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CHO 细胞具有内源性逆转录病毒 DNA 元件，可产生逆转录病毒样颗粒
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ciiraae 约 107 年发出的鹰信回声 - #4 四月 / 六月...
此次活动由上塞纳省军事代表团 (DMD 92) 组织，并得到了预备役协会、BSPP、ECPAD、SHD、楠泰尔监狱服务、宪兵队和国家警察、CIRFA、第 24 RI 的支持……总共有近 300 人为这次公民集会的成功做出了贡献，其中包括来自 BA 107 的三名士官学生，他们在集会前一天和后一天为 DMD 92 的管理提供了支持，通过装备和设置展台来帮助集会的后勤工作。它是军事界和教育界之间的纽带的一部分，除了其纪念性质外，其目标是通过公民和体育活动来促进共和和公民价值观。并向年轻人介绍国防、内部安全部队和人口保护的世界。
使用CRISPR介导的集成系统将转基因的靶向敲入转基因进入CHO细胞基因组
抽象的生物药物蛋白通常是通过培养重组中国仓鼠卵巢（CHO）细胞而产生的。高生产者细胞系从转染的细胞中筛选，并随机整合靶基因。由于转基因表达易受综合基因组基因座的周围环境的影响，因此应从大量具有异质转基因插入的重组细胞中选择生产者细胞系。相比之下，靶向集成在特征的基因组基因座中可以预测的转基因表达和较少的克隆变异性，因此可以预期稳定的靶蛋白产生。基于基于可编程核酸酶的基因组编辑技术最近已成为细胞基因组中靶基因座精确编辑的多功能工具。在这里，我们使用CRISPR/CAS9和CRISPR介导的精确整合到靶染色体（PIST）系统中，证明了将转基因的靶向敲入转基因的CHO细胞中的低黄嘌呤磷酸糖基转移酶（HPRT）基因座。我们还基于与同源性的靶向集成（HITI）系统生成了敲入CHO细胞。我们使用这些系统评估了转基因在HPRT基因座中的敲门效率。
优化的 CRISPR/Cas9 策略用于 CHO 细胞中同源定向多靶向转基因整合
已提出将转基因定点整合到指定基因组位点作为替代 CLD 方法，因为它可以减轻克隆 rCHO 细胞系中出现的高度异质性，从而缩短 CLD 时间 (Lee et al., 2015b; Lee et al., 2019)。可编程核酸酶介导的基因组编辑技术的出现通过诱导定点 DNA 双链断裂 (DSB) 加速了 CHO 基因组的靶向修饰，从而激活 DNA 损伤修复途径。在各种基因组编辑工具中，基于 RNA 引导的工程核酸酶的 CRISPR/Cas9 技术由于其组成简单、靶向效率高，已在 CHO 社区中迅速采用 (Lee et al., 2015a)。值得注意的是，CRISPR/Cas9 已成功应用于以精确的方式将转基因插入目标 CHO 基因组位点，并在创建 DSB 后进行同源定向修复 (HDR) (Lee et al., 2015b; Lee et al., 2016)。
适合所有人的人工智能 (A.I)
根据人工智能科学家吴恩达先生（Google Brain - 百度人工智能 - Deeplearning.ai - 斯坦福大学）Jeffrey C. Grossman教授的《理解未来的科学：神话与现实》教科书编写的讲座麻省理工学院 (MIT)
在 CHO 细胞中有效 CRISPR/Cas9 介导的 BAX 基因消融可损害细胞凋亡并增强重组蛋白的产生
背景：尽管最近利用 CHO 细胞生产重组生物治疗药物取得了进展，但其生产率仍低于工业需求，主要是由于细胞凋亡。目的：本研究旨在利用 CRISPR/Cas9 技术特异性破坏 BAX 基因，以减轻产生促红细胞生成素的重组中国仓鼠卵巢细胞的细胞凋亡。材料和方法：使用 STRING 数据库识别要通过 CRISPR/Cas9 技术修饰的关键促凋亡基因。设计针对已识别基因 (BAX) 的单向导 RNA (sgRNA)，然后用载体转染 CHO 细胞。随后，研究了操纵细胞中 Bax 基因表达的变化以及随之而来的促红细胞生成素产生率，即使在存在凋亡诱导剂橄榄苦苷的情况下也是如此。结果：BAX 破坏显著延长了细胞存活率，并增加了操纵克隆的增殖率（152%，P 值 = 0.0002）。该策略将操纵细胞中的 Bax 蛋白表达水平降低了 4.3 倍以上（P 值 <0.0001）。与对照组相比，Bax-8 操纵细胞对压力和结果凋亡表现出更高的阈值耐受性。此外，在橄榄苦苷存在的情况下，它们与对照组相比表现出更高的 IC50（5095 µM.ml -1 Vs. 2505 µM.ml -1 ）。我们发现，与对照细胞系相比，即使存在 1,000 µM 橄榄苦苷，操纵细胞中的重组蛋白生产水平也显著增加（p 值 = 0.0002）。结论：CRISPR/Cas9 辅助 BAX 基因消融有望通过工程化抗凋亡基因来改善 CHO 细胞中的促红细胞生成素产生。因此，有人提出利用 CRISPR/Cas9 等基因组编辑工具来开发宿主细胞，从而实现安全、可行、稳健的制造操作，且产量满足工业要求。
将 CRISPR 干扰与 FACS 富集相结合：CHO 细胞系糖工程用于治疗性糖蛋白生产的新方法
图 2 富集具有低细胞表面岩藻糖基化的细胞。（A）Fut8 和对照池以及富集池和克隆的 AAL-FITC 染色。仅对生成的三个对照池和 Fut8 池中的一个进行染色并用于进一步富集。每个组中选择用于进一步评估的克隆都标有星号（参见图 S3 中仅选定的克隆）。（B）对来自 a) 的 FITC 信号的 MFI 进行量化。点表示每个染色池或克隆的测量值。（C）对对照和 Fut8 池以及在 6 天批次中培养的选定富集池和克隆中的 Fut8 基因表达进行 qPCR 量化。所有三个未富集的对照和 Fut8 池都进行了培养。点表示池（条 1、2、4、5）或单个克隆（3 和 6）的生物学重复。误差线表示池或单个克隆的生物学重复的 SEM。使用非配对 t 检验来计算对照和 Fut8 富集克隆之间的统计学意义
开展 CHO DG44 全基因组 KO 筛选，揭示基因组学与快速生长表型之间的联系
中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞系广泛应用于生物制药生产。细胞系生成的改进加快了最终生产克隆的速度，但开发新型生物分子、生产力限制和市场需求方面的挑战使得细胞系开发 (CLD) 必须不断改进。虽然细胞生长在 CLD 期间显示出明显的瓶颈，但对 CHO 细胞系生长表型的研究有限。最近的一项研究成功地分离并永生化了一种源自原代肺细胞的新型中国仓鼠细胞系，该细胞系表现出更快的生长速度、稳定的生产力和高水平的生物制药蛋白质生产 1 。值得注意的是，CHL-YN 细胞系的倍增时间缩短至 10.7 小时，而 CHO 细胞系的倍增时间通常为 18.0 至 22.0 小时。在这里，我们旨在进行全面的全基因组敲除 (KO) 筛选，以确定加速 CHO 细胞生长的遗传靶点和途径，揭示与 CHO 细胞生长相关的基本遗传机制。我们建立了一个强大的 CRISPR 能力的 CHO DG44 细胞系，能够在单向导 RNA (sgRNA) 存在的情况下以可预测的方式产生插入/删除 (InDel) 事件。此外，我们测试了使用小型 140 sgRNA 微型文库生成和培养转导文库的方法。我们优化的设置能够实现约 80% 的单拷贝整合，这比最近文献中的过去工作有所改进 2 。此外，我们为影响生长的基因靶标的 CRISPR 核酸酶表达依赖性富集和消耗效率提供了证据。
scivario®双重自我缩放基于CHO培养的抗体生产从Bioblu®3C到Bioblu®50C单使用生物反应器
细胞疗法是一个高级且有希望的领域，有可能改变现代医学，并为具有未满足医疗需求的不同疾病地区的患者带来治疗益处。自体细胞疗法是一种新颖的干预措施，其中从单个患者中收集细胞，体内扩展/工程，并重新插入同一患者。这是一种有前途的方法，可降低免疫排斥的风险和对免疫抑制药物的需求。然而，高成本，扩大的复杂性以及为每个患者制造最终产品的延长时间带来了一些挑战，以阻止其发挥全部潜力。现成的细胞疗法（同种异体细胞疗法）利用从健康供体中收集的细胞（例如，避免可能导致成功的患者细胞突变），并用于具有不同医疗状况的患者。在这个意义上，诱导的多能干细胞（IPSC）可以提供
引用：Kameda R，Nomoto H，Cho Ky等。从二肽基肽酶4抑制剂转换为luseogliflozin对夜间血液Pressu
摘要引入夜间高血压对于2型糖尿病患者（T2D）在临床上很重要，因为它与心血管事件有很强的相关性。我们旨在检验以下假设：钠 - 葡萄糖共转运蛋白2抑制剂Luseogliflozin，比二肽基肽酶（DPP）-4抑制剂在T2D患者中更有效地改善夜间高血压。方法和分析本研究是一项多中心，前瞻性，随机，开放标签，盲目端点并行组试验。六十名患有T2D和高血压的参与者已接受DPP-4抑制剂治疗超过4周，并且具有6.0％–9.0％的血红蛋白A1C（HBA1C）水平为6.0％–9.0％，将根据年龄，体重指数（BMI）和HBA1C的年龄为单位，将其dpp-4 mig for luse complo luse complo luse to luse to luse to luse in nigitor as in nigitor a in andim ins nigition。几周。24小时的门诊血压监测（ABPM）将在基线和研究结束时进行两次。所有参与者将继续他们的饮食和运动疗法，在研究期间不会调整伴随药物的剂量。主要终点是Luseogliflozin对ABPM测量的夜晚收缩压（SBP）平均变化的影响。次要终点是夜晚的舒张压（DBP）的平均变化，SBP和DBP的24小时，白天SBP和DBP，脉搏率，BP M值，下一个剂量前1小时，下一个剂量之前1小时以及其他实验室参数。计算样本量的两侧测试，以90％的功率检测处理之间的差异。道德和传播北海道大学医院伦理审查委员会已批准该协议。结果将在同行评审的期刊和科学会议上传播。试验注册号大学医院医疗信息网络（UMIN000031451）;日本临床试验登记处（JRCTS011180019）;预兆。