在 NEBuffer 4 中,10 µl 反应物含有 40 ng 300 碱基单链 RNA 和至少 1 µl Luna® Probe One-Step RT-qPCR 4X Mix with UDG,在 37°C 下孵育。孵育 4 小时后,通过荧光检测凝胶电泳测定,>90% 的底物 RNA 保持完整。
功能活性(粘性终端连接):20μl含有0.5 µL快速T4 DNA连接酶,12μgHindiii消化的lambda DNA和1x T4 DNA连接酶在37°C下孵育37°C,过夜,由Agarose gelorophoresis确定的片段,在> 95%的片段中,> 95%的片段。重新消化的连接产物,50μl反应,其中含有6μg连接的片段,40个单位Hindiii和1x的Nebuffer 2在37°C下孵育2小时,导致未检测到的未检测到的未发现的片段,因为琼脂糖凝胶电基果实确定。
产品名称:DPNII目录编号:R0543T浓度:50,000 U/ml单位定义:一个单位定义为在37°C中,在37°C的总反应量为50 µL的1小时内,在1小时内,在Nebuffer DPNII中消化1 µg lambda dna(dam-da)所需的酶量。包装批号:10275759到期日期:12/2026储存温度:-20°C存储条件:10 mm Tris-HCl,300 mm NACL,1 mm DTT,0.1 mm EDTA,50%甘油,50%甘油,500 µg/ml ralbumin(500 µg/ml ralbumin(ph 7.4 @ 25°C)规范> 1 psififey vlieption> 1 psifife vlieption> 1 psifife vlieption n03 n0 n0 trimperification:trigipeive i v2.0 r v2.0 r v。0.
线性化载体与指定的酶(10单位/µg)在建议的孵化温度下60分钟,每种酶为星云孵育60分钟。在连接和转化后,通过将转化子与消化反应的数量除以从线性化DNA的宗教(通常为100-500个菌落)获得的数量来确定裂解效率,并从100%中减去。“从末端到基本对”是指识别位点末端和片段末端之间的双链基对数的数量;该数字不包括初始切割中的单链悬垂。由于尚未证明这些单链核苷酸是否有助于切割效率,因此在设计PCR引物时应将4个碱基添加到指定的数字中。平均效率被四舍五入到最接近的整数;实验变化通常在10%以内。