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摘要 成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR) 相关蛋白 9 (Cas9) 是一种精确的基因组操作工具,可在各种细胞和生物体中产生靶向基因突变。尽管 CRISPR/Cas9 可以有效地产生基因敲除,但同源定向修复介导的基因敲入 (KI) 效率仍然很低,尤其是对于大片段整合。在本研究中,我们建立了一种有效的方法,用于 CRISPR/Cas9 介导的大型转基因盒整合,该盒携带唾液腺表达的多种消化酶 (20 kbp) 在猪胎儿成纤维细胞 (PFF) 的 CEP112 基因座中。我们的结果表明,使用具有短臂和长臂的最佳同源供体在 CEP112 基因座中产生了最好的 CRISPR/Cas9 介导的 KI 效率,并且 CEP112 基因座的靶向效率高于 ROSA26 基因座。CEP112 KI 细胞系被用作核供体,进行体细胞核移植以创建转基因猪。我们发现 KI 猪 (705) 在唾液腺中成功表达三种微生物酶 (b-葡聚糖酶、木聚糖酶和植酸酶)。这一发现表明 CEP112 基因座通过组织特异性启动子支持外源基因表达。总之,我们利用我们的最佳同源臂系统成功地在猪体内靶向 CEP112 基因座,并建立了一种改良的猪唾液中表达外来消化酶的模型。
引入猪,断奶的压力包括饮食形式和社交互动的变化,例如争夺支配顺序和与大坝隔离的竞争,这通常会导致肠道屏障完整性的摄入量和破坏,从而使机会性的致病细菌在良性微层次社区中成为占主导地位,并导致断断续续的腹泻后的生长,甚至导致死亡。因此,通常使用不仅可以高度生物利用的成分来制定早期苗圃饮食,而且还可以用作刺激摄入量的手段,以提供足够数量的营养以提高恢复率并减轻断奶过程的负面影响。猪衍生的水解产物肽已被建议将托儿猪的自愿饲料消耗增加到与饲喂含有乳清饮食的猪相当的水平(Solà-Oriol等,2011),但与饲喂乳糖喂养的猪相比,不太喜欢(Figueroa等人,2016年)。Fish derived hydrolysate peptides, Peptiva (Vitech Bio-Chem, Corp, CA), was reported to improve intake, which is in agreement with finding by Norgaard et al., 2012 who demonstrated that Peptiva effectively restored weight gain when compared to pigs fed spray dried plasma protein (SDPP) in trials that were conducted at Virginia tech and the University of Georgia using diets where AA were balanced to meet the理想的蛋白质建议要求。此外,肽的经济回报高于SDPP饮食。在现场试验中,建议肽和益生菌/益生元的组合可能具有协同作用。3)确定苗圃饮食中肽猪的最佳水平。在阿肯色大学进行的一项针对“ Peptiva Sew”进行的研究表明,与喂养SDPP+ZnO饮食相比,3%Peptiva+ZnO可以恢复生长性能。据报道,新产品“ Peptiva Swine”的现场试验比“ Peptiva Sew”具有更大的提高猪性能的潜力。我们建议通过滴滴研究评估苗圃饮食中“肽猪”的最佳水平,并以有或没有ZnO的具体目标进行比较:1)确定肽猪在替换生长性能,全血细胞计数,血液尿素硝基含量,血液尿素氮和微生物群社区中养育饮食中的饮食中替代ZN的饮食的影响。2)确定肽猪在替换鱼粉,完整的血细胞计数,血液尿素氮和微生物组群落中喂食饮食中没有ZnO的饮食的影响。
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数字照片修复和保存过程始于对旧照片的扫描。2 理想情况下,我们希望从原始底片开始,并以足够高的分辨率扫描它以捕获其包含的所有图像信息。然而,在现实世界中,这些原始底片很少可用。在 Elverhoj 照片修复项目中,我们开始使用的最佳图像似乎是 5 x 7 英寸底片的接触印刷品。好的接触印刷品(将底片压在印刷纸上而不是放大)的优点是原始场景和我们能够扫描的印刷品之间只有一个(非常旧的)镜头。另一方面,我们必须处理的一些源材料是印刷品的劣质扫描件,这些印刷品可能是用未对准的放大机和劣质镜头制作的。但即便如此,图像内容可能如此引人注目,在缺陷最小化的情况下,图像柔和度本身不会严重改变或分散最终复制所传达的感觉。
传统上,母猪是 Saddleback 品种。后来,人们开始使用 Saddleback x Landrace,即所谓的“Blue”。在最近户外养猪生产增加的过程中,杜洛克杂交品种取代了 Blue。杜洛克与 Saddleback 具有相同的耐寒性和良好的母性,但其生长和胴体特征以及抗晒伤性明显更好。尽管育种和选择得到改善,但户外养猪生产系统的后代胴体质量(就背膘厚度而言)往往比室内养猪的同类猪更差。报告显示,户外养猪的后代背膘平均多 1 毫米。
HSUS 报告:养猪业中的动物福利 摘要 猪的行为需求与肉食业商业饲养的猪的生活条件之间的不一致造成了许多动物福利问题。过去几十年来,养猪方式发生了巨大变化,工业化圈养作业已基本取代了小型多元化农场。商业生产设施中的猪被挤在室内贫瘠的环境中,几乎没有机会展示其各种复杂的社交、觅食和探索行为。由于环境和社会缺陷,会出现咬尾和攻击等行为异常。空气质量差和密集的圈养可能导致健康问题,而对每只动物缺乏个性化的关注也会影响对它们的护理。处理和运输屠宰是高度紧张的过程,有些猪会变得非常疲劳、受伤或生病,以至于它们无法走动,无法自行站立和行走。这些问题中的每一个都是需要立即解决的重大动物福利问题。简介猪首次用于农业是在大约公元前 9,000 年野猪被驯化时。1 它们从 16 世纪开始由新大陆的殖民者引入现在的美国大陆,2 野猪和野猪现在在南部和东南部地区、加利福尼亚州、