ID号 5200100帽颜色红色含量2 x 1.25 ml密钥特征TAQ DNA聚合酶2X主混合物是一种现成的2X反应混合物,与AmpliQON TAQ DNA聚合酶,NH 4 +缓冲液系统,DNTPS,DNTPS和氯化镁存在。 每个反应需要25 µL 2倍主混合物。 只需将底漆,模板和水添加到50 µL的总反应量中,即可成功执行底漆延伸和其他分子生物学应用。 TAQ DNA聚合酶2X主混合物提供了几个优点。 设置时间大大减少。 消除了污染组件股票的机会。 减少试剂处理步骤可更好地可重复性。 可以信心设置标准测试,即结果每次都会保持一致。 TAQ DNA聚合酶2x主混合物(1.5 mm MGCL 2最终浓度)的组成Tris-HCl pH 8.5,(NH 4)2 S0 4,3 mm mgcl 2,0.2%tween。ID号5200100帽颜色红色含量2 x 1.25 ml密钥特征TAQ DNA聚合酶2X主混合物是一种现成的2X反应混合物,与AmpliQON TAQ DNA聚合酶,NH 4 +缓冲液系统,DNTPS,DNTPS和氯化镁存在。每个反应需要25 µL 2倍主混合物。只需将底漆,模板和水添加到50 µL的总反应量中,即可成功执行底漆延伸和其他分子生物学应用。TAQ DNA聚合酶2X主混合物提供了几个优点。设置时间大大减少。消除了污染组件股票的机会。减少试剂处理步骤可更好地可重复性。可以信心设置标准测试,即结果每次都会保持一致。TAQ DNA聚合酶2x主混合物(1.5 mm MGCL 2最终浓度)的组成Tris-HCl pH 8.5,(NH 4)2 S0 4,3 mm mgcl 2,0.2%tween。
neo Gold Taq DNA聚合酶是一种预混合的,可用的2x溶液,其中包含Anɵ体介导的热启动的NeotAQ DNA聚合酶,DNTPS,MGCL2,增强剂和稳定剂,用于有效的放大器。neo Gold TAQ DNA聚合酶可防止非特异性产物构造,并允许聚合酶链重新组合(PCR)在环境温度下进行,这是使用Anɵ体体修饰聚合酶实现的。
成分体积底物DNA 10 - 50 ng PHI29 DNA聚合酶反应缓冲液(10x)5 µl DNTPS 0.5 mm抗性的随机六聚体引物5 µM PHI29 DNA聚合酶1 µL(10 U)noclease nuclease nuclease free H 2 O(CAT。编号mb11101)最多50 µL 2。轻轻混合和脉冲。3。在30°C下孵育90分钟。4。在65°C下使酶灭活10分钟。5。继续下游应用程序,例如pCR(用TE缓冲液稀释10-20倍,使用1-3μL稀释的DNA或DNA标记。或者,将放大的DNA存储在-20°C下。避免重复的冻结循环
图 1. (A) 用于富集无错误 DNA 的受控反向链合成示意图。从左到右:来自不同来源的 DNA 可用作起始材料,如果尚未固定在固相上,则固定在固相上。使用高保真 DNA 聚合酶和在每个循环中提供预期的核苷酸,在 3' 端退火并延伸引物。所使用的核苷酸可以是可逆终止子、天然 dNTP 和/或不可逆终止子(组合),具体取决于预期的错误类型(参见正文)。受控反向链合成导致错误模板的滞后或过早终止,并使它们容易受到单链特异性酶消耗的影响
描述Titanium Taq是一种混合物,该混合物由缺乏5ʹ外核酸酶的TAQ聚合酶和Taqstart®抗体(一种单克隆抗体,在环境温度下抑制钛Taq。taqstart抗体提供自动热启动PCR。还包括了优化的缓冲液混合物(最终浓度为3.5 mm mgcl 2)和DNTP的纯化混合物(每种2.5 mm)。无RNase GC熔化试剂(5M)提高了PCR反应的特异性和产量,尤其是在使用具有高GC含量或复杂二级结构的模板时。该套件包含足够的试剂,可用于每个100μl的钛反应。钛DNA扩增试剂盒设计为与Affymetrix DNA映射产物一起使用(见表1)。
描述Titanium Taq是一种混合物,该混合物由缺乏5ʹ外核酸酶的TAQ聚合酶和Taqstart®抗体(一种单克隆抗体,在环境温度下抑制钛Taq。taqstart抗体提供自动热启动PCR。还包括了优化的缓冲液混合物(最终浓度为3.5 mm mgcl 2)和DNTP的纯化混合物(每种2.5 mm)。无RNase GC熔化试剂(5M)提高了PCR反应的特异性和产量,尤其是在使用具有高GC含量或复杂二级结构的模板时。该套件包含足够的试剂,可用于每个100μl的钛反应。钛DNA扩增试剂盒设计为与Affymetrix DNA映射产物一起使用(见表1)。
nzytaq II 2×无色主混合物是一种预混合的现成溶液,其中含有NZytaq II DNA聚合酶(MB354),属于新一代TAQ衍生的DNA聚合酶,优化了用于标准PCR应用的DNA聚合酶。主混合物含有最佳浓度的DNTP,反应缓冲液和添加剂,并支持最高6 kb的广泛的DNA模板的可靠和可靠放大。MGCL 2最终浓度为2.5 mm,允许实施各种PCR协议。对于高度敏感的下游应用,建议在随后的协议中使用前使用nzygelpure(MB011)净化放大的PCR产物。Nzytaq II DNA聚合酶缺乏3'→5'外切核酸酶活性。由此产生的PCR产品具有A-悬垂性,适用于NZYTECH的NZY-A PCR克隆试剂盒(MB053)或NZY-A-A快速PCR克隆试剂盒(MB137)。
Reagent/Material Vendor Stock Number Molecular grade H20 Sigma-Aldrich W4502 * GoTaq® G2 Colorless Master Mix Promega M7833 DNeasy® Tissue Kit Qiagen 69506 Agarose Sigma-Aldrich A9414 1kb+ DNA ladder Life Technologies 10787-018 SYBR SAFE DNA stain Life Technologies S33102 100% ETOH Gold Shield Chemicals DSP-CA-151 *GOTAQ®G2无色主混合混合物是一种预混合的现成溶液,其中含有GOTAQ®G2DNA聚合酶,DNTP,MGCL2和反应缓冲液,可在最佳浓度下以PCR有效地放大DNA模板。GOTAQ®G2DNA聚合酶表现出5´→3´外切核酸酶活性。gotaq®G2无色主混合物,2x:GoTaq®G2DNA聚合酶在2x无色GOTAQ®G2反应缓冲液(pH 8.5),400μMDATP,400μMDGTP,400μMDCTP,400μMDCTP,400μMDTTP和3MM DTTP和3MM MGCL2中提供。
特性 ALzyme-HSTaq 是一种重组耐热酶,在 dNTP 和引物存在下可催化 5'→3' 单链基质 DNA 合成。它具有 5'→3' 外切酶活性,但没有校正活性。ALzyme-HSTaq 可有效扩增长达 5 bp 的 DNA 片段。特定突变使该酶对血液、土壤、植物组织等中所含的某些抑制剂具有抗性。此外,ALzyme-HSTaq 具有脱氧核苷酸转移酶活性,因此相当一部分扩增的 DNA 分子在 3' 端带有突出的脱氧腺苷 (dA) 残基。热启动技术。该酶在 PCR 混合物混合条件下无活性,在初始变性步骤后被激活。ALzyme-HSTaq 浓度为 5 单位/µl。 100 微升酶(ZHSTaq-100)含有 500 单位,500 微升(ZHSTaq-500)含有 2500 单位。ALzyme-HSTaq-B 反应缓冲液为 ALzyme-HSTaq DNA 聚合酶提供最佳条件。
使用引物211F(5'-TTTTTTTTTTCTAGTAGATTAGATTGRTTTYAT-3')和210r(5'-cacCAACTCTTTAAAATATC-3'')(5'-TTTTTTTTTTATATAGATTTTYAT-3'')扩增了线粒体细胞色素C氧化酶亚基II基因(mtDNA Cox2)。聚合酶链反应(PCR)以25μl的体积进行,含有0.5μl的每种底漆10μm,3μl的MGCL2 25 mm(Promega,USA),5μL的5×缓冲液(Promega),0.5μlDMSODMSO DMSO 0.3 mm,0.3 mm,0.5毫米,0.3毫米,DNTS 10毫升,Dnts 10 mm,dnts dnts dnts dnts dnts dnts dnts dnts dnts dnnt dnts dnts dnnt。 GO-TAQ聚合酶(5 U/μL)(Promega)和2μL的总DNA模板,添加超纯水以达到最终体积。PCR时间温度条件如下:94°C持续3分钟(初始变性),然后在94°C下34个循环30 s(变性),46°C 60 s(退火),72°C 90 s(扩展),持续90 s(扩展),在72°C下以72°C的降低。PCR。(2014)。