• 多种常规和水浸物镜,用于体内和体外成像。 • 20X 微探针,插入动物体内即可进行高分辨率荧光成像。 • 可调脉冲激光,波长范围为 690 nm 至 1040 nm,配有 3 个标准 PMT 光检测器。 • 能够检测大多数染料和荧光蛋白、DAPI、罗丹明、钙黄绿素、Fluo-3、Fluo-4。 • 产生二次谐波信号和自发荧光分子,如胶原蛋白 I 和 NADH。 • 对大脑中的神经网络、视网膜中的光感受器、癌细胞和胶原纤维进行成像。
图2:Netri神经流体设备中神经毒性扩散测定的开发。主要大鼠神经元在双链偏移Neobento™中生长,以允许细胞和突触的分隔,并用MAP2和DAPI标记。使用10X目标以共聚焦模式在Operetta CLS系统上获取图像。a)基于轴突腔中的βO浓度的增加,ETAP-LAB能够证明体细胞腔中的核数量减少以及轴突腔中轴突的碎片(概述图像)。b)车辆控制中健康神经元的详细视图。
图1。细胞迁移和入侵测定。使用RGO-PEI UT和RGO-PEI MS对GL261细胞系对细胞迁移和侵袭的抑制作用。在与RGO-PEI UT,RGO-PEI MS孵育之前,将细胞粘附在Matrigel上,或者在24小时内没有任何RGO-PEI。核用图像中的蓝色染色的DAPI染色。数据作为平均迁移和入侵细胞数量比各自对照的比率表示。该值表示平均值±SEM,来自两个独立实验的总计n = 4,每个实验都具有重复的测量。*** p <0.0001,**** p <0.00001。图像代表了每种条件(比例尺:500 µm)。
图 1 CT26 细胞中白蛋白摄取的特征。(A)将细胞与 FITC 标记的白蛋白一起孵育。通过流式细胞术测定 FITC 阳性细胞(散点图,R2)和平均 FITC 荧光强度(条形图)(ex/em:488/530 nm,荧光强度标准化为自发荧光对照)。(B)通过流式细胞术测定内吞抑制剂 M b CD、CHP 和 EIPA(1 小时预处理)对 3 小时后 FITC 标记白蛋白摄取的影响。(A)和(B)中的值是三个独立实验的平均值 SD。通过单因素方差分析和 Dunnett 多重比较检验检验统计学显着性(* p < 0.05,** p < 0.01 和 *** p < 0.001)。 (C) 通过共聚焦显微镜验证了 FITC 标记白蛋白 (绿色) 的摄取和三种内吞抑制剂的影响。细胞核 (蓝色) 和膜 (红色) 分别用 DAPI 和 WGA 共染色。图像显示所有三个通道的叠加。 (D) 未经治疗的小鼠的 sc CT26 肿瘤中白蛋白含量的免疫组织化学分析 (用 20 和 63 物镜进行的显微镜检查)。细胞核和白蛋白分别用苏木精 (紫色) 和 3,3 0 -二氨基联苯胺 (棕色) 显影。 (E) 用 16.5 mg kg 1 荧光素标记的马来酰亚胺 (绿色) 治疗 CT26 小鼠。30 分钟和 5 小时后收获肿瘤,然后对细胞核 (DAPI,蓝色) 和血管 (内粘蛋白,红色) 进行免疫荧光染色。使用 40 倍物镜通过荧光显微镜进行评估。图像显示所有三个通道的叠加。使用 Definiens 软件计算每平方毫米的荧光强度(左图中的条形图)。荧光强度值以两个不同肿瘤样本的平均值 SD 表示。
缩写 定义 3D 三维 ABS 丙烯腈-丁二烯-苯乙烯 AC 交流电 ALARA 尽可能低的合理值 AMF 增材制造设施 ARS 急性辐射综合症 BER 碱基切除修复 CME 日冕物质抛射 CNT 碳纳米管 CRS 慢性辐射综合症 DAP 剂量面积乘积 DAPI 4',6-二氨基-2-苯基吲哚 DC 直流电 DEP 介电泳 DMEM 杜氏改良鹰培养基 DNA 脱氧核糖核酸 DSB 双链断裂 EDTA 胰蛋白酶-乙二胺四乙酸 EMU 舱外机动装置 ESA 欧洲航天局 ESD 静电放电 EVA 舱外活动 GCR 银河宇宙辐射 Gy 格雷 HDBPE 高密度硼化聚乙烯 HDPE 高密度聚乙烯 HZE 高电荷 Z 和高能 ICRP 国际委员会放射防护 ICRU 国际辐射单位与测量委员会
图2。DRP1介导的线粒体裂变的稀疏敲低破坏了星形胶质细胞组织。a。对照(左)和SHDRP1(右)星形胶质细胞簇的代表性图像在p21视觉皮层中的核(底部)中放大。b。P180对照(左)和SHDRP1(右)星形胶质细胞簇中Sox9(绿色)和DAPI(青色)的代表性图像。c。 p21对照和SHDRP1星形胶质细胞中每个簇的星形胶质细胞核数量的量化,n = 5只动物,每个条件,未配对的t检验。条是平均值±SEM。d。 p21对照和SHDRP1星形胶质细胞中每个簇相邻星形胶质细胞核的数量,n = 5只动物,每个条件,未配对的t检验。条是平均值±SEM。e。 p180对照和SHDRP1星形胶质细胞中每个簇相邻星形胶质细胞核的数量定量,n = 3只动物,每个条件,未配对的t检验。条是平均值±SEM。
浓度。DMEM培养基、0.25%胰蛋白酶(Gibco,美国)、胎牛血清(Every Green,中国)、青霉素和链霉素(Sigma-Aldrich,美国)、FITC Annexin V 凋亡检测试剂盒和 7-AAD(BD Biosciences,美国)、CCK-8(Dojindo,日本)、DAPI(Beyotime,中国)、TRIzol 试剂(Invitrogen,美国)、First Stand cDNA Synthesis Kit(Thermo Fisher Scientific,美国)和 UltraSYBR One-Step RT-qPCR Kit(Cwbio,中国)。所有引物均购自GeneScript(中国)。一抗p27(sc-71813)、CDK2(sc-53219)、Cyclin D1(sc-56302)、p53(sc-71819)、Bax(sc-20067)、Bcl-2(sc-56015)、cleaved PARP(sc-56196)和β-actin均购自Santa Cruz Biotechnology(美国),cleaved caspase-3[9661]和cleaved caspase-9(9505和9509)购自Cell signaling Technology(美国)。p53抑制剂(PFT-α,s2929)购自Selleck Chemicals(美国)。
MMC对RH30和RD球体的影响。 a如果在Rh30 -arms-(左)(左)和RD -erms-(右)球体上染色(FN; Green)和胶原I(大肠杆菌;红色),则在不存在MMC处理的情况下冷冻切片(DAPI,cell核,蓝色),比例尺=50μm。 B胶原蛋白I的平均荧光强度(MFI)和球体冷冻切片中的纤连蛋白表达。 c离开。 在所有测试条件下播种在ULA板中的球体的相对形图像,以及井底RH30粘附细胞的细节。 比例尺=右200μm。 如果在RH30和RD球体中用MMC处理的纤连蛋白和胶原蛋白I的染色显示RH30球体下方的粘附细胞的存在。 比例尺=50μm。 d无需MMC处理的RH30和RD球体的形状参数(面积,周长,圆度和坚固),n = 12,Student t -test*p <0.05,** p <0.01,**** p <0.0001。 (为了解释该图传奇中对颜色的引用,读者被转介给本文的网络版本。)MMC对RH30和RD球体的影响。a如果在Rh30 -arms-(左)(左)和RD -erms-(右)球体上染色(FN; Green)和胶原I(大肠杆菌;红色),则在不存在MMC处理的情况下冷冻切片(DAPI,cell核,蓝色),比例尺=50μm。 B胶原蛋白I的平均荧光强度(MFI)和球体冷冻切片中的纤连蛋白表达。c离开。在所有测试条件下播种在ULA板中的球体的相对形图像,以及井底RH30粘附细胞的细节。比例尺=右200μm。如果在RH30和RD球体中用MMC处理的纤连蛋白和胶原蛋白I的染色显示RH30球体下方的粘附细胞的存在。比例尺=50μm。 d无需MMC处理的RH30和RD球体的形状参数(面积,周长,圆度和坚固),n = 12,Student t -test*p <0.05,** p <0.01,**** p <0.0001。(为了解释该图传奇中对颜色的引用,读者被转介给本文的网络版本。)
(a)实验设置和集成的概述。(b)1p染色体上的信号。左:在 +DSB条件下的单细胞热图(RPKM),其顶部为 +DSB(有色)和–DSB(灰色)条件的单细胞聚集体。右:带有覆盖MSR调用的单细胞线图。asisi主题用黑线注释,红色三角形表示经常裂解(或“顶部”)位点。(c)所有修复频率≥10%的ASISI位点的条形图,每个位点的修复频率(目标蛋白质和方法)颜色为颜色。通过增加绝对修复频率(即任何数据集中的最高频率)来订购(在X轴上)。每个站点,通过增加每个数据集的维修频率(前后;即未堆叠栏)来排序条。底部水平条表示先前的(缺乏)注释作为顶部位点。(d)一个代表性核的共聚焦图像显示DAPI,RAD51 DAMID M6 A-TRACER和内源性γH2AX免疫荧光染色。(e)信号共定位(Manders的A和B每个核)的定量,n = 33核。
a,实验设置和集成的概述。b,染色体1p上的信号。左:在 +DSB条件下的单细胞热图(RPKM),其顶部为 +DSB(有色)和–DSB(灰色)条件的单细胞聚集体。右:带有覆盖MSR调用的单细胞线图。asisi图案,用黑线注释,红色三角形表示经常裂解(或“顶部”)位点。c,所有ASISI位点的条形图≥10%,每个位点的修复蛋白频率(靶蛋白和方法)都有颜色。通过增加绝对修复蛋白频率(即,任何数据集中的最高频率)。每个站点,通过增加每个数据集的修复蛋白频率(即前后;即未堆叠)来排序条。底部水平条表示先前的(缺乏)注释作为顶部位点。d,一个代表性核的共聚焦图像,显示DAPI,RAD51 DAMID M6A-Tracer和内源性γH2AX免疫荧光染色。e,信号共定位的定量(manders的a和a和b每个核),n = 33核。