在空间测量多模式数据的能力中,可以为在转录,翻译和代谢水平上全面探索分子调节的前所未有的机会,以获取对基于健康和疾病的细胞活动的见解。但是,目前缺乏分析工具来整合不同空间 - 词素数据模式的互补信息,尤其是在空间代谢组学数据方面,这变得越来越宝贵。我们介绍了SPAMTP,这是一种多功能软件,该软件实现了空间代谢组学和转录组学数据的端到端集成分析。基于R,SPAMTP Bridges处理功能,用于来自Cardinal的代谢组学数据,并在Seurat中实施了以用户友好的细胞为中心分析。此外,SPAMTP的综合分析管道涵盖(1)自动质量到电荷比(M/Z)代谢物注释; (2)广泛的基于代谢物的下游统计分析,包括差异表达,途径分析和相关分析; (3)综合空间词分析; (4)一套可视化函数。为了灵活性和互操作性,SPAMTP包括用于数据导入/导出和对象转换的各种功能,从而可以与其他R和Python软件包无缝集成。我们证明了SPAMTP通过分析两个生物系统来吸引新的生物学理解的实用性。我们认为,该软件和实施方法将广泛用于空间多媒体和空间代谢组学分析中。
摘要:宿主细胞蛋白(HCP)是可能影响生物治疗剂的安全性,功效和质量的关键质量属性。标记 - 游离shot弹枪蛋白质组学是HCP监测的至关重要方法,但是选择串联质谱(MS/MS)搜索算法直接影响识别深度和定量可靠性。在这项研究中,六种突出的MS/MS搜索工具(Mascot,Maxquant,Experromine,Fragpipe,byos和Peaks)是系统上基准的,因为它们在与中国仓鼠卵巢细胞的同位素标记的蛋白质上的复杂样品上的性能进行了基准测试,该蛋白质是使用羊毛hamster卵巢细胞的,使用了诱捕的离子移动性表述和平行的仿制模式,并依赖于数据划分,并逐渐划分。关键性能指标,包括肽和蛋白质识别,数据提取精度,变化精度,线性和测量真实。使用Hamiltonian Monte Carlo采样的贝叶斯建模框架可通过后验概率校准以及局部错误的发现率来稳健地估计折叠式均值和方差。通过预期效用最大化实施的贝叶斯决策理论用于平衡准确性与后部不确定性,从而对每个工具的性能进行了概率评估。通过这种累积分析,可以观察到跨工具的变异性:一些在识别敏感性和蛋白质覆盖范围方面表现出色,有些在定量准确性方面具有最小的偏见,并且有一些在跨指标之间提供了平衡的性能。这项研究建立了一个严格的数据驱动框架,用于工具基准测试,为选择适合HCP监测生物制药开发中的HCP监视的MS/MS工具提供了见解。
蛋白质tau的抽象聚集定义了tauopathies,其中包括阿尔茨海默氏病和额颞痴呆。特定的神经元亚型有选择地容易受到tau聚集的影响,随后的功能障碍和死亡,但潜在的机制尚不清楚。系统地揭示了控制人类神经元中Tau聚集体积累的细胞因子,我们在IPSC衍生的神经元中进行了基于基因组CRISPRI的修饰筛网。屏幕发现了预期的途径,包括自噬,以及意外的途径,包括ufmylation和GPI锚构成。我们发现E3泛素连接酶CUL5 SOCS4是人类神经元中tau水平的有效修饰符,泛素化tau,与小鼠和人类中的auopanty的脆弱性相关。线粒体功能的破坏会促进tau的蛋白酶体错误处理,从而产生tau蛋白水解片段