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World File Search SystemSV40
DNA污染辉瑞的mRNA疫苗/ ... div>
在2023年初，基因组研究人员凯文·麦克尔南（Kevin McKernan）发现了辉瑞/比奥特技术和现代疫苗中含有DNA的片段/plasmide。预印本发表在印刷品上，显示了欧洲和美国DNA成分的允许最大量的极限值：“多个测定支持超过欧洲Pean Medicines Agency（EMA）330nng/mg和FDAS 10NG/剂量要求的DNA污染。”根据作者的说法，在经过验证的质粒中，除了编码新霉素和卡纳米霉素的抗生素耐药性，尤其是在辉瑞/比翁技术织物中，还有一个用于编码SV40启动子的部分，该部分旨在在癌症发展中起重要作用。1
来自再生大鼠肝脏的DNA-甲基酶
摘要DNA甲基化酶已从再生大鼠肝脏中的核中纯化660倍。该酶能够甲基化单链（SS）和双链（DS）DNA，唯一的反应产物是5-甲基胞霉素。先前未甲基化的双链DNA来自原核生物（M.luteus）以及Euka-ryotes（Ascaris suis）可以用作底物。合成共聚物（DG-DC）n。（DC-DG）N和（DG，DC）N也被甲基化。虽然SV40 DNA几乎不是甲基化的，但即使以超涂层形式，PM2 DNA也是一个很好的底板。甲基化酶在异源性luteus dna中的17个碱基中的1个，但在同源大鼠肝脏DNA中只有590分之一。M. uteus DNA的高甲基化水平，对甲基化嘧啶等属菌的分析和初步的二核苷酸分析表明，DNA中的所有CpGs都可以甲基化。
生物化学和生物物理学Acta
1。恶性间皮瘤简介。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。233 1.1。 MM分子生物学的概述。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 233 1.2。 石棉和MM。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。233 1.1。MM分子生物学的概述。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。233 1.2。 石棉和MM。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。233 1.2。石棉和MM。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。234 1.3。SV40和mm。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。234 1.4。Erione和MM。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。Erione和MM。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>235 2。 div>真实和MM。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 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这就是为什么我们知道 COVID-19 疫苗成分是安全的
● 2023 年 12 月 6 日：Ladapo 致信 FDA，谎称新冠疫苗可以改变人体 DNA，并对脂质纳米颗粒和 SV40 序列的存在提出毫无根据的担忧。 ● 2023 年 12 月 14 日：FDA 回复 Ladapo 的信函称：“我们想明确表示，基于对整个制造过程的全面评估，FDA 对新冠疫苗的质量、安全性和有效性充满信心。该机构的效益风险评估和持续的安全监测表明，使用疫苗的益处大于风险。此外，在接种了超过 10 亿剂 mRNA 疫苗后，没有发现与残留 DNA 相关的安全问题。” 在此处阅读完整声明。 ● 2024 年 1 月 3 日：拉达波在一份官方公报中呼吁停止使用 mRNA COVID-19 疫苗，并继续引用虚假声明，称 COVID-19 疫苗可以改变我们身体的 DNA，并且 COVID-19 疫苗成分对我们的健康有害。
使用通用供体
图1。通过MESC中的刺激诱导的插入诱变。（a）击球策略的示意图。通过Cas9 RNP的hit-trap供体和基因组的同时裂解会导致靶向捕获。 整合后，基因陷阱盒会导致靶基因启动子的截短蛋白和GFP的表达。 选择盒子由组成型SV40启动子表达紫霉素的抗性基因。 ATS序列：GGTATGTCGGGAACCTCTCCAGG; SA，剪接受体； IRES，内部核糖体入口网站； PA，聚腺苷酸信号。 （b）在杀击球中选择呼吸霉素后MESC克隆的代表性微观图像。 红色箭头分别指示凋亡克隆（顶部），GFP-生存的克隆（中间）和GFP阳性幸存的克隆（底部）。 比例尺，50 µm。 （c）GFP阳性克隆的PCR基因分型证实了HPRT基因座的hit-trap供体的正确整合。 5 /3J，5' /3'交界处。 （d，e）针对HPRT基因座（TH1-1，TH2-4和TH3-5）的hit-trap克隆的Western印迹和QPCR分析，并用微管蛋白作为负载对照。 错误条显示了S.D. 来自三个技术重复。 使用学生的未配对t检验来计算显着性：** p <0.01。通过Cas9 RNP的hit-trap供体和基因组的同时裂解会导致靶向捕获。整合后，基因陷阱盒会导致靶基因启动子的截短蛋白和GFP的表达。选择盒子由组成型SV40启动子表达紫霉素的抗性基因。ATS序列：GGTATGTCGGGAACCTCTCCAGG; SA，剪接受体； IRES，内部核糖体入口网站； PA，聚腺苷酸信号。（b）在杀击球中选择呼吸霉素后MESC克隆的代表性微观图像。红色箭头分别指示凋亡克隆（顶部），GFP-生存的克隆（中间）和GFP阳性幸存的克隆（底部）。比例尺，50 µm。（c）GFP阳性克隆的PCR基因分型证实了HPRT基因座的hit-trap供体的正确整合。5 /3J，5' /3'交界处。（d，e）针对HPRT基因座（TH1-1，TH2-4和TH3-5）的hit-trap克隆的Western印迹和QPCR分析，并用微管蛋白作为负载对照。错误条显示了S.D.来自三个技术重复。使用学生的未配对t检验来计算显着性：** p <0.01。
核酸研究
图4 人类DNA与Vxj探针的Southern印迹杂交。用EcoRI消化人类l~7i，在0.7％琼脂糖凝胶上分级分离并转移到硝基纤维素滤膜上。滤膜上的DNA在37℃下在4X SSC/50％甲酰胺溶液中与仅含VX序列的pHVX6杂交。最后用65℃的2X SSC洗涤滤膜。泳道1，MC116（产生X的伯基特淋巴瘤）DNA；泳道2，BL2（产生X的伯基特淋巴瘤）DNA；泳道3，U266（产生X的人类骨髓瘤）DNA；泳道4，GM1056（产生X的人类淋巴母细胞）DNA；泳道5，SKO-007（U266 HPRT-）DNA；泳道6，CEM（人类T细胞淋巴瘤）DNA；泳道7，PA682（ic产生伯基特淋巴瘤）DNA；泳道8，JI（ic产生伯基特淋巴瘤）DNA；泳道9，Daudi（ic产生伯基特淋巴瘤）DNA；泳道10，DS178（ic产生伯基特淋巴瘤）DNA；泳道11，PAF（SV40转化的人成纤维细胞）DNA；泳道12，Colo 320（人结肠癌）DNA（31-32）。
开发执行胸部压缩和外部除颤的自动设备：基于动物的试点研究
saccharomyces cerevisiae pif1是一种多功能DNA解旋酶，在维持核和线粒体基因组的维持中起多种作用。PIF1的两个同工型通过使用替代的翻译起始站点从单个开放的阅读框架中产生。PIF1的线粒体靶向信号（MT）位于两个起始位点之间，但是尚未确定核定位信号（NLS）。在这里，我们使用序列和功能分析来识别NLS元素。在859氨基酸PIF1的羧基末端结构域中缺乏四个碱性氨基酸（781 kKRK 784）的PIF1（PIF1-NLSΔ）的突变等位基因在野生型水平上表达并保留野生型野生型线粒体界功能。然而，PIF1-NLSδ细胞在四个测试中的核功能中有缺陷：端粒长度维持，Okazaki碎片处理，突破性诱导的复制（BIR）以及与核靶位点结合。将NLS融合了NLS，从Simian病毒40（SV40）T-抗原融合到PIF1-NLSδ蛋白质，可减少PIF1-NLSδ细胞的核缺损。因此，绝大多数核PIF1功能需要PIF1羧基附近的四个碱性氨基酸。我们的研究还揭示了先前描述的功能PIF1-M2等位基因丧失与这项工作中产生的其他三个PIF1突变等位基因之间的表型差异，这对于研究核PIF1功能将很有用。
特别理事会会议议程 - 2024 年 10 月 11 日
附件 1：David Speicher 博士的报告（附件），该报告证明辉瑞和 Moderna 疫苗瓶中存在过量的合成 DNA 污染，用于成人和儿童。Speicher 博士的检测显示，DNA 污染水平比澳大利亚治疗用品管理局 (TGA) 规定的每剂 10 ng 的限制高出 7 到 145 倍。Speicher 博士的研究结果强调，辉瑞疫苗瓶还含有 SV40 启动子-增强子-ori 序列，该序列最初并未向监管机构披露，并且可以促进合成 DNA 的核定位和基因组整合。该报告提出了对潜在的长期健康影响的严重担忧，例如基因组整合、指数级的癌症风险以及合成 DNA 污染造成的不良后果。附件 2：莫纳什联邦议员 Russell Broadbent 议员于 2024 年 9 月 20 日致函（附件）。在信中，布罗德本特先生呼吁总理暂停使用辉瑞和 Moderna 的新冠疫苗，因为斯派克博士的报告中包含了令人震惊的发现。布罗德本特先生敦促立即调查并暂停这些产品，并指出 DNA 污染水平远远超过监管限度，必须保护澳大利亚人民。这封信由 26 位澳大利亚和世界顶尖医生、科学家和研究人员共同签署，其中包括澳大利亚科学院院长。附件 3：莫纳什联邦议员罗素·布罗德本特议员于 2024 年 9 月 25 日发出的后续信函（附件），其中包括由 50 多位世界顶尖医生、教授、科学家编写的科学摘要
tlr-2和
摘要遗传物质的稳定性和完整性对于维持和延续生活至关重要。人类基因组由三十亿对碱基组成，编码30,000-40,000个基因，并不断受到内源性反应性代谢产物，治疗药物和众多影响其完整性的环境诱变药物的攻击。因此，很明显，基因组的稳定性必须在连续监测之下。这是通过DNA修复机制实现的，DNA修复机制已开发出来去除或耐受DNA损伤和误差。在生物体中存在的DNA修复机制中，它们可以分为：i）基础切除修复（BER），ii）核苷酸切除（NER），iii）基本MALPASE（MMR）和IV）DNA修复，通过非同型末端（NHEJ）。对于这些机制正常工作，很明显，负责修复功能的蛋白质之间相互作用的重要性，以及对负责提到的机制的蛋白质正确位置的核进口调节。在负责调节核进口的机制中，由进口异二聚体α/β组成的经典途径是位移的主要机制之一。某些修复蛋白似乎仅与进口α（IMP）的某些同样蛋白相互作用，表明对修复过程的额外调节，但对这些蛋白质的核位置序列（NLS）的识别知之甚少。通过这些结果，阐明了包含NLSS KU80和FEN1的结构。这项工作特别涉及使用晶体学技术与蛋白质相关DNA修复的NLSS肽的IMP复合物的结构复合物的研究。进行了在其N末端部分截断的Musculus印象的表达和纯化，以及与DNA相关蛋白的NLS肽的IMP偶然化，对应于KU80，PMS2和MLH1蛋白质和MLH1蛋白质和BIPARTARTARTARTATTITE序列的单型序列。X射线衍射数据，并以2.1-2.38Å的分辨率进行处理。肽NLS KU80与NHEJ修复有关，与主连接位点上的IMPα相似，类似于SV40 T抗原的NLS（S 1）。已经与ber修复有关的NLS FEN1肽与Sitia S 1和次级位点（S 2）有关，证明是两部分序列。此外，仅具有10种废物的Fen1肽接头区域使与IMPα的联系更好，并且与具有11-12废物的肽的连接相比，与IMPα的连接更扩展，可能更有利的构象。在连接位点上的特定位置被确认为必不可少的，以及在这些区域中保守的残留物，表明这些位点中分子间相互作用的重要性。此信息表明这些蛋白质可以通过IMP-α独立运输到核心，而无需与有关修复的其他蛋白质形成复合物。关键字：进口α，核进口，NLS，射线晶体学-X，KU80，FEN1，PMS2，MLH1。