尽管已开发出多种疫苗来遏制严重急性呼吸道综合征冠状病毒 2 (SARS-CoV-2) 在人类中的传播,但为动物(包括宠物)开发的疫苗却非常少。为了对抗人与动物、动物与动物和动物与人之间传播的威胁以及新的病毒变种的产生,我们开发了一种亚单位 SARS-CoV-2 疫苗,该疫苗基于在昆虫细胞中表达的重组刺突蛋白胞外结构域,然后与适当的佐剂配制而成。将 16 只 8–12 周龄的杂交雌性和雄性小猫(每组 n = 4)随机分为四个治疗组:仅刺突蛋白;刺突加 ESSAI 水包油 (O/W) 1849102 佐剂;刺突加氢氧化铝佐剂;和 PBS 对照。所有动物均间隔 2 周肌肉注射两次疫苗,每次注射 5 µ g 刺突蛋白,体积为 0.5 ml。在第 0 天和第 28 天,采集血清样本以评估抗刺突 IgG、抗体对刺突与血管紧张素转换酶 2 (ACE-2) 结合的抑制、针对野生型和 delta 变异病毒的中和抗体以及血液学研究。在第 28 天,所有组均通过鼻内方式接种 SARS-CoV-2 野生型病毒 10 6 TCID 50。在第 31 天,采集组织样本(肺、心脏和鼻甲)进行病毒 RNA 检测和病毒滴度测定。两次免疫后,两种疫苗均诱导高滴度血清抗刺突 IgG,可抑制刺突 ACE-2 结合并中和野生型和 delta 变异病毒。两种佐剂疫苗配方均能保护幼猫免受上呼吸道病毒的排出以及下呼吸道和心脏病毒的复制。这些令人鼓舞的数据值得继续评估疫苗保护猫免受 SARS-CoV-2 感染的能力,特别是防止传播的能力。
摘要:弯曲杆菌空肠是全球人类胃炎的主要原因,并且处理或消费受污染的家禽肉是感染的关键来源。C.空肠蛋白FLPA和SODB和含有J. jejuni n -Glycan的糖缀合物分别据报道是鸡的部分保护性疫苗。在这项研究中,由蛋白质聚糖偶联技术产生的两种新型糖蛋白 - G-FLPA和G-SODB(分别具有两个和三个N-糖基化位点) - 通过相对于其Unglycosylsy-c. jejuni菌株M1的鸡肉菌菌株对鸡肉的肠道结构进行了评估。进行了两项相同设计的独立试验,以10 7菌落形成单位(CFU)或最低挑战剂量为10 2 CFU的Jejuni M1的高挑战剂量。在两项试验中都检测到抗原特异性血清Igy,但未观察到Jejuni M1的盲肠定植降低,并且疫苗抗原的糖基化对结果没有影响。我们的数据突出了在空肠梭菌疫苗接种试验结果中的不一致,该试验可能会反映抗原,挑战菌株,疫苗给药,辅助和鸡系特异性的差异。通过增加糖基化水平或使用高度免疫原性蛋白载体来改善糖结轭疫苗可以改善其效率。通过增加糖基化水平或使用高度免疫原性蛋白载体来改善糖结轭疫苗可以改善其效率。
摘要 凝聚蛋白复合物对于细胞分裂过程中的有丝分裂染色体组装和分离至关重要,然而,人们对它们在有丝分裂后细胞中的功能知之甚少。我们在此报告了凝聚蛋白 I 亚基 Cap-G 在果蝇神经元中的作用。我们表明,尽管有丝分裂染色体压缩不需要凝聚蛋白,但有丝分裂后神经元会表达 Cap-G。在神经元中(从出生开始)特异性敲除 Cap-G 会导致发育停滞、行为缺陷和基因表达的剧烈变化,包括神经元基因子集表达减少和发育大脑中通常不表达的基因异常表达。在成熟神经元中敲除 Cap-G 会导致相似的表型,但程度较轻。此外,我们看到 Cap-G 在祖细胞和分化神经元的不同位置动态结合。因此,Cap-G 对神经元中正确的基因表达至关重要,并在神经元发育的早期阶段发挥重要作用。
尽管当前已批准的Covid-19疫苗具有显着的效率,但仍有几个机会继续开发针对SARS-COV-2和未来致命的呼吸道病毒。特别是,受限的疫苗接入和犹豫的免疫率有限。此外,当前的疫苗无法防止突破感染,导致病毒循环延长。为了改善通道,设计具有增强热稳定性的亚基疫苗,以消除对超冷链的需求。从该疫苗中排除传染性和遗传材料也可能有助于减少疫苗的犹豫。为了防止突破感染,探索了鼻内免疫以诱导粘膜免疫。由壳聚糖(CS)溶液中额外免疫助剂制成的受体结合结构域(RBD)多肽组成的原型疫苗诱导了1或2剂后实验室小鼠中的高水平的RBD特异性抗体。抗体反应耐用,高滴度在皮下疫苗接种后至少五个月持续存在。血清抗RBD抗体均包含IgG1和IgG2A同种型,这表明该疫苗诱导了混合的Th1/Th2反应。RBD疫苗接种无CS配方导致抗RBD反应最少。 比介绍剂量添加了CpG寡核苷酸在CS和RBD疫苗配方中比白介素12(IL-12)更有效地增加了抗体滴度。 在稳定性方面,疫苗在室温(21-22°C)或4°C下至少持续一个月时不会失去活性。RBD疫苗接种无CS配方导致抗RBD反应最少。比介绍剂量添加了CpG寡核苷酸在CS和RBD疫苗配方中比白介素12(IL-12)更有效地增加了抗体滴度。在稳定性方面,疫苗在室温(21-22°C)或4°C下至少持续一个月时不会失去活性。重要的是,生成的抗体与与SARS-COV-2变体相关的RBD突变体(包括Alpha,beta和Delta变体)的反应性,并抑制RBD与其同源受体血管紧张素转化酶2(ACE2)的结合。当鼻内递送时,疫苗会诱导RBD特异性粘膜IGA抗体,可防止上呼吸道中的突破性感染。总的来说,数据表明设计的疫苗平台具有多功能,适应性,并且能够克服当前Covid-19疫苗的关键限制。
为了成功适应环境,动物会不断调整自己的行为,确保其适应当前环境。它们的神经系统必须快速处理传入的刺激,以区分相关信息和不相关信息,从而实现集中注意力并支持记忆形成和行为调节等更高级的执行功能。感觉过滤在一定程度上由习惯化这个基本且保守的过程介导 [1]。习惯化是所有动物都表现出的最简单的非联想学习形式,其定义为对重复的、不显著的刺激的反应性逐渐下降 [2],并且不是由于感觉适应或运动疲劳 [3]。值得注意的是,已有研究表明,动物也能对威胁性和潜在致命的刺激形成习惯,并以此作为修改其行为策略以避免危险刺激的一种手段 [4]。习惯化的行为参数和细胞机制受突触可塑性机制控制,这种机制通过改变神经递质信号来调节兴奋和抑制的平衡[5-9],但我们对介导习惯化的关键基因的了解并不完整。过滤机制受损是许多常见神经系统疾病的标志,因此习惯化缺陷已被用作诊断工具[10]。习惯化缺陷与自闭症谱系障碍(ASD)[11-13]、脆性X 综合征[14]、精神分裂症[15]、亨廷顿氏病[16]、注意力缺陷多动障碍(ADHD)[17]、帕金森病[18]、图雷特综合征[19]和偏头痛[20]有关。剖析调节感觉过滤的潜在遗传机制可帮助我们了解疾病的病因、确定疾病的遗传易感性以及找到潜在的治疗靶点。了解习惯化的遗传、细胞和行为方面对于理解正常神经回路如何处理感觉信息至关重要。斑马鱼可以表现出受经验调节的感觉诱发运动行为(到受精后五天(dpf)为止)。声学刺激会在斑马鱼身上引发两种不同的运动反应之一:短延迟 C 形弯曲(SLC),通常是对高强度刺激的反应,以及长延迟 C 形弯曲(LLC),通常是对低强度刺激的反应 [ 21 ]。这些行为由简单、特征明确的回路驱动,可进行可视化和基因操作 [ 22 ]。 SLC 是由激活两个双侧 Mauthner 后脑网状脊髓神经元之一触发的,这两个神经元是听觉惊吓反应 (ASR) 的指挥神经元 [ 23 ]。Mauthner 神经元在功能上类似于尾桥脑网状核 (PnC) 的巨型神经元,这些神经元从耳蜗神经接收输入,并输出到脊髓中的运动神经元,从而驱动哺乳动物的惊吓反应 [ 24 – 26 ]。虽然斑马鱼的神经回路比哺乳动物的简单,但正是这种简单性使其成为研究感觉过滤背后的遗传、细胞和行为机制的有用工具。为了确定对介导习惯化学习很重要的基因,我们将全基因组正向遗传筛选 [ 27 ] 与高通量平台相结合,以进行无偏的听觉惊吓分析 [ 28 ]。这种方法产生了几个听觉惊吓习惯化所需的基因,包括棕榈酰转移酶亨廷顿相互作用蛋白 14 (hip14) [ 29 ],
减轻疟疾和相关死亡的负担受到了疟疾寄生虫能够发展对市场上所有可用疗法的抵抗力的能力的阻碍(Antony和Parija,2016年)。因此,了解寄生虫获得对抗疟药的耐药性的机制对于未来替代有效治疗的发展至关重要。如今,阿耳震蛋白及其衍生物(Arts)是推荐的治疗方法,以及长期伴侣,形成基于青蒿素的联合疗法(ACTS)。artemisin抗性,主要由环阶段存活测定法(RSA)定义,经常与K13蛋白中的突变有关,而K13蛋白不调节蛋白酶体的活性(Wicht等,2020)。然而,使用蛋白酶体抑制剂(例如环氧素)会增加抗性和敏感寄生虫中的青蒿素活性(Bozdech等,2015)。在该帐户中,泛素 - 蛋白酶体途径(UPP)的不同部分的突变可能会影响阿甘辛蛋白的反应(Bridgford等,2018)。最近的研究表明,19S和20S的蛋白酶体亚基的突变敏化K13 C580Y寄生虫,这是基于RSA的更大湄公河区域中最普遍的青蒿素耐药性突变,基于RSA(Rosenthal和Ng,2021; Rossenthal和Ng,20223)。此外,在编码非素化酶UBP-1的基因中的两个突变在抗甲半氨着这甲蛋白蛋白的抗chabaudi P. chabaudi寄生虫中被鉴定出来,并且证明它们可以介导恶性疟原虫中的艺术耐药性(Cravo,2022222)。后者负责底物的识别,去泛素化,展开和易位。泛素 - 蛋白酶体系统对于真核细胞至关重要,因为它负责蛋白质的降解或回收利用,侵蚀了几个细胞过程,包括细胞周期,转录调节,细胞应激反应,信号转导,信号转导,和细胞曲折(Wang et al。,2015年)。这种蛋白质调节对于在两个宿主之间的生命周期进程中发生的疟疾寄生虫经历的快速转化至关重要,尤其是在复制率高的阶段(Krishnan和Williamson,2018年)。UPP涉及一种称为泛素化的蛋白质后修饰过程,该过程将多泛素链连接到随后由26S蛋白酶体识别的蛋白质上。如果蛋白质被蛋白质组恢复或降解,则泛素化定义的类型(Aminake等,2012; Wang等,2015)。26S蛋白酶体是一种枪管形的多亚基蛋白酶复合物,分为20S核心颗粒(CP)和19S调节粒子(RP)。20S核心通过肽基戊酰基肽水解(PGDH)(caspase样),类似胰蛋白酶样和类似chymotrypsin的活性负责蛋白水解,分别遇到了三种B-亚基(B1,B2和B5)(分别为Wang et al。,2015年)。这些催化活性的亚基分别使用N末端苏氨酸作为酸性,胰蛋白酶和疏水残基的羧基末端后的亲核试剂和裂解。这些活动站点
开发用于HIV-1和其他粘膜病原体的鼻内疫苗受到了无法安全地给予人类的佐剂的缺乏。我们发现,在人类中耐受良好的鼻内志贺氏菌疫苗(Invaplex)也可以充当小鼠鼻内蛋白和DNA疫苗的辅助。确定Invaplex是否可以在人类中潜在地辅助疫苗,我们同时施用了邻肌免疫病毒(SIV)蛋白(SIV)蛋白质(SIV)蛋白质和DNA,编码邻居玛卡(Maca)的鼻腔鼻腔中有或没有Invesplex的拟南芥免疫障碍病毒(SHSHIV)。动物用表达SIV env或gag的腺病毒载体进行鼻内增强,以评估记忆反应。血清和鼻,生殖道和直肠分泌的抗SIV抗体。细胞内细胞因子染色用于测量血液中的Th1型T细胞。猕猴具有0.5 mg入侵的DNA/蛋白质免疫,当与非辅助对照组合时,对SIV ENV和SHIV GAG的鼻血清IgG,鼻血管IgA和子宫颈阴道IgA反应,对SIV ENV和SHIV GAG,POL蛋白。直肠IgA对ENV的反应仅被升高,而没有被观察到插科打pol。Invaplex增加了IFN C的CD4和CD8 T细胞的频率,而不是由DNA诱导的T细胞反应。AD-SIV促进ENV特异性的T细胞以及Env和GAG,血清中的POL特异性抗体和所有分泌物。2021作者。由Elsevier Ltd.数据表明,入侵可能是对人类鼻内蛋白疫苗的辅助物,尤其是旨在防止生殖器或呼吸道感染的辅助剂。这是CC BY-NC-ND许可证(http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/)下的开放访问文章。
肽亚单位疫苗通过降低脱靶反应风险和提高诱导适应性免疫反应的特异性来提高安全性。然而,大多数可溶性肽的免疫原性通常不足以产生强大而持久的免疫力。已经开发了许多用于肽抗原的生物材料和运载工具,以在保持特异性的同时改善免疫反应。肽纳米簇 (PNC) 是一种亚单位肽疫苗材料,已显示出增加肽抗原免疫原性的潜力。PNC 仅由交联肽抗原组成,并且已由长度小至 8 个氨基酸的几种肽抗原合成。然而,与许多肽疫苗生物材料一样,合成需要在肽中添加残基和/或共价接合抗原表位内的氨基酸以形成稳定的材料。为实现生物材料的结合或形成而进行的抗原修饰的影响很少被研究,因为大多数研究的目标是将可溶性抗原与生物材料形式的抗原进行比较。本研究调查了 PNC 作为平台疫苗生物材料,以评估肽修饰和具有不同交联化学性质的生物材料形成如何影响表位特异性免疫细胞呈递和活化。通过从模型肽表位 SIINFEKL 脱溶合成了几种类型的 PNC,该表位源自免疫原性蛋白卵清蛋白。SIINFEKL 被改变以在每个末端包含额外的残基,这些残基是经过战略性选择的,以便能够将多种结合化学选项掺入 PNC。使用了几种交联方法来控制使用哪些功能组来稳定 PNC,以及交联的可还原性。评估了这些变体在体内免疫后的免疫反应和生物分布。与单独的未修饰可溶性抗原相比,所有修饰抗原制剂在掺入 PNC 时仍会诱导相当的免疫反应。然而,一些交联方法导致所需免疫反应显著增加,而另一些则没有,这表明并非所有 PNC 的处理方式都相同。这些结果有助于指导未来的肽疫苗生物材料设计,包括 PNC 和各种共轭和自组装肽抗原材料,以最大化和调整所需的免疫反应。
通过N-甲基 - D-天冬氨酸受体(NMDARS)信号对于谷氨酸能突触的成熟至关重要,部分是通过表达主要表达Glun2B-和Glun3a含Glun3a的不成熟突触的发育转换,从而获得了含Glun3a的含量,从而涉及含Glun2a的含量。这种亚基开关被认为是神经网络巩固所需的NMDAR的突触稳定的基础。但是,控制NMDAR交换的细胞机制尚不清楚。使用单分子和共聚焦成像以及生化和电生理方法的组合,我们表明表面glun3a-nmdars形成了一个高度扩散的受体池,它松散地固定在突触上。值得注意的是,glun3a亚基表达的变化选择性地改变了glun2a-的表面扩散和突触锚定,但不能通过改变与细胞表面受体的相互作用来改变glun2b-nmdars。Glun3a对NMDAR表面扩散的影响仅限于啮齿动物产后发育的早期窗口,从而允许Glun3A亚基控制NMDAR信号成熟和神经元网络重新构造的时间。
双子座科的家族由500多个可以感染众多双核和单子植物的圆形单链(SS)DNA病毒物种组成。双子病毒利用宿主的DNA复制机制,在植物细胞的核中复制其基因组。将其DNA转化为双链DNA,随后复制,这些病毒依赖于宿主DNA聚合酶。但是,此过程的第一步的启动,即传入的圆形ssDNA转化为dsDNA分子,已经难以捉摸近30年。In this study, sequencing of melon ( Cucumis melo ) accession K18 carrying the Tomato leaf curl New Delhi virus (ToLCNDV) recessive resistance quantitative trait locus (QTL) in chromosome 11, and analyses of DNA sequence data from 100 melon genomes, showed a conservation of a shared mutation in the DNA Primase Large subunit ( PRiL ) of all accessions that对TolCNDV的挑战表现出抵抗力。沉默(天然)烟熏本尼亚人pril以及随后对三种不同的双子病毒的挑战表明,所有三种病毒的滴度都严重减少,完全强调了pril在双子病毒复制中的重要作用。呈现了一个模型,以解释Pril在GESINIVIRAL DNA复制启动中的作用,即 作为原始酶的调节亚基,在DNA复制开始时类似于DNA Primase - 在所有生物体中介导的DNA复制起始。呈现了一个模型,以解释Pril在GESINIVIRAL DNA复制启动中的作用,即作为原始酶的调节亚基,在DNA复制开始时类似于DNA Primase - 在所有生物体中介导的DNA复制起始。