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用胰蛋白酶和脱氧核糖核酸酶将吸水泡顶部表皮分离成
皮肤自显影。对 6 例疱疹的整个疱顶表皮和表皮细胞悬液进行了放射自显影分析。将两个完整的表皮和分离成细胞悬浮液的另外 22 个表皮在 1 ml 含有 2 µCi ["H]TdR 的 Hanks 溶液中在 37°C 下孵育 60 分钟。用 Hanks 溶液清洗两次后，将水泡表皮固定在 4% 福尔马林中，进行处理，并切成 4 µm 的切片。从表皮细胞悬浮液中制成细胞离心制剂。用剥离膜（Kodak AR-IO）覆盖制剂，暴露 7 天，并用 Harris 苏木精染色。通过计数每个样本中的 5 000 个细胞并将计数表示为标记细胞与所有未标记表皮细胞 XI 00 的比例来确定表皮细胞的标记指数。
日本犀牛甲虫 Trypoxylus dichotomus 基因组序列草图
（未经同行评审认证）是作者/资助者。保留所有权利。未经许可不得重复使用。此预印本的版权所有者此版本于 2022 年 1 月 12 日发布。；https://doi.org/10.1101/2022.01.10.475740 doi：bioRxiv preprint
购买前尝试：基于云的机器学习数据市场的隐私数据评估
基于云的数据市场提供了一项服务，可以将数据购物者与适当的数据销售商匹配，以便数据购物者可以使用外部数据来增强其内部数据集以改善其机器学习（ML）模型。由于数据可能包含不同的值，因此购物者在进行最终交易之前评估最有价值的数据至关重要。但是，评估ML数据的典型要求云要求访问购物者的ML模型和卖家的数据，这两者都敏感。现有的基于云的数据市场都没有启用ML数据评估，同时保留模型隐私和数据隐私。在本文中，我们在基于云的数据市场上开发了一个隐私保护ML数据评估框架，以保护购物者的ML模型和卖家数据。首先，我们提供了一个隐私保护框架，该框架使购物者和卖家能够分别对其模型和数据进行加密，同时保留云中的数据功能和模型功能。然后，我们开发了一个保护隐私的数据选择协议，该协议使云可以帮助购物者选择最有价值的ML数据。此外，我们开发了一个隐私的数据验证协议，该协议允许购物者进一步检查所选数据的质量。与随机数据选择相比，实验结果表明，我们的解决方案可以减少60％的预测错误。
尝试加入“ABC 策略”!!!!!!!!
目前是什么导致了你的压力？ _____________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________ _ 你过去做过哪些活动有助于缓解压力，或者哪些活动你想参加，但由于时间或动力不足而没有参加？（确定这些活动并将它们纳入你的日程安排。对活动要现实且有针对性。确定哪些事情可以做到符合你的生活需求和时间限制。如果你想多锻炼，但又没有时间，试着在课间、校园里散步十五分钟。） _____________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________ 什么时候比较好？（不要拖延！如果你现在感到压力，那么现在就需要一项活动。如果你在工作、上课或在家，试着在你的办公桌、浴室或沙发上做呼吸练习。专注于你的呼吸，用鼻子深吸一口气，然后用嘴慢慢呼气。） _____________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________
人工智能在医学教育中的整合
上下文：胶质母细胞瘤是最具侵入性的脑肿瘤，预后不良和快速进展。标准疗法（Surgical切除，辅助化疗和放射疗法）可确保只有18个月的生存率。在本文中，我们着重于放射疗法的创新类型，替莫唑胺与新型物质的各种组合以及它们给药的方法以及向肿瘤细胞的载体递送。证据获取：为了详细研究化学疗法和放疗的各种选择，Elsevier，NCBI Medline，Scopus，Google Scholar，Embase，Web of Science，Cochrane图书馆，Embase，Global Health，Cyberleninka和RSCI数据库进行了分析。结果：最可用的方法是口服或静脉注射替莫唑胺。更有能力的是替莫唑胺与创新药物以及诸如Lomustine，组蛋白脱乙酰基酶抑制剂和氯喹以及Olaparib等物质的化学疗法。这些组合提高了患者的存活，并且在耐药的治疗方面有效。与标准分离放射疗法（60 Gy，30个分数，6周）相比，由于缺乏毒性，因此对老年患者的次数更有效。近距离放射治疗降低了胶质母细胞瘤复发的风险，而贝伐单抗的放射外科对复发性或无法手术的肿瘤更有效。目前，最有效的治疗被认为是鼻内抗氧抗蛋白A3（抗epha3）含有替莫唑胺的丁基酯（TBE负载（TBE）聚乳酸乙二醇酯纳米颗粒（P-NPS）的N-N-N-n-n- claSan in-clecotsan cletsanyy cletsanyy（TMC）clecotsan cletsanyy cletrosany（tbe）多乳酸乙二醇酯（TME）（tbe）cletosan（tbe）cletosan in-cletsanyy cletrosany in-cletsan in-precotsan cletsan in-cletsanyy cletsanyyyyyyyy（TM）结论：newradiotherapeuticmethodssignifirafly increaseThersEthesulvivalRates of Glioblastomapatients。综合出发，可能导致消除所有使健康的肿瘤细胞活着。新的化学治疗药物与替莫唑胺的辅助性伴随着令人印象深刻的疾病。覆盖有TMC的P-NP的抗ePha3-tbe-tbe-tbe-tbe-tbe-tbe tmc具有高吸收蛋白，并有效地杀死胶质母细胞瘤细胞。一个新的“前进”可能会成为未来的一种药物，从而降低了纳米颗粒在肺部的特定积累，但同时不影响肿瘤细胞的特定吸收。
新兴卷6导通-Pod-tryckoriginal-210114.indd
编辑委员会，安娜·艾萨克森博士，哈加·希里亚，应用科学大学，芬兰教授克里斯蒂安·赫尔姆斯·约根斯教授，罗斯基尔德大学，丹麦，克里斯托·纳格尔博士，克里斯托·纳格尔博士，瑞士大学，瑞士副教授，普罗克大学，普罗克大学，潘特·普罗克大学，格里奇大学，弗雷纳·弗恩兰多·马尔·弗朗西·马尔·弗伦德·弗朗西·马尔·弗伦德·弗朗西·弗朗西亚， the ballearic islands, spain professors Gun-britt Wärvik, Gothenburg University, Sweden Associate Professor Harm Biemans, Wageningen University, The Netherlands Dr. Haryanti bt mohd affandi, National University of Malaysia, Malaysia Professor Hiroshi Numaguchi, Daitubunka University Tokyo, Japan Professor Juan Alberto Mena Lorenzo, University of Pinar Del里奥，古巴里奥教授克里斯塔·洛玛（Christa Logma），塔林大学，爱沙尼亚，马里特·维罗洛琳（Marit Virolainen）博士，芬兰·吉瓦斯克尔大学（Jyväskylä）伦敦，英国教授佩特大学，瑞典教授彼得里·诺克莱宁，坦佩雷大学，坦佩雷大学，拉姆利·本·穆斯塔法教授，苏丹·伊德里斯教育大学，马来西亚斯蒂芬妮·阿拉伊斯教授美国南佛罗里达大学副教授Victor Hernandez-Gantes，所有编辑委员会成员也是审稿人。
CREditing：克氏锥虫基因调节工具
克氏锥虫的基因操作仍然是一个挑战，主要是因为缺乏可用且有效的分子工具。CRE-lox 重组系统是一种位点特异性重组酶技术，是一种广泛用于实现染色体或游离 DNA 中的条件性靶向缺失、倒位、插入、基因激活、易位和其他修饰的方法。在本研究中，CRE-lox 系统经过改进，以扩展当前用于这种难以操作的寄生虫的基因工具箱。为此，我们评估了通过电穿孔直接蛋白质递送 CRE 重组酶是否可以改善克氏锥虫中 CRE 介导的重组。CRE 重组酶与克氏锥虫组蛋白 H2B 的 C 端融合，H2B 携带核定位信号并在原核系统中表达。融合蛋白经过亲和纯化后直接引入上鞭毛体和组织培养衍生的锥虫中。这可以控制基因表达，如通过打开先前转染到寄生虫中的串联二聚体荧光蛋白报告基因所证实的，在高达 85% 的寄生虫中实现了 CRE 介导的重组。进一步测试了该系统关闭基因表达、去除整合到基因组中的可选择标记以及有条件地敲除与耐药性有关的硝基还原酶基因的能力。此外，CREditing 还可以控制组织培养锥虫中的基因表达，而锥虫比上鞭毛体更难转染。本研究中显示的克氏锥虫基因组操作的重大进展可供其他人使用，以帮助通过获得或丧失功能的方法更好地了解这种寄生虫。 2020 澳大利亚寄生虫学会。由 Elsevier Ltd. 出版。保留所有权利。
利用 CRISPR-Cas9 多重编辑 α-淀粉酶/胰蛋白酶抑制剂基因以减少硬粒小麦中的过敏原蛋白
小麦及其衍生食品分布广泛，是全球主要食物来源之一。在过去几十年中，与小麦有关的疾病发病率已成为人类面临的全球性问题，这可能与小麦衍生食品的传播有关。已确定结构和代谢蛋白，如 α-淀粉酶/胰蛋白酶抑制剂 (ATI)，与小麦过敏（面包师哮喘）和非腹腔性小麦敏感症 (NCWS) 的发病有关。ATI 是一组外源性蛋白酶抑制剂，由分散在硬粒小麦和面包小麦的几条染色体上的多基因家族编码。WTAI-CM3 和 WTAI-CM16 亚基被认为是与面包师哮喘和可能的 NCWS 发病有关的主要蛋白质。使用 CRISPR-Cas9 多路复用策略编辑意大利硬粒小麦品种 Svevo 的谷粒中的 ATI 亚基 WTAI-CM3 和 WTAI-CM16，目的是生产出具有减少不良反应中潜在过敏原数量的小麦品系。使用无标记基因方法，即在不使用选择剂的情况下再生植物，直接从 T 0 代获得没有 CRISPR 载体的纯合突变植物。与传统育种计划相比，这项研究证明了 CRISPR 技术能够在更短的时间内敲除免疫原性蛋白质。在分子（测序和基因表达研究）或生化（免疫学测试）水平上确认了对两个目标基因的编辑。值得注意的是，作为一种多效性效应，编辑品系中的 ATI 0.28 假基因被激活。
基于 CRISPR/Cas9 核糖开关的克氏锥虫基因表达下调方法
在最近引入 CRISPR/Cas9 技术进行基因敲除、基因敲入、基因补充和内源基因标记之前，很少有基因工具可用于研究克氏锥虫。核糖开关是天然存在的自裂解 RNA（核酶），可被配体激活。我们实验室最近的研究结果证明了枯草芽孢杆菌中的 glmS 核酶可用于布氏锥虫的基因沉默，该核酶已被证明可控制响应外源葡萄糖胺的报告基因表达。在这项工作中，我们使用 CRISPR/Cas9 系统用活性（glmS）或非活性（M9）核酶对克氏锥虫糖蛋白 72（TcGP72）和液泡质子焦磷酸酶（TcVP1）进行内源性标记。通过 PCR 确认基因标记，并通过蛋白质印迹分析验证蛋白质下调。通过免疫荧光分析和体外生长定量进行进一步的表型表征。我们的结果表明，该方法成功地抑制了两种基因的表达，而无需培养基中的葡萄糖胺，这表明克氏锥虫在正常生长条件下产生足够水平的内源性葡萄糖胺 6-磷酸来刺激 glmS 核酶活性。该方法可用于敲除克氏锥虫中的必需基因并验证这种寄生虫中的潜在药物靶点。