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C57BL/…超排卵策略的比较研究
超排卵和体外受精 (IVF) 等生殖技术已广泛用于产生转基因动物。目前小鼠超排卵的黄金标准是使用马绒毛膜促性腺激素 (eCG) 和人绒毛膜促性腺激素 (hCG) 的一致治疗。最近报道了一种使用抑制素抗血清 (IAS) 代替 eCG 的替代方法。在这里，我们评估了 C57BL/6J 和 B6D2F1 小鼠中的不同超排卵策略。首先，我们发现使用 5 周大的 C57BL/6J 和 4 周大的 B6D2F1 捐赠者可以获得更好的超排卵结果。然后，我们比较了两种小鼠品系中不同剂量的 eCG - hCG、IAS - hCG 和 eCG - IAS - hCG。使用 IAS - hCG 和 eCG - IAS - hCG 方法获得的卵母细胞数量显著增加。然而，自然交配时受精率较低（36.3 – 38.8%）。我们随后证实，IVF 可以显著提高受精率，最高可达 89.1%。最后，我们进行了 CRISPR-Cas9 介导的基因组编辑，以 Scn11a 和 Kcnh1 基因座为目标，并成功使用 eCG – hCG 和 IAS – hCG 诱导的受精卵获得了突变幼崽，这些幼崽通过自然交配或 IVF 受精。我们的结果表明，IAS 是一种很有前途的超排卵试剂，使用 IAS 诱导的受精卵不太可能影响基因组编辑的效率。
C57BL/6NCrl (B6N) 无菌小鼠 | Charles River - NET
* 20 世纪 60 年代，洛克菲勒大学的 Russell W. Schaedler 从 NCS 小鼠的胃和肠道中分离出了四种来自 Schaedler 原始菌群的 ASF 细菌。20 世纪 60 年代，Schaedler 的研究生 Roger P. Orcutt 从 Charles River 的 CD-1 小鼠的大肠中分离出了其他 ASF 生物。
衰老减少c57bl/6J小鼠血脑屏障的Docosahexaenoic酸
营养物质通过血脑验室（BBB）的各种转运蛋白（BBB）积极吸收。老年大脑缺乏特定的营养，包括doco-sahexaenoic酸（DHA）的水平降低与记忆和认知功能障碍有关。要补偿脑DHA的减少，必须通过运输载体将口服的DHA从Cir-Culting Acculting Acculting Flows运输到大脑，包括主要的辅助超家族域含有领域的蛋白2A（MFSD2A）和脂肪酸结合蛋白5（FABP5），这些蛋白5（Fabp5）具有运输和非遗传性DHA。尽管众所周知，BBB的完整性在衰老过程中发生了变化，但衰老对跨BBB的DHA转运的影响尚未完全阐明。我们使用原位跨心脑灌注技术使用了2-，8-，12个和24个月大的雄性C57BL/6小鼠，以评估[14 C] DHA的脑摄取，作为非层化形式。使用大鼠脑内皮细胞（RBEC）的原发性培养物来评估siRNA介导的MFSD2A敲低对[14 C] DHA的细胞摄取的影响。我们观察到，与2个月大的小鼠相比，脑摄取[14 C] DHA的脑摄取显着降低了[14 C] DHA的脑摄取显着降低，并且MFSD2A蛋白表达降低，与2个月大的小鼠相比，MFSD2A蛋白表达降低。然而，FABP5蛋白表达随着年龄的增长而上调。[14 C] DHA的脑摄取被过量未标记的DHA抑制。将MFSD2A siRNA转染到RBEC中，将MFSD2A蛋白表达水平降低了30％，并将[14 C] DHA的细胞摄取降低20％。这些结果表明MFSD2A参与了BBB的非固定DHA运输。因此，随着衰老而发生的DHA跨BBB的下降可能是由于年龄相关的MFSD2A而不是FabP5引起的。
使用雄性C57BL/6J小鼠诱导实验性糖尿病和糖尿病性肾病
链霉素（STZ）广泛用于诱导鼠模型中的实验性糖尿病。但是，诱导糖尿病性肾病（DN）的能力更具挑战性。建议在解散后15分钟内以多种低剂量注入STZ，原因是其据称不稳定。然而，一些研究表明，由于溶解后90分钟，由于其两种异构体（A和B）的平衡，STZ是稳定的数天，并且这种不平衡的STZ导致较高的存活率和持续性高血糖，而体重减轻最少。这项研究的目的是确定最佳的疾病平衡STZ剂量，以诱导肾小管损伤，并将其与更常用的新鲜准备的STZ进行比较。我们假设，态度平衡的STZ为糖尿病诱导的肾脏损伤提供了更好，可再现的实验模型，并改善了动物福利。身体测量值，禁食血症，胰岛素血症和肾脏组织学在男性C57BL/6J中在两个和六个月大时在男性C57BL/6J中评估，并用新鲜的（50 mg/kg）或肛门平衡的（剂量范围为35 E 50 mg/kg）或车辆控制。我们证明了肛门平衡的STZ对诱导低胰岛素血症和高血糖症的剂量依赖性作用，以及两个月大的小鼠的体重。有趣的是，在六个月大的小鼠中，STZ导致体重减轻，独立于STZ制备模式。平衡的STZ引发中度至重度肾小管结构性损害，导致明显的肾脏肥大，而新鲜准备的STZ仅引起轻微的改变。©2023作者。由Elsevier Inc.出版总而言之，我们的研究提出，疾病量化的STZ提供了糖尿病和早期糖尿病性肾病的强大鼠模型，该模型可用于测试治疗和/或预防肾脏损害的治疗方法。这是CC BY-NC许可证（http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/）下的开放访问文章。
作者校正：验证少年和成人C57BL/6小鼠的基于机器学习的辐射生物测量法
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在男性和雌性中使用磁场菌株C57BL/6
Castro，J。，＆Color，M。（1987）。伸展的效果用于镜子答案：1。避免灵敏度的变化。回顾了行为的墨西哥，13（1-2），135-143。Coffees，M。和Colwell，D。D.（1995）。傻瓜在女性小鼠中不情愿的答案。行为动物，50（5），1161-1 https://doi.org/10.1016/0003-3尾悬浮测试：新方法尖叫着抗逆向趋势。Psychosharmagolog（Berl），85（3），367–370。Suvrathan，A.，Tomar，A。和Chattarji，S。（2010年）。 编年史的影响，这是生命的根源。 压力，13（6），533-540。 Villafuerte，G.，Miguel-Puga，A.，Rodriguez，EM，Machado，S.，Manjar，E。，＆Arias-Carrión，O。 （2015）。 动物模型中的睡眠抑郁和氧化街：弃权系统。 氧化医学和凯尔特医学，2015年，1-15。 Walsh，R。N.和Cummins，R。A. （1976）。 开放式测试：关键审查。 Bulletin心理学，83（3），482–504。 Weiss，JM和Glazer，H。I. （1975）。 急性应激的影响我们随后行为甲维剂escape。 医学心理，37，499-521。 伸展的效果用于镜子答案：1。 （2015）。Suvrathan，A.，Tomar，A。和Chattarji，S。（2010年）。编年史的影响，这是生命的根源。压力，13（6），533-540。 Villafuerte，G.，Miguel-Puga，A.，Rodriguez，EM，Machado，S.，Manjar，E。，＆Arias-Carrión，O。（2015）。动物模型中的睡眠抑郁和氧化街：弃权系统。氧化医学和凯尔特医学，2015年，1-15。 Walsh，R。N.和Cummins，R。A.（1976）。开放式测试：关键审查。Bulletin心理学，83（3），482–504。Weiss，JM和Glazer，H。I.（1975）。急性应激的影响我们随后行为甲维剂escape。医学心理，37，499-521。伸展的效果用于镜子答案：1。（2015）。Camboos是Evitación秒的资源。conducta，诱导动物行为，50（5），1161-1（10.1016/0003-3472（95）80032-8STeru，L。Chermat，R.尾悬架测试：心理药理学（Berl），85（3），367–370.Suvrathan，A.，Tomar，A。，＆Chattarji，S。（2010）。。压力，13（6），533-5 ht ht ht：//do.org.org，2010.410.4镜像模型：https://do.org/10.115/2015/2 （1976）。 心理公告，83（3），482–5 （1975）。 心身，37，499-5https://do.org/10.115/2015/2（1976）。心理公告，83（3），482–5（1975）。心身，37，499-5
通过伦理上相关的化学感应刺激
大理石爆炸测试是一种经过药理验证的范式，用于研究实验室啮齿动物中的焦虑样行为。我们的实验室已将此测定作为行为筛查的一部分，以检查药物引起的负面情感状态。从历史上看，我们先前的大多数暴饮暴食研究都专门且可靠地检测到了基础和酒精戒断引起的负面影响的青少年差异。然而，在实验设计中包括女性受试者时，在我们先前的工作中，与年龄相关的大理石行为差异要么是不存在的，要么是相反的。据报道，由于雌性的化学感应提示是男性的抗焦虑性，因此本研究检查了相反的成年成员的气味如何影响成人以及青少年小鼠的大理石养成行为。对照研究研究了在存在新型中性（香草）和厌恶（茶树）气味的情况下小鼠的反应性。成年男性在存在女性床上用品的情况下表现出焦虑样行为的迹象，而两性的成年女性和青少年小鼠在存在男性和女性床上用品的情况下增加了大理石居民行为。在存在厌恶气味的情况下，所有小鼠都表现出更多的埋葬，而只有青少年才能响应新的中性气味而增加大理石居民。这些数据表明性别相互作用在性别和非挥发性气味的影响中，从性别不佳的成人种子中的挥发性和非挥发性气味在与实验设计的大理石爆炸性测试中，对实验设计和程序的相关性测试在包括性别作为生物学变量的大理石爆炸性测试中。
在45％高脂饮食饮食中的C57BL/6J小鼠模型中确定2型糖尿病的渐进阶段是通过使用空腹血糖水平和2小时的口服葡萄糖耐受性测试来实现的
2型糖尿病被认为是全世界十大威胁生命的疾病之一。为经济增长，肥胖和代谢综合征成为2型糖尿病的最常见危险因素。在这方面，高脂饮食喂养的C57BL/6J小鼠模型被广泛用于2型糖尿病发病机理和新型疗法发育。然而，在该小鼠模型中，用于对2型糖尿病进行分类的严重性疾病尚未确定，这导致了实验终点决策的困难。在这项研究中，我们以45％的高脂饮食喂食C57BL/6J雄性小鼠，该饮食在生理上接近人类的高脂作用，并评估了2型糖尿病的进展。在食用高脂饮食4周后，小鼠出现了代谢综合征，包括肥胖症，快速血浆胆固醇水平的显着增加，C肽升高和空腹血糖水平。通过将空腹血糖测试和2小时的口腔葡萄糖耐受性测试结合起来，我们的结果表明了从代谢综合征进行明确的渐进阶段，然后在C57BL/6J小鼠中2型糖尿病开始前，给定了45％的高脂饮食。此外，在代谢测量中，可以将积累体重增加> 16.23 g 12周，可以用作预测C57BL/6J小鼠中2型糖尿病发育的潜在参数。因此，这些结果可能会在选择适当的饮食饮食饮食C57BL/6J小鼠模型中选择适当的疾病阶段的期限来支持未来的研究，以研究2型糖尿病的早期预防和治疗。
肠道细菌衍生的琥珀酸酯诱导肠神经系统再生
图1：肠神经元和神经胶质的微生物依赖性维持。（a）在稳态（左）（左）和治疗后五天（右）免疫染色（右）的小鼠卵形丛的共聚焦显微镜图像，用于ANNA1和SOX10。比例尺，50μm。（b）用水或抗生素处理的小鼠的神经元（ANNA1）和膜内神经胶质（SOX10）的定量五天（n = 7）。（c）抗生素治疗后用内部C57BL/6 SPF小鼠进行粪便菌群转移（FMT）实验的示意图。（d）在整个实验（ABX）中用抗生素治疗的小鼠或在抗生素治疗后从SPF小鼠中接受抗生素的小鼠的神经元（ANNA1）和临时胶质神经胶质（SOX10）。FMT后7天分析小鼠（n = 11 ABX，n = 13 fmt）。灰色阴影线指示内部C57BL/6小鼠稳态处的单元格数范围。（e）用ABX或接受FMT处理的SPF小鼠的肠道传输时间测量（n = 10 ABX，n = 11 FMT）。小鼠。灰色阴影线表示稳态处的基线传输时间（n = 10）。数据来自两个独立的实验。（f）抗生素治疗后杰克逊C57BL/6J小鼠的粪便转移实验的示意图。（g）单独用ABX治疗的C57BL/6J小鼠的神经元和神经胶质神经胶质的定量或从失调或SPF小鼠中接受FMT的神经元（n = 5）。小鼠。所有数据均表示为平均值±SEM。（h）沙门氏菌SPIB感染后，杰克逊C57BL/6J小鼠中粪便转移实验的示意图表示。（i）仅用ABX治疗的C57BL/6J小鼠的神经元和神经胶质神经胶质的定量，或从失调或SPF小鼠接受FMT（神经元，n = 7 = 7失菌率，N = 9 SPF; GliA n = 9 spf; GliA n = 4 = 4 = 4 spf）。灰色阴影线指示C57BL/6J小鼠G和i中C57BL/6J小鼠中的细胞数范围。一个未配对的两尾学生的t检验用于面板B，D，E和i。一个单向方差分析进行了多个假设检验，用于面板g。所有数据均从回肠myenteric丛中获得。数据来自至少两个独立的实验，除了面板i中的胶质定量。