迁移分析。(a)在时间零(左)和24 h(右)后用DMSO和1B处理的MDA-MB-231细胞的刮擦环区域的快照(右)。绿线突出显示了刮擦所产生的差距。(b)条形图与未处理的细胞对照(DMSO)相比,用1B处理后MDA-MB-231细胞的伤口闭合百分比。错误条:n = 3的±SD; p≤0.05, *(ANOVA)。
摘要:纤维素溶液在制成各种再生产品 (如纤维、薄膜) 之前几乎不可避免地需要进行储存,尤其是在工业生产中。因此,有必要评估储存时间和温度对纤维素在感兴趣的 TBAH 基溶剂 (包括 TBAH/H 2 O、TBAH/H 2 O/DMSO、TBAH/H 2 O/尿素) 中溶解状态的影响,以及对相关再生产品 (本文制备了薄膜进行评估) 的力学性能的影响。利用偏光显微镜照片和 Stormer 粘度分析了纤维素在这些溶剂中以及储存过程中的溶解状态。针对感兴趣的 TBAH/H 2 O/DMSO 溶剂,讨论了储存时间和温度对溶液粘度和纤维素聚合度的影响。确定了不同贮存温度下纤维素发生明显降解的临界贮存时间,制备了一系列贮存时间为0~200小时的再生纤维素膜,探讨了纤维素/TBAH/H 2 O/DMSO溶液再生纤维素膜的最佳贮存时间和强化机理,可为纤维素/TBAH/H 2 O/DMSO贮存时间和温度的研究提供参考,尤其可为中试生产等提供参考。
图 4:(A) N=10 个原发性卵巢癌样本中,DMSO 标准化基线或随着 GTAEXS-617 浓度增加而治疗时的癌细胞数量。(B) 基线和体外 GTAEXS-617 治疗浓度增加时的癌细胞分数;患者样本反应的主观分组与 (A) 中的剂量反应曲线相关。显示箱线图和异常值。(C) 在使用浓度增加的 GTAEXS-617 和 CDK4/6 抑制剂 palbociclib 治疗后,DMSO 标准化免疫细胞 (黑色) 或癌细胞 (蓝色) 的相对细胞数量;N=10 的箱线图。
a。CDK7底物(RNAP II)在用DMSO(对照)处理的HCT116细胞中或通过免疫印迹测量的指示化合物。b。通过免疫印迹在处理过的HCT 116细胞中癌基因C-MYC和DNA双链断裂标记H2AX的表达。C.细胞增殖(C -BRDU分析)和D,处理后的HCT 116细胞中的细胞凋亡分析(Annexin V/7AAD染色)。e。在用DMSO(对照)处理的MDA-MB-231(TNBC)细胞中,在MDA-MB-231(TNBC)细胞中的凋亡制造商(裂解的caspase 3和裂解PARP1)的表达表达或通过免疫印迹测量的指示化合物。
在生物力学测试之前,通常会冷冻新鲜的人体组织样本,以抑制初始分解过程并实现组织采集与生物力学测试的时间独立性。本研究的目的是比较人类髂胫束 (IT) 的新鲜组织样本与从同一 IT 中采集的新鲜冷冻样本以及在冷冻前用不同浓度的二甲基亚砜 (DMSO) 改性的样本的机械性能。所有样品都经过部分塑化,并使用单轴拉伸试验装置进行破坏性拉伸试验。改进了实验室中已经建立的塑化技术,以改善样品的夹紧行为。材料失效是由承重胶原纤维束的逐渐断裂引起的。与我们的预期相反,新鲜和新鲜冷冻样本的拉伸强度之间没有发现显著差异。与新鲜冷冻样品相比,添加 1 wt% DMSO 不会增加拉伸强度;添加 10 wt% DMSO 甚至导致拉伸强度降低。根据我们的研究结果,使用简单的新鲜冷冻样品来确定拉伸强度是可行的;然而,应使用新鲜样品来生成完整的性能曲线。
冷冻保存代表了自体造血干细胞(HSCS)移植和脐带血液单位(CBU)的重要步骤,当同种异体外周血干细胞(PBSC),有时是骨髓(BM)时,收获后不能立即注入骨髓(BM)。HSC在二甲基磺代(DMSO)中冷冻保存。尽管DMSO保留了细胞活力,但解冻后可能对细胞有毒,并在输注过程中具有剂量依赖性毒性。冷冻保存的HSC解冻和洗涤程序是移植效率的关键因素。Rubinstein等人提出了经过验证的洗涤冷冻细胞的经过验证的解决方案。2,但是主要组成部分dextran40在意大利不可用。没有可用的替代解决方案。我们选择了基于4%改良的液体明胶的胶体体积替代溶液4%w/v(Gelofusine,B Braun)的琥珀酰化明胶(胶蛋白,B Braun),作为用于洗涤融化的HSCS产品的Dextran 40的替代方案。本报告的目的是验证胶霉素作为洗涤溶液,以从冷冻保存的HSC中去除DMSO。此外,我们报告了对成人和小儿患者的移植后,在验证后对第一个融化的HSC产品的临床经验。
苯并呋喃取代的查耳酮衍生物;复合物 1 [(4) ‐ ((1E) ‐ 3 ‐ (1) ‐ 苯并呋喃 ‐ 2 ‐ 基) ‐ 3 ‐ 氧代丙 ‐ 1 ‐ 烯 ‐ 1 ‐ 基] ‐ 2 甲氧基苯基氯乙酸酯) 和复合物 2 [3 ‐ [(1E) ‐ 3 ‐ (1 ‐ 苯并呋喃 ‐ 2 ‐ 基) ‐ 3 ‐ 氧代丙 ‐ 1 ‐ 烯 ‐ 1 ‐ 基)] 苯基氯乙酸酯) 被合成 16,17 并进行了表征 (Alioglu 等人,已提交)。在二甲基亚砜 (DMSO) 中制备查耳酮复合物 (复合物 1 和 2) (50 mM) 和氯硝柳胺 (20 mM) 的储备浓度。复合物浓缩液中的最终 DMSO 浓度确定为 0.2% v/v,文献报道该浓度无毒。18 将复合物的储备液分装并储存在 −20°C 下。Niclosamide 购自 Sigma(目录号:N3510;Sigma-Aldrich)。碘化丙啶 (PI) 购自市售(Sigma-Aldrich)。Hoechst 染料 33342 来自 Enzo Life Sciences。
图 4. 72 小时 ENL 抑制剂处理后,(a) MOLM-13 (b) MV4-11 (c) Jurkat 和 (d) HEK293T 细胞的存活率。(e) 72 小时抑制剂 13 处理后,MOLM-13、MV4-11、Jurkat 和 HEK293T 细胞的细胞存活率比较。(f) MOLM-13 (g) MV4-11 和 (h) Jurkat 细胞在 10 µM ENL 抑制剂作用下的增殖。(i) 在指定温度下,用 10 μM (+) 或 DMSO (-) 中的 13 处理的 MOLM-13 (顶部) 和 MV4-11 (底部) 细胞中的 CETSA。β-肌动蛋白用作上样对照。用 13 或 DMSO 阴性对照处理的 (j) MOLM-13 和 (k) MV4-11 细胞中 HOXA9、MEIS1、MYB 和 MYC 基因表达的 qRT-PCR 分析。 *P < 0.05,**P < 0.01,***P < 0.001,****P < 0.0001。不显著 (ns) P > 0.05。
Cells4Life表示,它是英国最大的脐带血银行服务提供商。该公司将其专有技术销售(两种溶液的精确,低浓度混合物”,冷冻保护剂二甲基亚氧化二甲基磺代(DMSO)和葡萄糖(Dextran)(收集,处理和冻结之后,其样品与其他处理方法相同的干细胞都具有三倍的竞争方式(假设),并且跨越了其他方法,并且跨越了其他处理方法,并且该样品跨越了其他方法,并且跨越了其他处理方法,并且跨越了其他方法,并且该方法跨越了冻结的方法,并跨越了其他方法。利物浦大学干细胞和再生医学教授帕特里夏·默里(Patricia Murray)说,没有明确的科学理由为什么小礼帽的替代品应该超过市场替代品。“他们在Toticyte中所拥有的只是DMSO和Dextran,它们是良好的冷冻保护剂,”她说,“ DMSO和Dextran的百分比可能略有差异,但您不会期望它对细胞存活产生如此巨大的影响。” Cellife的首席执行官克劳迪娅·里斯(Claudia Rees)对此做出了回应,他说,小吃被用作血液分离试剂与沉积物红细胞,因此可以在冷冻之前将其去除,而不是作为冷冻保护剂。Murray指出了2014年国际搜索机构(ISA或专利局)的书面意见,当时Cells4Life申请了世界知识产权组织下的专利。ISA检查了小提琴对沉积物红细胞的应用以及其作为冷冻保护剂的作用,并得出结论:“它遵循