我们比较了两种小鼠品系中不同剂量的 eCG - hCG、IAS - hCG 和 eCG - IAS - hCG。使用 IAS - hCG 和 eCG - IAS - hCG 方法获得的卵母细胞数量显著增加。然而,自然交配时受精率较低(36.3 – 38.8%)。我们随后证实,IVF 可以显著提高受精率,最高可达 89.1%。最后,我们进行了 CRISPR-Cas9 介导的基因组编辑,以 Scn11a 和 Kcnh1 基因座为目标,并成功使用 eCG – hCG 和 IAS – hCG 诱导的受精卵获得了突变幼崽,这些幼崽通过自然交配或 IVF 受精。我们的结果表明,IAS 是一种很有前途的超排卵试剂,使用 IAS 诱导的受精卵不太可能影响基因组编辑的效率。
高密度脂蛋白 (HDL) 的抗炎和抗氧化特性的发现引发了一个问题:HDL 是否可用于治疗疾病中的炎症。胰岛素抵抗主要依赖于肝脏炎症,研究表明,组成性活性肝核因子 κB (NF- κ B)(驱动炎症反应的中枢介质)会导致小鼠模型中的胰岛素抵抗状态 [ 1 ]。我们之前证明,单独(无脂质)或作为含有 PLPC 的重组 HDL(rHDL)的一部分施用载脂蛋白 A-I (apoA-I) 可预防肝脏炎症并改善高脂喂养的 C57Bl/6 小鼠的胰岛素抵抗 [ 2 ]。虽然结果令人鼓舞,但 apoA-I 颗粒的产生很大且耗时。载脂蛋白 A-I (apoA-I) 模拟肽已被开发和设计,其功能类似于全长 apoA-I,但效力更强,药代动力学特征也比全长 apoA-I 更好 [ 3 , 4 ]。这些模拟肽比 rHDL 有许多优势,包括成本相对较低、生产简单,并且能够修改其结构以允许口服给药。ApoA-I 模拟肽的特点是其苯丙氨酸残基附着,苯丙氨酸残基的增加与疏水性的增加及其与磷脂结合的能力相关 [ 4 ]。根据序列中疏水性苯丙氨酸残基的数量,研究最深入的是 4F 和 5F apoA-I 模拟肽。它们具有与 apoA-I 相同的 A 类两亲性螺旋结构 [ 5 ]。D-4F 和 L-5F 的区别在于两亲性螺旋疏水面上存在的苯丙氨酸数量,并且 D-4F 由 D-氨基酸合成,而 L-5F 由 L-氨基酸合成。对于口服给药,与 L-氨基酸相比,D-氨基酸被发现更能抵抗酶促降解。然而,吸收后,D-氨基酸不会降解,这可能导致毒性和其他副作用 [ 6 ]。L-氨基酸在循环中的毒性较小,但它们不能抵抗口服的酶促降解。两者都曾在生物学研究中使用过,据报道具有强大的抗炎和抗氧化作用 [ 7 – 12 ]。我们表明,模拟治疗显着在本研究中,我们直接测试了使用 apoAI 模拟肽 D-4F 和 L-5F 治疗是否可以改善高脂饮食 (HFD) 喂养小鼠的胰岛素敏感性,从而降低肝脏炎症。
* 20 世纪 60 年代,洛克菲勒大学的 Russell W. Schaedler 从 NCS 小鼠的胃和肠道中分离出了四种来自 Schaedler 原始菌群的 ASF 细菌。20 世纪 60 年代,Schaedler 的研究生 Roger P. Orcutt 从 Charles River 的 CD-1 小鼠的大肠中分离出了其他 ASF 生物。
