出版日期:2025/01/28摘要:十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是蛋白质分析中的基石技术,可根据其分子量提供精确的蛋白质分离和蛋白质的表征。本综述提供了SDS-PAGE的全面概述,作为Western印迹分析的关键一步,重点讨论了其在营养研究和食品质量评估中的应用。本文强调了SDS-PAGE在识别和量化饮食蛋白,评估蛋白质修饰以及评估各种食品基质中功能蛋白的完整性中的作用。特别强调实验参数的优化,例如凝胶组成,样品制备和电泳条件,以确保在复杂的蛋白质混合物中高分辨率和可重复性。此外,该评论探讨了SDS-PAGE协议中最新的进步,包括提高检测灵敏度和与下游分析的兼容性。通过解决常见的技术挑战并提出最佳实践,这项工作旨在在食品和营养科学的背景下提高SDS-PAGE的可靠性和准确性,为其在蛋白质表征,过敏原检测和质量控制中继续使用铺平道路。关键字:SDS-PAGE;蛋白质表征;分子量分离;食品和营养科学;电泳优化。如何引用:Omogbolahan Samson Idowu; David Oche Idoko; Samuel O. Ogundipe;伊曼纽尔·门萨(Emmanuel Mensah)。(2025)。在营养研究和食品质量评估中优化SDS-PAGE以进行准确的蛋白质表征。国际创新科学与研究技术杂志,第10(1)期,1008-1045。 https://doi.org/10.5281/Zenodo.14744563。
Skelton MR,Saab C,Martini E,Benech H,Joudinaud T,Gaillard JC,Armengaud J,Hamoudi R. Dodecyl R. Dodecyl R. Dodecyl肌酸提高了认知功能,并识别了肌酸转运剂缺乏小鼠模型中的KIF1A和PLCB1(包括KIF1A和PLCB1)。前摩尔氏神经。2023 3月24日; 16:1118707。 doi:10 3389/f L 2023 1118707 C LL I 2023 PMID 37063368 2022 HAMMASH D,MAHFOOD M,KHODER G,AHMED M,TLILI A,TLILI A,HAMOUDI R,HAMOUDI R,HARATI R*。miR-623目标
图6用于尿β2-微球蛋白结合珠的免疫印迹,该珠子用抗β2-微球蛋白抗体固定的铜离子。Naito等人描述了用铜离子固定的珠子的制备。[26]。用磷酸盐缓冲盐水稀释10倍的尿素的二十微升珠子(PBS:150 mM NaCl,20 mM磷酸钠; pH 7.2)。将混合物在4°C旋转30分钟,然后在4°C下以16,000×g离心5分钟。颗粒珠3次。铜结合蛋白从珠子中释放出来,由十二烷基硫酸钠变性,然后受到十二烷基硫酸钠 - 聚丙烯酰胺凝胶电泳的影响,然后用抗-β2-微球蛋白抗体进行免疫印迹。箭头指示在尿素样品中检测到的三种不同类型的糖基化β2-微球蛋白。m表示标记蛋白。
缩写:AFM,原子力显微镜;冷冻em,冷冻电子显微镜; DLS,动态光散射; EV,细胞外囊泡; FTIR,傅立叶转化红外光谱; mRNA,Messenger RNA; mirna,microRNA; NGS,下一代测序; NTA,纳米颗粒跟踪分析; SDS-页,十二烷基 - 硫酸盐聚丙烯酰胺凝胶电泳; TRP,可调电阻脉冲传感。
03-0780-100G Lithium t-butoxide, 98+% 100g POR 1907-33-1 03-0780-25G Lithium t-butoxide, 98+% 25g POR 1907-33-1 03-0800-100G Lithium carbonate (99.999%-Li) PURATREM 100g POR 554-13-2 03-0800-25G碳酸锂(99.999%-Li)Puratrem 25G POR 554-13-2 03-0900-10G氯化锂水合锂(99.996%-LI)Puratrem 10G PORATREM 10G POR 16712-20-20-203-0900-50900-50G氯化液化液(99.996%-LIS-LITHIUM) 03-1000-25G锂环戊二烯,97%25G POR 16733-97-4 03-1000-5G环戊二烯锂,97%5G POR 16733-97-97-97-4 03-1150-1G,五甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基二烯二烯,锂。98%1G POR 51905-34-1 03-1150-25G戊二甲基环甲酰胺锂,最小。98%25G POR 51905-34-1 03-1150-5G五甲基甲基环甲基二烯二烯,最小。98%5G POR 51905-34-1 03-1180-1G十二烷基硫酸锂,最小。98%1G POR 2044-56-6 03-1180-5G十二烷基硫酸锂,最小。98%5G POR 2044-56-6 03-1200-25G锂六氟乙酸锂,最小。97%25G POR 18424-17-4 03-1200-5G Hexafluoroantimonate,Min。97%5G POR 18424-17-4 03-1250-25G六氟酸锂(v)(v)(99.9+% - AS)25G POR 29935-35-1 03-1250-5G锂锂hexafluoroaroaroaroaroaroarchate(v)
♦ 毛细管电泳 (CE) 是一种分离技术,利用施加的电压根据离子的电泳迁移率来分离离子。♦ 在毛细管凝胶电泳中,分子通过电流通过聚合物凝胶基质分离♦ 通过凝胶的运动基于分子的大小、形状和电荷♦ 十二烷基硫酸钠 (SDS) 使大多数蛋白质变性,并根据蛋白质的大小以相等的比例结合蛋白质,从而产生均匀的电荷质量比。
摘要通过使用十二烷基苯甲酸钠(SDBS)和十二烷基硫酸钠(SDS)作为碳糊电电子(CPES)的表面修饰剂(CPES),开发了一种选择性和敏感的方法,用于同时使用十二烷基苯甲酸盐(SDBS)和十二烷基硫酸钠(SDS)来确定多巴胺和尿酸的选择性和敏感方法。在较低的SDS和SDB浓度下,由于表面活性剂与CPE的石蜡的疏水链相互作用,它们在CPE表面形成负电荷的单层。在磷酸盐缓冲溶液中,SDS的表面活性剂的优化浓度为2 mm,SDB的SDB为1 mM(分别为0.1 m,pH 7和pH 6)。与普通CPE相比,用SD(CPE-SD)和用SDB(CPE-SDB)修饰的CPE显示出在0.230 V和0.230 V和尿酸(UA)的电化学反应改善,并在0.345 V时在0.345 V时,由于静电相互作用,由于静电相互作用,在静电相互作用且表面呈稳定的分析和表面上的静电量和表面均可分配为SD和SDESS和SDED的均匀分析。在最佳实验条件下,设计的电极对DA的线性响应从0.53μm到31.6μm,UA从5.95μm到118.97μm。在CPE-SD中发现DA和UA的检测极限为0.26和1.10 µm,而CPE-SDBS的检测限为0.22和0.22和0.38 µm。CPE-SDB和CPE-SD显示出良好的可重复性,可重复性,稳定性和高选择性,可确定血清血清样品中DA和UA。关键字:多巴胺,尿酸,碳糊电极,十二烷基硫酸钠,十二烷基苯甲酸钠
缩写:165t,位于165位的苏氨酸(突变体); A165,位于165位的丙氨酸(野生型); AAV,腺相关病毒; ACTB,β-肌动蛋白; Alt,丙氨酸氨基转移酶; AST,天冬氨酸氨基转移酶; ATF6,激活转录因子6; CHX,环己酰亚胺; CQ,氯喹; DBEQ,Dibenzylquinazoline-2,4-二胺; ECL,增强的化学发光; ERAD,内质网相关降解; FACL4,脂肪酸-COA连接酶4; GCKR,葡萄糖酶调节剂; GWAS,全基因组协会研究; HMARC1,人线粒体减少的组件1; IP,免疫沉淀; IRE1,内切核酸酶肌醇提高酶1; ITR,反向终端重复;妈妈,线粒体相关的膜; MARC1,线粒体减少氨基氧霉素的成分1; MASLD,代谢功能障碍相关的脂肪分裂肝病; Mboat7,包含7的膜结合的O-酰基转移酶结构域; MMARC1,小鼠线粒体减少的成分1; ORO,油红色O染色; PERK,蛋白激酶R样性内质网(ER)激酶; PNPLA3,含patatin样磷脂酶结构域的蛋白3; RTA,相对总丰度; Ru,相对单位; SD,标准偏差; SDS,十二烷基硫酸钠; SDS-PAGE,十二烷基硫酸钠 - 聚丙烯酰胺凝胶电泳; SEM,平均值的标准误差; TM6SF2,跨膜6超家族成员2; UBC,泛素C; UBE2E1,泛素结合酶E2-E1; UBE3EC,泛素蛋白连接酶E3C; UPR,展开的蛋白质反应; UPS,泛素介导的蛋白酶体(降解)系统; VCP,含勇气的蛋白质。
Skelton MR、Saab C、Martini E、Benech H、Joudinaud T、Gaillard JC、Armengaud J、Hamoudi R。十二烷基肌酸酯可改善认知功能,并在肌酸转运蛋白缺乏的小鼠模型中识别出包括 KIF1A 和 PLCB1 在内的关键蛋白质驱动因素。Front Mol Neurosci。2023 年 3 月 24 日;16:1118707。doi: 10 3389/fl 2023 1118707 C ll i 2023 PMID 37063368 2022 Hammash D、Mahfood M、Khoder G、Ahmed M、Tlili A、Hamoudi R、Harati R*。miR-623 靶点
利用放射免疫沉淀分析(RIPA)裂解缓冲液(Servicebio,武汉,中国)获得总蛋白。使用双辛可宁(BCA)分析(Solarbio,北京,中国)定量蛋白质浓度。加入上样缓冲液后,将样品煮沸 5 分钟。然后,将 20 μg 蛋白质添加到每个泳道中,通过 8–15% 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,然后转移到聚偏氟乙烯(PVDF)膜上,用 5% 脱脂奶粉在含有 0.1% Tween 20 的 Tris 缓冲盐水(TBST)中封闭 2 小时。将稀释的针对 OASL(1:1,000)和 3-磷酸甘油醛脱氢酶(GADPH;1:10,000)的一抗与膜在 4 ℃ 下孵育过夜。用TBST清洗10 min后,与相应抗体孵育2 h,再用TBST清洗膜3次,最后采用电化学发光法(ECL,Thermo,China)观察结果。
