产品描述Zymobiomics™RNA MiniPrep套件设计用于从各种样品输入(例如,粪便,土壤,植物,水,水和生物膜)中纯化RNA,可用于微生物组或元基因组分析。Zymobiomics™创新裂解系统消除了与不同生物体(例如,革兰氏阴性/阳性细菌,真菌,原生动物和藻类)的不平等裂解效率相关的偏差。提供的DNA/RNA Shield™在环境温度下保留核酸,提供了样品的无偏分子快照。该过程使用Zymo-Spin™色谱柱技术,可导致高质量的总RNA(包括小/microRNAS 17-200 nt),没有PCR抑制剂(例如,多酚,腐殖醇,腐殖质酸和Fulvic Acids),可以用于RT-PCR,阵列,测序等,等等。
1推荐:用于富含蛋白质的样品(例如,组织,血细胞等)存储在DNA/RNA Shield™中(#R1100,分别出售),蛋白酶K处理可以使用蛋白酶K集(#D3001-2-5,#D2001-2-20;单独出售)和PK消化缓冲液(#R1200-1-5,#R1200-1-5,#R1200-1-20),#R1200-1-20,见9。2产量可能会有所不同。3血液的产量可能会根据收集,样本制备,供体,年龄和/或健康状况而变化。
•有关血液,唾液和收集到Guthrie,FTA®和其他存储纸(卡)的细胞(卡),请参阅收集到存储纸/卡上的样品(pg。16)。•对于从血清/血浆样品中分离的病毒DNA,请遵循生物流体和细胞工作流程。不建议从血清/血浆中分离出无细胞的DNA。对于从血清/等离子体中分离出的小的,无细胞的DNA,请使用快速-CFDNA™血清和等离子体试剂盒(D4076)。•将细胞和/或无细胞的DNA从40 ml尿液样品中分离出来,请参见Quick -DNA™尿液试剂盒(D3061)。用于尿液中的细胞DNA,在3,000 x g处的颗粒15分钟,并在使用生物流体和细胞工作流程加工前去除上清液。哺乳动物/昆虫细胞培养物:从≤5x 10 6细胞中分离出总DNA,例如HELA细胞,HEK-293细胞,果蝇细胞系等。
• 样本来源 — 从 ≤ 200 mg 的哺乳动物粪便、≤ 250 mg 的土壤和 50 – 100 mg(湿重)的细菌/真菌细胞 2、生物膜和水 3 中有效分离细菌(包括内生孢子)1、真菌、原生动物、藻类、病毒、线粒体和宿主 DNA。• 珠磨系统 — 创新的 ZymoBIOMICS™ 裂解系统可以完全均质化/破坏微生物细胞壁,并准确进行微生物 DNA 分析,无偏差。为确保无偏差裂解,建议使用 ZymoBIOMICS™ 微生物群落标准(见附录 C)校准每个珠磨设备。• DNA 纯度 — 用 ZymoBIOMICS™ 无 DNase/RNase 水洗脱高质量、无抑制剂的 DNA,适用于所有下游应用,包括 PCR 和下一代测序。
产品描述Quick-DNA/RNA™病原体微型套件是从多种载体(蚊子,跳蚤,tick虫等)的病原体(病毒,细菌,原生动物)DNA和RNA的自旋柱纯化的和组织类型(哺乳动物,鸟类等)收集,运输并存储在DNA/RNA Shield™中。DNA/RNA Shield™用于病原体的核酸保存和灭活。该套件具有存储/裂解缓冲系统,可以与高密度ZR BashingBead™裂解管(*建议)结合使用,以促进难以溶解样品的完全均质化,以进行有效的核酸隔离。小(> 50 nt)和大(> 200 kb)的DNA和RNA与色谱柱结合,洗涤然后洗脱。分离的高质量核酸适用于所有下游应用,例如下一代测序,基于杂交和RT/QPCR检测。
• 样本来源 – 任何细胞(动物、细菌、血细胞等)、所有组织(难裂解、FFPE 等)、血液、生物体液、酶反应(例如,经 DNase I 处理的)和 DNA/RNA Shield ™ 或其他保存试剂中的样本。 • 样本保存和灭活 – DNA/RNA Shield ™ 可裂解细胞、灭活核酸酶和传染因子(例如,病毒、病原体),是常温下样本安全储存和运输的理想选择(第 11 页)。 • 大小 – 基因组 DNA(≥ 40 kb)、线粒体和病毒 DNA(如果存在)以及包括小/microRNA(≥ 17 nt)在内的总 RNA。
产品说明Zymobiomics™DNA/RNA MiniPREP试剂盒设计用于从多种样品输入中纯化DNA和RNA(例如粪便,土壤,植物,水和生物膜),可用于微生物组或元基因组分析。Zymobiomics™创新裂解系统消除了与不同生物的不平等裂解效率相关的偏见(例如,革兰氏阴性/阳性细菌,真菌,原生动物和藻类)。提供的DNA/RNA Shield™在环境温度下保留核酸,提供了样品的无偏分子快照。该过程使用Zymo-Spin™色谱柱技术,可导致高质量的DNA和总RNA(包括小/microRNA 17-200 nt),该技术不含PCR抑制剂(例如多酚,腐殖质和富毒酸),可以用于RT-PCR,阵列,测序等。
质粒DNA的产率和质量受质粒拷贝数,质粒大小,插入毒性,宿主应变,抗生素选择,生长培养基和培养条件的影响。对于大肠杆菌的标准克隆菌株,我们建议使用新鲜条纹的选择板中的单个菌落来接种标准的生长培养基,例如LB(Luria-Bertaini)培养基。培养物通常在37°C和200-250 rpm的血管中生长,该容器允许曝气(Erlenmeyer烧瓶或滚筒上的Erlenmeyer烧瓶或培养管),并在12-16小时后收获,因为培养物从对数生长到固定相的培养过渡。这是质粒DNA含量最高的时间。LB中的培养物通常在3-6之间的最终OD 600中饱和,但生长至饱和度通常会导致细胞裂解。结果,质粒的产量和质量降低,并增加不需要的宿主染色体DNA的可能性增加。使用丰富的培养基(例如2x YT或TB)在较短的时间内会产生更高的生物量。如果选择用于生长,则应对准备中使用的培养时间和细胞数量进行调整以纠正这些差异,并避免矩阵过载并降低DNA的产量和质量。
H302 + H332如果吞咽或吸入有害。H315引起皮肤刺激。H319引起严重的眼睛刺激。H334如果吸入,可能会导致过敏或哮喘症状或呼吸困难。H317可能引起过敏性皮肤反应。P280戴防护手套/防护服/眼部保护/面部保护。 p284 [如果通风不足,呼吸保护。 P301 + P312如果吞咽:如果您感到不适,请致电毒药中心/医生。 p304 + p340如果吸入:将人移至新鲜空气并保持呼吸舒适。 P305 + P351 + P338如果在眼睛中:用水谨慎冲洗几分钟。 删除隐形眼镜,如果有的话,易于执行。 继续冲洗。 p333 + p313如果出现皮肤刺激或皮疹:获取医疗建议/注意。P280戴防护手套/防护服/眼部保护/面部保护。p284 [如果通风不足,呼吸保护。P301 + P312如果吞咽:如果您感到不适,请致电毒药中心/医生。p304 + p340如果吸入:将人移至新鲜空气并保持呼吸舒适。P305 + P351 + P338如果在眼睛中:用水谨慎冲洗几分钟。删除隐形眼镜,如果有的话,易于执行。继续冲洗。p333 + p313如果出现皮肤刺激或皮疹:获取医疗建议/注意。
•使用上面概述的修改协议,可以使用Zymobiomics™DNA/RNA小型RNA小型RNA小型RNA小型RNA稳定器收集的人类粪便样品可以成功处理DNA稳定剂。•修改的协议可产生高产量和良好的DNA质量。•实时PCR证明了标准协议的修改不会影响下游分析。分离的DNA不含任何抑制剂。