利用 HSQC-2D(13C-1H)NMR 确定了有机溶剂木质素的结构特征。该技术最近揭示了木质素结构,并已用于分析从生物质中提取的各种木质素的单元间结合单元。1,2,3,4,5 它还可以指示木质素分支上剩余的非水解碳水化合物的量。有机溶剂木质素 (OSL) 显示出通常在硬木木质素中观察到的单元间,如图 S1 和 S2 所示。此外,即使在较低的轮廓水平下也观察到不了清晰的烃峰,从而评估有机溶剂产品的碳水化合物含量保持在检测水平以下。 2D HSQC NMR 谱(左)(δC/δH 20-100/2.0-5.4)的侧链区域表明,在δC/δH 53.65-57.04/3.53-3.88 处观察到甲氧基(蓝色)浓度较高。1,5 第二个最容易识别的基团(橙色)(δC/δH 59.5- 61.25/3.38-3.75)对应于 A γ 碳原子(见图 S1)。1,4 这表明与酮 -C=O 基团相比,存在大量羟基 -OH。绿色区域 (δC/δH 4.17-4.2 / 71.2-72.12) 和黄色区域 (δC/δH 4.6-4.68/85.2-86.13) 分别对应于 B 单元中的 B γ 和 B α 碳,表明有机溶剂木质素中存在 β-β' 键。在天然硬木木质素中,约 3% 的键是 β-β' 键。对应于 A β 碳的最后一个区域 (δC/δH 4.55/80.65) 非常弱,仅出现在较低的轮廓线水平,尤其是在 1 H 光谱上(图 S1 中未显示)。Zakzeski 等人也证明了有机溶剂木质素中这种低浓度的 β-O-4 键。 4 为了更清楚起见,图 S1 中未显示 DMSO 峰 (δC/δH 30- 47/2.1-3.0)。
补充图 6 . 剂量反应曲线表征 CUTO-28 亲本、CUTO-28 对照 HDR 编辑和 CUTO-28 L2086F 突变细胞系对酪氨酸激酶抑制剂的敏感性。a. 在不同浓度的克唑替尼、恩曲替尼、他曲替尼、劳拉替尼、雷帕替尼、卡博替尼、美瑞替尼和吉特替尼下暴露 72 小时后,所示细胞系的细胞活力以载体处理细胞为标准。图中标明,平均值和 SEM 取自三个技术重复。bd.对 CUTO-28 亲本和 TPM3-ROS1 L2086F 细胞产生的裂解物的磷酸化和总 MAPK(ERK1/2)以及蛋白质 S6 进行免疫印迹分析,这些细胞分别用 25 nM 恩曲替尼、卡博替尼和吉利替尼处理 2、4、6、8 和 24 小时。
参考文献中引入的设计。1需要-20 dB的最大回报损失,可以通过使用纯CPW线结构在下部阻抗侧使用1- µm间隙宽度来实现。在许多研究设施中,通过光刻工具以高收率制造这样的CPW线是不可行的。相比之下,我们对克洛普芬斯坦锥度的设计需要在较低阻抗侧的间隙宽度为3 µm,这是可以使用常用的光刻光刻工具可以很容易地实现的。另一方面,klopfenstein锥的-10 dB最大回报损失导致-0.45 dB的最小插入损失。当信号通过Klopfenstein锥度两次时,这种插入损失将使信号增益降低-0.9 dB,与放大器的标称15至20 dB增益相比,这是可以忽略的。