总之,我们这里有农田,可以实现 80% 的自给自足,有机地养活我们自己,如果我们做到了,那么在未来 20 年里,土壤中储存的碳足以抵消我们 25% 的温室气体排放,到那时,我们现在种植的树木将承担大部分繁重的工作。因此,该行业的净零排放是可以实现的。这还可能导致超过 2 亿英镑的食品支出在当地经济中流通,因为商店支付给农民,农民支付给工人,工人支付租金和购买牛奶等。我们使用本地乘数 2.5 来计算在当地食品上花费的 10 英镑的价值(即 10 英镑在当地变成 25 英镑的价值),而目前的食品系统的乘数为 0.25,(即 10 英镑变成 2.50 英镑留在当地,7.50 英镑离开该地区用于支付商品、运输、包装等)。
背景:CHO 细胞是生产生物制药的首选,而基因组编辑技术为提高重组蛋白产量提供了机会。靶向凋亡相关基因,如 Caspases 8 相关蛋白 2 (CASP8AP2),可提高 CHO 细胞的活力和生产力。将强大的策略与 CRISPR-Cas9 系统相结合使其能够应用于 CHO 细胞工程。目标:本研究旨在开发一种经济有效的方案,使用 CRISPR-Cas9 系统结合 HITI 策略同时在 CHO 细胞中缺失/插入 CASP8AP2 基因,并评估其对细胞活力和蛋白质表达的影响。材料和方法:我们通过将 CRISPR/Cas9 与 HITI 策略相结合,开发了一种有效的 CHO 细胞工程方案。使用 CHOPCHOP 软件设计了两个不同的 sgRNA 序列以靶向 CASP8AP2 基因的 3' UTR 区域。使用经济高效的 PEI 试剂将 gRNA 克隆到 PX459 和 PX460-1 载体中,并转染到 CHO 细胞中。采用手动选择系统简化单细胞克隆过程。MTT 测定评估 24、48 和 72 小时的基因沉默和细胞活力。流式细胞术评估 CASP8AP2 沉默的 CHO 细胞中的蛋白质表达。结果:研究证实了将 CRISPR-Cas9 与 HITI 策略相结合的稳健性,在产生敲除克隆方面实现了 60% 的高效率。PEI 转染成功地将构建体传递给近 65% 的克隆,其中大多数是纯合的。该方案被证明适用于资源有限的实验室,只需要倒置荧光显微镜。 CASP8AP2 敲除 (CHO-KO) 细胞经 NaBu 处理后,与 CHO-K1 细胞相比,其细胞存活率显著延长,48 小时时的 IC50 值分别为 7.28 mM 和 14.25 mM(P 值:24 小时 ≤ 0.0001,48 小时 ≤ 0.0001,P 值:72 小时 = 0.0007)。与天然细胞相比,CHO CASP8AP2 沉默细胞的 JRed 表达增加了 1.3 倍。结论:使用 CRISPR-Cas9 和 HITI 策略有效改造 CHO 细胞,同时进行 CASP8AP2 基因缺失/插入,从而提高细胞存活率和蛋白质表达。
•男性:雄鹿•女性:DOE•年轻:幼崽•发情:每4天自发循环,持续8-26小时。产后发情(分娩后约24小时。泌乳结束时发情的复发。• Gestation : 15 days • Birth weight : 2g • Size of litter : 5 - 10 on average • Stage of development at birth : Young are born blind and hairless • Eyes open : 10 - 15 days • Weaning age : 21 days • Breeding Age : Female 6 - 10 weeks Male 10 – 14 weeks • Adult weight : 100 – 200 g • Breeding life of female : 12 months • Breeding life of male : 18 months • Life expectancy : 1.5-2 years on average • Rectal temperature: 38 °C冬眠•心率:276-425节每分钟•呼吸速率:每分钟100 - 250次呼吸•叙利亚仓鼠的侧面有双侧色素皮脂腺,在男性中更为突出。
廉价的Covid-19(冠状病毒疾病)的摘要口服输送疫苗可以显着提高免疫率,尤其是在低收入和中等收入国家。先前,我们描述了一个潜在的通用covid-19 vacin,RLVS D CAPB /MN,包括复制细菌载体,LVS(活疫苗菌株)D CAPB,表达高度保守的SARS-COV-2(严重的急性呼吸道呼吸道呼吸道合成型甲状腺囊状2)膜的膜和核的蛋白质(n)蛋白质(n)构成蛋白质(N)构成蛋白质,构成蛋白酶素,在鼻内,在高剂量SARS-COV-2呼吸道挑战之后,可以保护仓鼠免受严重的COVID-19类样疾病。在这里,我们表明疫苗的口服管理还可以防止大剂量SARS-COV-2呼吸挑战;它的保护与皮内,鼻内或皮下施用相当。仓鼠可免受严重的体重减轻和肺部病理的保护,并减少了口咽和肺病毒滴度。在小鼠中诱导脾脏和肺细胞干扰素γ响应于N蛋白刺激的疫苗的疫苗的保护和组织疫苗的保护症在hamsters中与hamsters相关,该仓鼠具有挑战前的抗semange se- thellenge secom and th1偏置抗NTh1偏置的IgG(IgG2/3)。因此,RLVS D CAPB /MN具有口服统一COVID-19疫苗的潜力。
电池储能对于提供经济实惠的清洁能源至关重要,同时还能提高英国电网的可靠性。Hams Hall 站点拥有 350 兆瓦的输电网络连接,能够为大约 12 万户家庭提供能源。经批准的设计允许部署超过 1,750 兆瓦时的电池储能。Hams Hall 项目预计将提供广泛的服务以支持英国电力系统,包括可能持续更长时间的服务,持续时间可能超过五小时。
Felicity C. Stark 1,Akache Bassel *1,1 1 1,Anh Tran 1,Mathew Stuible 1,Yves Ducher 1,5 Michael J. McCluskike 6 Makinen 1,Joseph 2,David 7 Zarley 7,Terrence R.8
简介 在哺乳动物细胞系中产生有利的基因组特征是基因功能研究极为宝贵的策略之一。1,2 基因组编辑主要通过使用传统方法进行,例如 RNA 干扰 3,4 和同源重组。然而,除了染色体 DNA 的自发裂解之外,所需突变体的频率低和特异性低导致了位点特异性核酸酶的发明。最近,成簇的规律间隔的短回文重复序列 (CRISPR)/CRISPR 相关 (Cas) 系统为在特定基因组位点快速有效地进行基因编辑打开了一扇有希望的窗口。5,6 CRISPR/Cas9 系统由两个组件组成:向导 RNA (gRNA) 和 Cas9 蛋白。Cas9 蛋白的核酸酶活性可在任何被 gRNA 识别的基因组区域中诱导 DNA 双链断裂 (DSB)。该 gRNA 必须伴随目标基因座中相邻的原间隔基序 (PAM) 序列。7,8 NGG 是化脓性链球菌 Cas9 (SpCas9) 的 PAM 序列,是最