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具有GAPDH参考基因的新型实时PCR，用于反刍动物
摘要：Peste des Petits反刍动物（PPR）是一种严重的急性，高度传染性的疾病，是由Peste des Petits反刍动物病毒（PPRV）引起的。本研究旨在建立具有内部扩增对照的QRT-PCR测定，以快速准确地检测PPRV。PPRV N的引物和探针基于中国PPR诊断技术的国家标准，设计了一对引物和TAQ MAN探针，用于设计甘油醛-3-磷酸盐脱氢酶（GAPDH）的参考基因。进行了反应条件，特异性，灵敏度和可重复性测试以及临床样本检测的优化。结果表明，对于参考基因GAPDH的最佳引物和探针浓度分别为0.4μmol/L和0.4μmol/L，分别为0.4μmol/L和0.2μmol/L。已建立的方法与其他病毒没有交叉反应。PPRV的最小检测极限为6.8副本/µl，GAPDH的副本为190份/µL。PPRV和GAPDH的变异系数（CV％）都低于2％。结果表明，包含内部参考基因的PPRV QRT-PCR方法具有很强的特异性，高灵敏度和良好的可重复性。添加用于样品质量控制的内部参考基因可提高检测的准确性。
表Si。乳腺癌免疫疗法及其结果的完整临床研究清单。1个表Si。逆转录中使用的引物 - 3'）鼠标-GAPDH f1个表Si。逆转录中使用的引物 -3'）鼠标-GAPDH f
Mouse-GAPDH F: GGTTGTCTCCTGCGACTTCA R: TGGTCCAGGGTTTCTTACTCC Mouse-IL-6 F: AACCACGGCCTTCCCTACTT R: TCTGCAAGTGCATCATCGTTGT Mouse-CXCL2 F: ACTGAACAAAGGCAAGGCTAACT R: ACATAACAACATCTGGGCAATGG Mouse-HMOX1 F：ccagacaccgctcctccagt r：ccaggcaagattctcctctccttacag鼠标 - slc7a5 f：tggagtgtgtggcattggcattggcttc r：agagcaccgtcaccacagagaagagattnfaip3 Aggagccaggaagtaatcaagaa r：GCTAGAGATAGCAGGGCAGGT F，前向； R，反向。