这项研究的目的是在HOA loc sand芒果果皮上收集,分离和识别一些酵母品种,能够抑制浓咖啡酸盐的糖菌蘑菇,这些蘑菇在收获后在舞台上在芒果上引起炭疽病。在这项研究中,酵母菌菌株从芒果壳中取代,芒果壳基于许多不同的方法,包括形态特征,生化特征和分析26S rDNA序列。结果确定了三种酵母菌,包括Hanseniasporta Thailandica,Hanseniasporta Oputiae和Pichia Barkeri。然后,这些酵母菌菌株对Colletotrichum gloeosporioides的抑制能力是通过CO培养方法在体外进行的,结果表明,在培养10天后,拮抗剂比50%以上的拮抗率高于50%。这项研究最初表明,使用酵母来控制生物学是控制收获后对芒果的致病作用的潜在方法。
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摘要:苹果的苦腐是由不同的Colletotrichum物种引起的一种经济重要的全球疾病,具体取决于许多因素,例如气候,地理,其他宿主和作物管理实践。培养,形态和基于单位液测序的方法用于识别Colletotrichum物种的有效性受到严重限制,而可用于描述物种的多核序列分型方法是昂贵,时间密集的,并且需要高专业知识。我们开发了以下九种coltotrichum物种的物种特异性水解探针实时PCR分析,在美国中大西洋中引起苦腐腐烂。来自阿司霉菌物种复合物的若虫。在搜索14个基因区域后,我们在其中5个目标物种中设计了底漆和探针。四个引物 - 探针套装对被复式。灵敏度测试显示出可检测到0.5 pg DNA。这些实时PCR分析将对这些关键的Colletotrichum物种提供快速而可靠的识别,对于旨在阐明其生物学,流行病学和管理苹果的研究至关重要,因为在美国生产和消耗的树木水果。
图 1. CRISPR-Cas9 RNP 促进 C. higginsianum 中与供体 DNA 的同源重组。(a)CRISPR-Cas9 RNP 介导的 HDR 示意图。首先,将重组 Cas9 蛋白(橙色)和针对目的基因 (GOI) 的合成 gRNA(洋红色)在体外混合以形成 RNP。其次,用 RNP 和供体 DNA 转化 C. higginsianum 原生质体,其中供体 DNA 具有选择标记 NPTII,两侧是两个同源臂。最后,通过结合选择培养基和基于 PCR 的筛选来分离用选择盒替换 GOI 的菌株。(b)URA3 敲除的构建设计。供体 DNA 具有选择标记,即 NPTII 表达盒,两侧是 0.5 kb 的同源臂,以浅灰色框表示。箭头表示扩增 ura3 基因组中特异性存在的“片段 1”和“片段 2”的引物。(c)转化子数量和 URA3 敲除率。左图显示每板转化子数量,右图显示每板 URA3 敲除率(n =5)。“-gRNA”和“+gRNA”分别代表不含和含 gRNA 的结果。星号表示统计差异(p < 0.001,Welch t 检验)。通过 PCR 筛选评估 URA3 的敲除,如 (d) 所示。(d)ura3 突变体的 PCR 筛选。使用 (b) 中所示的引物组,在含有 500 µg/ml G418 的 MA 上使用每个菌落进行 PCR。显示了从 -gRNA 和 +gRNA 转化子中随机选择的七个菌落的结果。 C. higginsianum 肌动蛋白基因 (CH63R_04240) 的 238 bp 片段被指定为肌动蛋白。凝胶左侧的数字表示 DNA 大小标记 (bp) 的位置。
细菌和酵母是从鳄梨树的叶子,花朵和果实中分离出来的几年,这些鳄梨树已经被杀虫剂喷洒了几年。分离出的1050种微生物,37%抑制了谷甲藻菌菌群在马铃薯葡萄糖琼脂上的菌丝体生长。这些生物中的许多生物还显着降低了质真菌在覆盖弱糖琼脂的孢子虫的孢子发芽,而比细菌的酵母比更有效。一些细菌和酵母还减少了鳄梨叶盘上病原体的孢子发芽。主要的抑制细菌组为芽孢杆菌属,拮抗酵母菌包括金黄色葡萄球菌。以及各种粉红色和白色菌落类型。杆菌的抗生素耐药物,两种酵母菌的甲状腺素抗分离株和一个金黄色卵巢菌。喷在鳄梨叶上,并在Phylloplane上存活至少2个月。根据这些测试的性能,选择了生物防治和定殖电势的分离株,并测试了它们提供疾病控制水果的能力。在重复测试中,几种细菌和酵母在用病原体接种果实之前施用脱离的鳄梨果实的病变发育和病变大小。