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目标1：为大豆开发有效的无PAM无PAM CAS9和主要的编辑平台。这是一个基因编辑工具开发目标，可以建立UPO
目标1：为大豆开发有效的无PAM无PAM CAS9和主要的编辑平台。这是一个基因编辑工具开发目标，它基于我们先前开发的CRISPR-CAS9基因编辑平台。为大豆建造主要的编辑系统。基于SPCAS9 Nickase的两个不同变体和M-MLV的逆转录酶，已经为大豆毛的根和稳定的转化和基因组编辑制作了三个主要的编辑系统。分别使用命名为PE1，PE2和PE3的三个系统，以制造针对编码CDPK47，CDPK48，CDPK49和CDPK50的大豆基因的主要编辑构建体。PE1和PE2系统，以确定哪种最适合于创建精确的遗传变化，以改善大豆的性状。不幸的是，这两个系统无效地在毛状根中的四个CDPK基因中创建突变。因此，我们决定使用PE2系统测试其他基因FAD2和EPSP，并且再次没有发现靶基因已修改的证据。第三个Prime编辑版本，名为PE3，还测试了在毛状根部编辑FAD2和EPSP基因的能力，这也没有成功。PE1，PE2和PE3 PRIME编辑构建体在大豆中似乎不起作用，因此我们正在采用替代方法来修改向量，以使用不同的策略来生成Prime编辑指南RNA。这些结构将在下一个报告期间进行测试。总而言之，使用在其他工厂中使用的策略，在大豆中的主要编辑应用并不能有效。1。我们继续努力确定将在大豆中有效的主要编辑策略。目标2：应用基础编辑和主要编辑来修改影响大豆对干旱反应的基因。我们设计了两种不同的CRISPR-Cas9构建体来敲除CDPK基因的功能，这些功能被预测会影响大豆对干旱的反应。基于CRISPR-CAS9的基因敲除大豆CDPK家族基因（CDPK47、48、49和50）的两个CRISPR构建体（NK44和NK46）已建立，以敲除CDPK基因的两种组合。a。 NK44：PATEC-INCAS9-GCDPK49-50（靶向CDPK49和CDPK50）b。 NK46：PATEC-INCAS9-GCDPK47-50（靶向CDPK47，CDPK48，CDPK49和CDPK50）对这两种构建体进行了大豆转化，并为转染料的存在而基因型进行了基因型。我们为NK44构建体获得了四个转基因阳性植物。我们总共获得了NK46构建体的七个转基因阳性植物。种子，我们将这些种子称为T1代。至少为每条线发芽了至少24个T1幼苗，我们进行了PCR首先确定NK44或NK46构建体是遗传的，我们
密切相关的 II-C 型 Cas9 直系同源物可识别多种 PAM
A0A011P7F8 Mannheimia granulomatis MgrCas9 1049 65.5 A0A0A2YBT2 Gallibacterium anatis IPDH697-78 GanCas9 1035 59.7 A0A0J0YQ19 Neisseria arctica NarCas9 1070 70.4 A0A1T0B6J6 [Haemophilus felis HfeCas9 1058 65.3 A0A1X3DFB7 Neisseria dentiae NdeCas9 1074 66.4 A0A263HCH5 Actinobacillus seminis AseCas9 1059 66 A0A2M8S290 Conservatibacter flavescens CflCas9 1063 64.2 A0A2U0SK41 Pasteurella langaaensis DSM 22999 PlaCas9 1056 63.9 A0A356E7S3巴斯德氏菌 PstCas9 1076 63 A0A369Z1C7 副流感嗜血杆菌 Hpa1Cas9 1056 64.8 A0A369Z3K3 副流感嗜血杆菌 Hpa2Cas9 1054 65.2 A0A377J007 皮特曼嗜血杆菌 HpiCas9 1053 65.2 A0A378UFN0 脱氮伯氏菌（脱氮奈瑟菌）
用于基因敲除和转录调控的 PAM 柔性 Cas9 变体的高通量筛选
1. 纽约基因组中心，纽约，纽约州，美国 2. 纽约大学生物学系，纽约，纽约州，美国 3. 这些作者贡献相同 * 电子邮件：neville@sanjanalab.org 关键词：Cas9、诱变、汇集 CRISPR 筛选、CRISPRa、CRISPRi、原间隔区相邻基序
可持续和聪明的移动策略和...
（7）关于一般方法和方法，以更具体的术语制定政策和措施（“ PAMS”），并具有详细的描述，具有精确的动作和清晰的里程碑，尤其是在解决可再生能源，能源效率和内部能源市场的维度中。以更明确的方式描述每个PAM对相应的2030目标或其他政策目标实现的定量贡献，例如增加每个单个PAM的温室气体（“ GHG”）排放的预期贡献。澄清显示“ Wem/WAM”的每个PAM，以现有措施（“ WEM”）（“ WEM”）和其他措施（“ WAM”）的一部分成为两种情况的一部分。更正PAM的编号，该编号在PAM No.16，在“ PAM 11：太阳能地区供暖”中。
跨音阶的可编程活动物质
摘要可编程活动（PAM）结合了信息处理和能量转导。信息的物理实施例可以是磁性旋转的方向，一系列分子，离子的浓度或材料的形状。能量转导涉及化学，磁或电能转化为机械能。主要类PAM由具有许多交互单元的材料系统组成。这些单元可以是分子，胶体，微生物，液滴或机器人。由于单元之间的相互作用决定了PAM的属性和功能，因此PAM的可编程性在很大程度上是由于可编程相互作用所致。在这里，我们回顾了从超分子系统到宏观机器人群的PAM。我们专注于不同尺度上的相互作用，并描述这些（通常是局部）相互作用如何产生全局属性和功能。对PAM的研究将有助于追求广义晶体学以及对复杂性和出现的研究。最后，我们思考使用PAM建立软性大脑的机遇和挑战。
霜雷达：特权访问管理，2024
•Cyberark，Delinea和Beyond Trust在过去两年中全球PAM市场的一致收入绩效和市场份额增长，因此超高了增长指数。与其他PAM玩家相比，这些PAM供应商继续扩大其PAM投资组合并改进其上市策略，以扩大其全球客户群，同时在不同的垂直段之间保持稳固的影响力。通过积极的定价策略，有意义的合作伙伴关系和并购活动，这三位领导人已实现了一致的收入增长，并增强了他们的品牌价值和PAM业务，使他们能够在未来两年内建立强大的增长管道。
使用基于深度学习的概率方法
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密切相关的 II-C 型 Cas9 直系同源物识别多种...
摘要 RNA 引导的 CRISPR/Cas9 系统是基因组编辑的强大工具，但其靶向范围受到原型间隔区相邻基序 (PAM) 的限制。为了扩大靶向范围，开发能够识别多种 PAM 的 CRISPR 工具箱至关重要。在这里，我们使用 GFP 激活分析测试了与 Nme1Cas9 密切相关的 29 种 II-C 型直系同源物的活性，其中 25 种在人类细胞中有活性。这些直系同源物识别具有不同长度和核苷酸偏好的多种 PAM，包括富含嘌呤、富含嘧啶以及混合嘌呤和嘧啶的 PAM。我们深入表征了 Nsp2Cas9 的活性和特异性。我们还生成了一种识别简单 N 4 C PAM 的嵌合 Cas9 核酸酶，这代表了迄今为止紧凑型 Cas9 最宽松的 PAM 偏好。这些 Cas9 核酸酶显著增强了我们进行等位基因特异性基因组编辑的能力。
Addgene's CRISPR 101电子书，第三版
2。在有指导RNA的情况下与靶DNA结合，只要目标是原始的邻接基序的上游（5'），GRNA和cas9核酸内切酶都会形成Cas9：GRNA复合物。cas9核酸内切酶与靶基因组基因核基因座结合均由导向RNA中包含的靶序列介导，又介导了一个3碱基对序列，称为原始序列相邻基序或PAM。为了通过CAS9切割DsDNA，它必须立即包含由导向RNA靶向的位点下游（3'）的PAM序列。在没有引导RNA或PAM序列的情况下，CAS9既不会结合也不会切割目标。Cas9同源物（请参见下表）具有不同的PAM要求。这些不同的PAM要求使研究人员能够针对许多不同的基因组基因座。
兽医诊所中猫的压力：兴趣... -Dumas
1。选择用于住院猫压力管理的分子....................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................... 具有抗焦虑作用的精神药物合成在住院中可用................................................................................................ 48 3。选择用于住院猫压力管理的分子.......................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................具有抗焦虑作用的精神药物合成在住院中可用................................................................................................ 48 3。图48 Gabapentine 48 Gabapentine 48 50他们对其进行测量51Lorazépam52lorazépam。克隆人54 56结论56结论56结论56结论。 59附件：问卷73