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SiR-DNA/SiR–Hoechst诱导的染色体...
SiR-DNA/SiR – Hoechst 是一种远红荧光 DNA 探针，常用于对间期细胞核和有丝分裂期间的染色体进行活细胞成像。尽管有报道称 SiR-DNA 会引起 DNA 损伤，但它已在 300 多篇研究文章中使用，涵盖有丝分裂、染色质生物学、癌症研究、细胞骨架研究和 DNA 损伤反应等主题。在这里，我们使用活细胞成像对 SiR-DNA 对四种人类细胞系（RPE-1、DLD-1、HeLa 和 U2OS）有丝分裂的影响进行了全面分析。我们报告了 SiR-DNA 对染色体分离的剂量、时间和光依赖性影响。我们发现，在成像过程中暴露于光线下时，纳摩尔浓度的 SiR-DNA 会诱发非着丝粒染色体缠结，严重影响后期姐妹染色单体分离和纺锤体伸长。这会导致 DNA 损伤，并传递到下一个细胞周期，从而对基因组完整性产生不利影响。我们的研究结果突出了使用 SiR-DNA 研究晚期有丝分裂事件和 DNA 损伤相关主题的缺点，并敦促使用替代标记策略来研究这些过程。
新型磷酸酶NUDT5是三阴性乳腺癌生长的关键调节剂
将细胞周期同步48小时，使用1 M甲氯酸酯释放细胞24小时。根据制造商的说明，我们使用了溴脱氧尿苷（BRDU）检测试剂盒（Roche细胞增殖ELISA，BRDU（化学发光）套件）。DRAQ7™（ABCAM，AB109202）添加到细胞中。HOECHST（Hoechst（Thermo Fisher Scientific™，Hoechst 33342溶液，Waltham MA）根据制造商的建议来对抗染色核。使用ImageXpress®PICO显微镜（Molecular Devices，San Jose，CA）对染色的细胞进行成像，并使用CellReporterXpress图像采集和分析软件进行分析。根据制造商的建议，使用了膜联蛋白V-PI（Invitrogen，Annexin v-Fitc结合物，Waltham MA）凋亡测定法，并通过流量
curriculum vitae harald Berchtold（菲尔·纳特博士）
05/1989 – 12/1992 Protein Crystallography Hoechst AG, Frankfurt, Research Team Rolf Hilgenfeld 01/1993 – 04/1994 Lab Head Protein Crystallography, Hoechst AG, Frankfurt am Main 05/1994 – 12/1996 Group Head Protein Crystallography, Hoechst AG with worldwide responsability 08/1996 Invited Talk and旧金山南旧金山的科学交流访问01/1997 - 12/1998 Leitender Angestellter和晋升为“运营经理” Hoechst Marion Roussel核心研究功能与生物技术（〜200 Associates，〜25 Mio.€opex＆〜5 mio.€capex管理）与Seibert教授，Peter Hammann博士教授，Timm-H博士。 Jessen（1997）和Bernd Kirschbaum博士（1998）01/1999 - 12/2004全球药品开发负责人法兰克福固态平台01/2005 - 12/2010促进副总监和分析服务集团副总监和副总监2007-2020注册的“ Leiter der Quilitium der Quilitium derQualitätskontskontskontskrolle”regiersprästrunngsträungsrunngsträtarsthungsträungsträungsträungsträungsthoung'regier'Regier'' 06/2020 SANOFI全球分析科学专利专利11/2011 - 06/2020潮汐分析技术团队负责
果蝇睾丸中Mitf/TFEB的减数分裂活性随年龄增长而下降
诱导 GFP 表达。C、D. 成年年轻果蝇睾丸中的 DNA（Hoechst）和 4Mbox-GFP（Mitf 活性报告基因）的代表性图像。D 中勾勒出了 C 中精原细胞和精母细胞的放大区域。C 中勾勒出了囊细胞核。DE 中的虚线标出了有丝分裂到减数分裂的转变。对成年年轻雄性有丝分裂精原细胞（n = 10 个睾丸中的 50 个精原细胞）和减数分裂精母细胞（n = 10 个睾丸中的 50 个精母细胞）中 4MBox-GFP 强度的量化。平均值 ± SD p < 0.0001，Mann-Whitney U 检验。 F. 量化年轻男性（n =60 个精母细胞，来自 12 个睾丸）和老年男性（n =80 个精母细胞，来自 16 个睾丸）精母细胞中 4Mbox-GFP 强度。平均值 ± SD p < 0.0001，Welch t 检验。G. 年轻和老年男性精母细胞中 DNA（Hoechst）和 4Mbox-GFP（Mitf 活性报告基因）的代表性图像。H. 量化年轻男性（n =60 个精母细胞，来自 12 个睾丸）和老年男性（n =65 个精母细胞，来自 13 个睾丸）精母细胞中 VhaSFD-GFP 强度。平均值 ± SD p < 0.0001，Welch t 检验。I. 年轻和老年男性精母细胞中 DNA（Hoechst）和 VhaSFD-GFP 的代表性图像。条，20 µm。
ROS 介导的 EGFR 靶向纳米二氧化铈的抗癌作用
图 7 FITC 标记的 EGF-纳米粒子（绿色）的共聚焦成像，显示 HT-1080 细胞的细胞摄取（蓝色：Hoechst）（每个时间点：顶行 = 20 X，底行 = 63 X；比例尺：20 μ m [20 X] 和 10 μ m [63 X]；20 X 和 63 X 图像是在不同的视野 (FoV) 下拍摄的，因此每个细胞中的纳米粒子密度不能直接比较）。EGF，表皮生长因子；FITC，荧光素-5-异硫氰酸酯。
激酶抑制剂的动力学结合和K
图1：检测与SARS-COV-2病毒感染相关的宿主细胞蛋白和基因。a-f：人类胚胎干细胞衍生的心肌细胞（HESC-CMS）（上）和代表性的荧光图像（n = 6个不同的供体的六个不同供体）人类左心室（人LV）组织（人LV）组织（下部）（下）（下）（下）（下）（下）（下）（下）（下）（n = 6），对人类干细胞衍生的心肌细胞（HESC-CMS）（hESC-CMS）（HESC-CMS）（HESC-CMS）（HESC-CMS）（HESC-CMS）（HESC-CMS）（HESC-CMS）（HESC-CMS）（HESC-CMS）（HESC-CMS）进行了代表性荧光共焦图像（n = 3个独立的实验）。用4％甲醛固定细胞和组织，并用针对ACE2（a），TMPRSS2（b），B0AT1（C），Catherepsin B（d），Catherepsin l（e）和Furin（f）的原代抗体进行免疫标记，并与二次抗体conjugody Conjugy conjugugy conjugugy（f） 33342核标记（蓝色）。g：显示仅用二抗和HOECHST 33342核标记处理的对照细胞（上）和组织（下部）。比例尺显示50μm。h：图形数据显示了观察到的hESC-CM种群在可视化后（背景）呈阳性免疫标记的百分比，其靶向针对概述的蛋白质靶标产生的初级抗体的二抗。i：图形数据显示了hESC-CMS中病毒输入和加工基因表达的百万读数（rpm）±SEM（n = 7在三个不同的区分中重复）和人lv（n = 5个个体）。SLC6A19，CTSB和CTSL分别是编码B0AT1，组织蛋白酶B和组织蛋白酶L的基因。
柠檬醛在乳腺癌多细胞肿瘤球体（MTS）中的靶向潜力
简介：由于乳腺癌的高发性在全球范围内产生了深远的影响，迫切需要改善患者的临床结果，包括努力利用生物活性天然产物作为治疗或预防措施。据报道，柠檬醛（柠檬草精油）对乳腺癌细胞系具有细胞毒性。本研究的目的是确定柠檬醛靶向乳腺癌细胞中醛脱氢酶阳性（ALDH +）细胞的能力。方法：在无血清培养基中培养 MCF-7 和 MDA-MB-231 细胞以产生多细胞肿瘤球体，以评估柠檬醛作为抗增殖剂的作用。用已确定的 IC 50（分别为 50±4.30 µM 和 56±3.17 µM 的柠檬醛）处理细胞以研究柠檬醛的细胞毒性。使用碘化丙啶 (PI) 和 Hoechst 33342 进行染色以确定细胞增殖和活力。最后，通过 ALDEFLUOR 测定法对 ALDH+ 细胞进行量化。通过方差分析 (ANOVA) 和独立 t 检验进行差异分析，p<0.05 被认为具有统计学意义。结果：用柠檬醛处理后，两种癌细胞系中的球体尺寸均减小。PI 和 Hoechst 33342 染色还显示柠檬醛产生了正常细胞和正在发生凋亡和坏死的细胞混合物。ALDE FLUOR 测定法分析显示柠檬醛显着 (p<0.05) 抑制了 MCF7 细胞中 ALDH+ 细胞的数量。结论：证明柠檬醛通过抑制 ALDH 活性减少了 MCF7 乳腺癌球体中的 ALDH+ 细胞群。
●在与多种肿瘤类型的完整PDO队列中，我们观察到对SOC疗法的一系列反应，提供了一个更好地理解
在细胞外基质 +化学定义的培养基中，将患者肿瘤组织样品培养为肿瘤器官。PDO被鉴定为Hoechst阳性细胞簇，使用荧光活力染色单独确定每个PDO的活细胞的数量。药物筛查用每种化合物3剂进行3剂，并计算出TO-PRO-3活细胞测量曲线下的反向面积以量化响应。tempus XT和整个转录组测定法用于在器官和配对的患者肿瘤上执行NGS（如果有）。通过我们的标准管道处理所得数据，以识别可靶向突变，新抗原，CNV和融合。
敏感的氟化计检测芬太尼级代理 -
摘要：合成阿片类药物，尤其是芬太尼及其类似物的出现导致了阿片类药物滥用的流行，导致美国过量死亡的大幅增加，从而对公共卫生和安全构成威胁。用于检测芬太尼及其类似物的当前方法在其敏感性，可伸缩性和可移植性方面具有显着的缺点，这些方法限制在更广泛的规模或基于现场的应用中。需要在复杂混合物中检测痕量的芬太尼，以及新的芬太尼类似物的持续出现，进一步使这些检测工作更加复杂。因此，迫切需要开发方便，快速和可靠的传感器来检测芬太尼。在这项研究中，我们基于荧光团（HOECHST 33342）的竞争位移开发了一种荧光传感器，该荧光团（Hoechst 33342）是从超分子大环（Cucurbit [7]尿液）的腔中，并从石墨烯量子点中进行了随后的荧光猝灭。该传感器可以检测和量化少量的芬太尼以及58个芬太尼类似物，包括检测到越来越关注的carfentanil等高效剂。此外，即使在存在共同干扰物的情况下，传感器即使在0.01 mol％时也可以选择性检测这些药物。此外，该传感器在几秒钟内提供结果，并随着时间的推移提供稳定的性能。因此，这种简单，快速，可靠，敏感和具有成本效益的传感器为检测芬太尼类中的药物提供了一种有价值的工具，尤其是在提高基于现场的检测方面对执法和军事人员促进公共安全方面的有效性。