MGI Tech推出了一系列基于DNBSEQ技术的新NGS设备。对于不同类型的测序文库而言,这些序列据报道这些序列仪的准确性相似或精确度略低。但是,根据T7 Sequencer的情况,它们每天更具成本效益,并且每天达到约6 TB的数据。这些原因为MGI测序仪在基因组学领域中广泛使用铺平了道路,因此鼓励开发可以分析此类数据的软件。MGI序列器输出带有不同读取标题和文件命名的大型FastQ文件,而不是Illumina输出。单端的配对末端或正向读取(R1)的反向读取(R2)的末端是包含样本索引(i7和i5)和唯一分子标识符(UMI)的读取条形码。这些索引用于删除数据,即将读取分配给相应的样本。MGI Tech已将SplitBarcode工具1发布给Demultiplex MGI FastQ。但是,该工具无法识别数据中的UMIS,也没有解决不同标头和文件命名格式的问题,这些格式可以由Illumina基于Illumina的工具所需的问题。此外,它要求用户知道在读取条形码中找到索引的前期,并且不支持同一运行中的多个库。Mgikit用Rust编程语言写。可以在工具网页上获得综合文档和用户指南https:// sagc- bioinformatics.github.io/mgikit/。在此申请注释中,我们提供了一个软件套件的Mgikit,以消除MGI FASTQ数据,检测条形码模板并生成可以通过mgikikit-multiqc插件转换为html报告的反复材料和质量报告工具[1]。
请注意,生成 FASTQ 分析模块 v3.1.0 需要本地运行管理器框架 v3.0 或更高版本,并且与本地运行管理器框架 v2 或更低版本不兼容,而生成 FASTQ 分析模块 v2.1.0 需要本地运行管理器框架 v2,并且与本地运行管理器框架 v3.0 或更高版本不兼容。
摘要 - BioInformatics应用程序通常需要根据其与特定序列目标的相似性过滤FastQ测序读取,例如消除与特定病毒相关的污染或隔离读取。尽管基于对齐的方法对这些任务有效,但它们表现出降低的灵敏度并可能引入高估,尤其是在面对较低的相似性搜索时。在本文中,我们使用一种新颖的无对齐方法来过滤FASTQ根据定义的相似性阈值读取。与基于对齐方式的方法不同,即使在相似性较低的方案中,例如在古代DNA中,我们的方法也保持较高的灵敏度。此外,我们的方法是基于压缩的,可以减轻其他方法固有的高估风险。我们在各种应用程序中演示了我们方法的多功能性,并提供了一种称为磁铁的公共开源物。磁铁提供了用于加速处理的多线程功能,并且可以在https://github.com/cobilab/magnet上自由访问。索引项 - 数据压缩,生物信息学,计算生物学,测序读取,数据滤波器
概述. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8 从 BAM 中提取 UMI. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8 执行适配器修剪和质量过滤. . . . . . . . . . . . . . 9 从 FASTQ 文件中选择读取的子样本. . . . . . . . . . . 10 将读取映射到参考基因组. . . . . . . . . . . . . . . . . 10 将 UMI 信息添加到 BAM 中的读取. . . . . . . . . . . . . 11 识别和分组来自同一源分子的读取. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15 将共识读取映射到参考基因组. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20 注释变体. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 21 VCF 到表格. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 21 纵向突变分析. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22 生成背景面板和阻止列表 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29 计数光学重复. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ...
CellRanger MkFastq:Illumina Bcl2fastq的包装器,将Illumina BCl文件和Exultiplex取用到FastQS,如果您已经从FastQ文件开始,则可以跳过此步骤,然后直接继续运行CellRanger Count。
•从BAM,SAM或FASTQ文件(任何变体)导入数据•提供快速概述以告诉您哪些领域可能存在问题•摘要图和表快速评估您的数据•将结果导出到基于HTML的永久性报告•离线运行•允许自动生成的报告无需运行
方法,将来自摩洛哥栽培树的单叶用于本研究。DNA提取。根据制造商的说明,使用Illumina Truseq套件构建了配对的测序库。该库是在配对端,2×150bp格式的Illumina Hi-Seq平台上进行排序的。用三件v0.33(Bolger,Lohse和Usadel 2014)修剪了所得FASTQ文件的适配器/引物序列和低质量区域。修剪序列由黑桃v2.5组装(Bankevich等人2012)随后使用Zanfona V1.0(Kieras 2021)进行完成步骤,以基于相关物种中保守的区域加入附加的重叠群。
原始测序数据以POD $,FASTQ和BAM格式为单位。基本符号是在测序过程中实时在POD9文件上进行的,以使用牛津纳米孔技术提供的预训练模型来确定基本身份。默认模式的基本模式为HAC(高精度),但是其他模式也可用(例如,SUP超级准确性和双工; https://nanaporetech.com/platform/accuracy)。可以启用修改的基本调解来捕获表观遗传基础修改,该修改仅存储在BAM文件(不协调)中。我们还提供了针对条形码数据的脱氧化。所有数据都可以上传到创建(https://docs.er.kcl.ac.uk/)。