(a) Prime Editor 活性报告基因 (PEAR) 的示意图。PEAR 的机制基于与 BEAR 相同的概念,并且包含相同的非活性剪接位点,如图 (a) 所示。PE 可以将“G-AC - AAGT”序列恢复为规范的“G-GT-AAGT”剪接位点。与 BEAR 不同的是,这里的 Prime 编辑发生在 DNA 的反义链上,因此,这种方法使我们能够将间隔序列定位在内含子内。这里,整个间隔的长度是可以自由调整的(显示为“N”-s)。剪接位点的改变的碱基显示为红色,编辑的碱基显示为蓝色。PAM 序列为深绿色,nCas9 为蓝色,融合的逆转录酶为橙色。
摘要:背景:为了应对与人脑的神经发生相关的心理健康问题和认知下降,该神经发生一直持续到生命的第十十年,但随着年龄的增长而被抑制糟糕的环境抑制,这项试验性研究调查了人类的公共卫生环境如何影响人类神经发生的公共卫生临床。这项试点研究的重点是人们将大部分时间和年龄花在适当的时间里,探索抑郁,焦虑和认知障碍对空间和生活方式变量的依赖性的依赖。方法:英格兰共有142名健康成年人完成了一项由PHQ-8,GAD-7和CFI问卷组成的调查,以及为捕捉空间和生活方式因素的差异,例如在家中度过的时间,房屋类型的布局复杂性,宽敞的复杂性,宽敞的活动,活动性,常规和空间的新颖性和持久性的孤独感。结果:在家中度过的大量时间对所有措施都有不利影响,而多层房屋的表现要比与体育活动和空间新颖性正相关的单层房屋更好。作为抑郁症差异的单独回归模型,这是最显着的因变量,并且与神经发生可靠相关,表明离开屋子解释了抑郁症状差异的20.5%。在房屋的规模上,多层房屋解释了16.5%的差异。这两个百分比都更接近孤独的影响,我们发现这可以解释抑郁症方差的26.6%。结论:建筑环境似乎与与神经发生相关的认知功能和心理健康症状的变化显着相关。这项试点研究表明了物理和社会富集的同样重要影响,为对公共卫生感兴趣的神经结构和脑健康研究提供了迫切需要的见解。
潜热存储系统用于将局部环境的温度保持在恒定范围内。该过程通过嵌入形状稳定剂的相应相变材料在冻结/熔化过程中释放/存储潜热来实现,形状稳定剂是使相变材料保持熔融状态的支架。在这项工作中,选择了高硅 ZSM-5 及其改性版本作为分子和聚合物相变材料(即月桂酸和聚乙二醇)的形状稳定剂,使用溶剂辅助真空浸渍进行浸渍。主要微孔类似物(母体 ZSM-5 及其酸处理衍生物)对每种相变材料的吸收率限制为 40%。相比之下,富含中孔的类似物(在碱性条件下形成)的月桂酸浸渍率达到 65%,聚乙二醇浸渍率达到 70%,且在 70 ◦ C 时无任何泄漏,导致每种复合材料的潜热分别为 106.9 J/g 和 118.6 J/g。一个简单的原型实际应用表明,制备的富含中孔的 ZSM-5 月桂酸和聚乙二醇复合材料在太阳能加热下可将其温度保持比周围环境低 27% 和 22%,而在太阳能加热停止时可将其温度保持高 20% 和 26%。所提出的研究结果表明,中孔富集提高了这些低成本、无毒沸石形状稳定剂对相变材料的吸收,因此使它们成为解决家庭环境加热/冷却过程中能量损失的隔离材料的良好候选者。
图1:具有外显子组2.5富集工作流程的Illumina®DNA准备以及完成每个步骤所需的时间。实心蓝色块表示甲板的孵化,白色块表示需要在Sciclone NGSX工作站上脱落热循环孵育的步骤。所有孵育均在Sciclone NGSX IQ Workstation上进行。手动完成(在固体绿色块中表示)。
阿尔茨海默氏病(AD)是一种神经退行性疾病,伴随着额叶皮层和海马的神经免疫性炎症。最近,已经记录了受广泛影响的大脑中细菌的存在,从而引发了人们对它们在AD相关神经炎症中的潜在作用的猜测。然而,受AD影响的人类大脑中细菌的表征尚无定论。这项研究旨在通过检查与AD相关的神经退行性区域(额叶皮层和海马)以及非AD-AD-相关下丘脑的脑组织来研究特定细菌和AD病理之间的潜在分析。采用16S rRNA基因测序,来自四个患有正常脑组织学(N)患者的30个后脑脑介绍样品,并分析了四名AD患者,以及三个空白对照。表征脑细菌的一种非常低的生物量,其整体结构主要由大脑区域而不是AD的存在描绘。虽然大多数分析的参数在N和AD组之间没有显示出脑细菌的显着区别,但在与AD相关的神经退行性区域中氯乙酰基诺曼斯的独特检测脱颖而出。此外,与牙周病原体相反,与牙周病原体相关的细菌在AD大脑中富含。这项研究的发现为细菌感染与AD神经炎症之间的潜在联系提供了宝贵的见解。
目标:本研究对三维(3D)培养方法在富集和分离乳腺癌干细胞(BCSC)中的功效进行了比较分析。该研究比较了在母质和悬浮液中生长的多细胞球体与常用的二维(2D)单层培养方法。方法:实验涉及9天3D多细胞球体培养物,然后使用两种乳腺癌细胞系进行24小时单层培养,即MCF7和MDA-MB-231。为了评估BCSC,该研究评估了包括CD44/CD24,Vimentin和Aldh1在内的各种表面标记的表达,以及多能干细胞基因(如SOX2,OCT4,KLF4和Nanog)。另外,测量了阿霉素的耐药性和从每种方法中得出的单个细胞的能力,以在无血清悬浮培养中形成球体。结果:研究结果表明,在悬浮液中生长的3D培养多细胞球体显示出干细胞标记物和阿霉素耐药性的显着增加。此外,这些球体在无血清培养基中形成具有超过50 µm的单细胞球体具有更高的能力。结论:总的来说,与2D单层和3D单基质甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基酯和3D Matrigel Meths相比,这种3D培养方法在悬浮液中具有增强的BCSC,具有增强的自我更新和增殖能力。因此,这种方法可以使用任何可用的BCSC隔离方法从细胞系中隔离BCSC的关键初步步骤。关键词:乳腺癌,抗癌性,癌症干细胞,阿霉素,3D培养
图1。高通量杂交捕获量的长基因组片段工作流程。 (a)高分子量(HMW)基因组DNA需要长片段的制备和富集。 (b)使用高通量兼容的G管将HMW DNA碎片至〜10 kb。 (c)使用特殊准备的尺寸选择珠通过尺寸选择去除多余的较小片段。 (d)尺寸选定的片段被最终修复(ER)A-Tail(AT),并将适配器连接到适配器序列,并带有样品识别条形码序列。 (e)样品池与XGEN自定义HYB面板杂交,并捕获并富集。 (f)富集的目标片段通过远程PCR扩增。 (g)放大的富集片段是第二次尺寸选择的或清理以进行最佳测序读取长度。 然后,富集和条形码的样品池接受所需的第三代测序工作流程。高通量杂交捕获量的长基因组片段工作流程。(a)高分子量(HMW)基因组DNA需要长片段的制备和富集。(b)使用高通量兼容的G管将HMW DNA碎片至〜10 kb。(c)使用特殊准备的尺寸选择珠通过尺寸选择去除多余的较小片段。(d)尺寸选定的片段被最终修复(ER)A-Tail(AT),并将适配器连接到适配器序列,并带有样品识别条形码序列。(e)样品池与XGEN自定义HYB面板杂交,并捕获并富集。(f)富集的目标片段通过远程PCR扩增。(g)放大的富集片段是第二次尺寸选择的或清理以进行最佳测序读取长度。富集和条形码的样品池接受所需的第三代测序工作流程。
寡核苷酸耦合的dynabeads™磁珠用于从生物样品中特异性捕获核酸靶标(图3)。在等离子体(400 µL最终体积)中峰于M13噬菌体的已知量(1.4x10^5 pfu)后,样品被液化,并通过杂交在寡聚偶联的珠子偶联物上捕获的释放的核酸靶标。然后从珠子中洗脱核酸靶标,并通过qPCR定量。当裂解/结合步骤仅在室温下长2分钟时,回收率约为25%,但是当裂解/结合时间增加到10分钟并在55ºC处发生时,恢复速率达到70%,表明根据捕获效率要求,测定条件可以调节(图4)。
智能辅导系统是解决大学教育教学和评估系统难题的绝佳人工智能 (AI) 替代方案。它通过采用 AI 技术评估学生的表现并丰富各种教学策略,体现了当前系统的范式转变。与普通课堂上老师必须控制 30 到 50 名学生不同,老师必须监控数百名学生,这非常困难且令人精神疲惫。在这种情况下,仅靠导师或老师不足以监控学生并为每个学生提供最佳的关注和照顾。需要一种新颖的方法来促进可靠且灵活的大学生监控系统方法。该系统应该能够评估许多学生的表现,预测最终成绩,并实时制定智能决策。多种基于计算机的 AI 模型正在逐渐在教学和学生成绩评估中发挥重要作用。本文提出了一种新策略来说明应用 AI 技术预测学生最终成绩的优势。验证过程是在 2018-2019 学年期间使用计算机科学学士学位 12 门核心课程和 18 门选修课程的 1000 名学生的实时数据集进行的。本文提出了一种带有模糊专家系统的混合 SVM,以展示该技术在教学和学生最终成绩预测方面的熟练程度以及未来工作的可能性。
‡ 通信地址:aashiq.kachroo@concordia.ca 关键词:基因组工程、CRISPR-Cas9、人源化酵母、蛋白酶体 缩写:CFU、菌落形成单位;DSB、双链断裂;HDR、同源定向 DNA 修复;HR、同源重组;CELECT、基于 CRISPR-Cas9 的选择以丰富基因型;MERGE、无标记富集和重组基因工程位点;SGA、合成遗传阵列
