摘要目前,全基因组测序(WGS)数据尚未显示与常用的β-LAC TAM/β-内酰胺酶抑制剂(BL/BLI)组合的大肠杆菌易感性概况:ampicillin-sulbactam(sam),amoxicil-lin-clavulavulanate(amclavulanate(amc)和pippirclin(ampicillin-sulbactam(sam)和pipperp)和pippober(ampicillin-sulbactam(sam)和pipeper),在没有头孢菌素耐药性的情况下,对这些BL/BLI的进行性抗性(也称为对BL/BLI(ESRI)的延伸谱耐药性)的渐进性主要主要是由于BLA TEM变体的拷贝数增加而引起的,而BLA TEM变体的拷贝数量增加,这在WGS数据中未经常评估。我们试图通过对147个大肠杆菌细菌分离株的WGS分析来提高基因扩增的添加是否可以改善基因型-pheno型关联,而BL/BLI的类别增加了非敏感性,范围从氨苄西林(AMP)(AMP)易感性到对所有三个BLIS的完全抗性。与BLA TEM在ESRI中的关键作用一致,至少具有至少氨苄西林的112/134菌株(84%)非敏感性编码的BLA TEM。在40/112(36%)菌株中存在BLA TEM扩增的证据(即Bla TEM基因拷贝数估计> 2×)。BLA TEM拷贝数与最小抑制浓度的AMC和TZP之间存在正相关(P <0.05),但对于SAM没有(P = 0.09)。在AMC和TZP-NON敏感性的aMC和TZP-NON敏感性中,β-内酰胺抗性机制的多样性(包括非CECF三脱三甲酮水解BLA CTX-M变体),BLA OXA-1,AMPC和BLA TEM强启动子突变更大。我们的研究表明,WGS数据(包括β-内酰胺酶编码基因扩增)的全面分析可以帮助用AMC或TZP非敏感性对大肠杆菌进行分类,但要辨别从SAM易感性到SAM使用遗传数据的SAM非敏感性的过渡。
二苯甲基丙酮是通过丙酮和苯甲醛之间的碱催化缩合反应合成的。这项研究旨在评估合成化合物二苯甲基丙酮 (C 17 H 14 O) 对四种人类致病微生物的抗菌活性:金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌和真菌白色念珠菌。对白色念珠菌诱导的抑菌圈面积最高,为 68.23 平方毫米,对大肠杆菌诱导的抑菌圈最低,为 37.55 平方毫米。金黄色葡萄球菌对该药物完全耐药,对二苯甲基丙酮诱导的抑菌圈为零。抗菌效力大小顺序为白色念珠菌>肺炎克雷伯菌>铜绿假单胞菌>金黄色葡萄球菌,但其抗菌效力低于标准合成药物氨苄西林和酮康唑。
根据美国和欧洲当局的说法,大环内酯类药物是作为肺炎病例或可接受的替代方案作为第一线治疗的选择。In France, the recommendations include amoxicillin as a rst choice or a macrolide, while in Germany, the rst choice is penicillin and the alternative drug is a macrolide, and in Italy, the rst choices are penicillin, amoxicillin, ampicillin plus sulbactam, and amoxicillin plus clavulanic acid, and the alternative is a mac- rolide作为认可的组合。9这促使我们探索了这类抗菌素,寻找一种COVID-19疗法。在这些药物中,阿奇霉素是一种对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌具有广泛活性的大环内酯类抗生素。此外,阿奇霉素在uenza和肺炎链球菌中对嗜血杆菌具有抗菌活性,这些活性是负责下呼吸道疾病的抗菌活性。先前的10项研究报道了阿奇霉素对各种病毒的体外抗病毒活性,如Zika,Ebola,Rhinovirus,Enterovirus,enthovirus,Enterovirus,in lienza和最近的SARS-COV-2病毒。11烟酰胺是一种广泛使用的驱虫剂,在治疗许多肺部疾病(如哮喘和囊性brosos)以及COVID-19中被重新使用,这是由于其支气管扩张症的效果,抑制了粘液的产生,并释放了pro-Ins pro-Ins-into-intomator cytokines。12此外,尼古兰具有据报道的抗菌活性,这可能是对打击肺部超感染的好处。14超过13,piroxicam是一种有效的非甾体抗毒剂,可以减少细胞因子风暴,它具有针对1型疱疹病毒的体外抗病毒活性。
通过椎间盘扩散法确定了大肠杆菌分离株对不同抗生素的敏感性,如表1所示。数据表明,大肠杆菌分离株中有7.7%(5/65)对前苯甲苯具有抗性,分离株中有9.2%(6/65)对硝基氟耐药有抗性,分离株的21.5%(14/65)是对氯苯二甲酸的耐药性,47.7.7%(31/65)的抗性抗性(31/65)。 53.8%(35/65)的分离株对哌拉西林 - tazobactam有抵抗力,分离株的67.6%(44/65)对三甲氧苄啶甲基甲氧唑抗性,分离株的70.7%(46/65)是脱离了81.5%(53/65 ep)的分离株(46/65)。分离株的95.4%(62/65)是头孢唑啉和头孢曲松抗性,97%(63/65)的分离株对环丙沙星具有抗性,最后,头孢二胺,阿莫替辛和阿莫克西林 - 克拉氨酸盐和阿莫克西林 - 克氨酸酯均未对100%(65/65/65/65/65)的有效有效。所有65个分离株均为MDR。
抗生素耐药性 作用方式 靶点 常见用途 (mm) 氨苄西林 <21 结合青霉素-细胞壁 (PBPs),抑制肽聚糖的最终转肽状态(大肠杆菌、奇异变形杆菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌) 杆菌肽B-10 <9 结合脂质载体分子(紫杉醇 A / B-10) 细胞壁窄谱(革兰氏+肽聚糖生物体:构建块、葡萄球菌、链球菌) 氯霉素 <13 结合核糖体亚基 50S 蛋白,防止氨基酸转移到脑膜炎球菌,生长多肽H. influenzae) 链 Novobiocin <17 与酶 DNA 窄谱 (NB) DNA 旋转酶结合,复制 (主要用于防止抗革兰氏阳性菌 S. aureus 复制过程中 DNA 解开) 有关抗生素列表,请参阅单元 5 末尾的完整表 15.1
1. 质粒 质粒是自然产生的染色体外 DNA 片段,可以稳定地从一代传到另一代。质粒携带编码抗生素、某些毒素或重金属抗性的基因,或产生 DNA 限制和修饰酶的基因。质粒的拷贝数可以从 1-2 到多个拷贝 (10-200)/细胞不等。质粒用于克隆不超过 10 Kb 的小片段 DNA,该片段位于称为多接头的位点,多接头是一小段 DNA,其中包含许多限制位点,质粒可以用任何限制酶切割这些位点,然后将所需的 DNA 连接到该位点。 pBR322 质粒 pBR322 是 1977 年创建的第一个大肠杆菌中常用的载体。它是一个小质粒(4361 bp),每细胞含有 15-20 个拷贝数,pBR322 还含有复制起点,并带有对氨苄青霉素和四环素的两个抗生素抗性基因。该质粒具有超过 40 种限制性酶的独特限制位点。
还使用特异性引物插入了 MglB (D236A) 中的突变。通过重叠 PCR 连接每个扩增片段,并通过热融合法亚克隆到线性化质粒中 [14]。所选载体为用于细菌表达的 pRSET B、用于哺乳动物表达的 pcDNA3 和用于植物表达的 pRI201_AN。将叶绿体定位信号、核酮糖二磷酸羧化酶小链 1A (RBCS1a) [15] 序列通过 Gly-Gly-Ser-Gly-Gly 接头融合在 LOTUS-Glc 和 LOTUS-Glc (D236A) 的 N 末端。为了共表达 miniSOG2 和 LOTUS-Glc,我们将 LOTUS-Glc 和 miniSOG2 与可自裂解的 P2A 肽连接起来 [16]。使用热休克法对大肠杆菌 (E. coli) 菌株 XL10-Gold 进行转化,并在 2 mL LB 培养基中用 0.1 mg/ml 氨苄青霉素在 37 ◦ C 下培养单个菌落过夜。通过碱性-SDS 裂解从收集的细菌沉淀中进行小规模 DNA 制备。使用 BigDye Terminator v1.1 循环测序试剂盒 (Thermo Fisher Scientific) 通过染料终止子循环测序确认质粒序列。LOTUS-Glc 及其变体的 DNA 序列显示在注释 S1 中。
2022年3月8日收到; 2022年6月23日接受;于2022年9月7日出版作者分支:1个Weifang People Hospital的临床实验室,中国山东省Weifang街151号; 2中国山东省Qingdao Binhai大学临床实验室临床实验室。*通信:Shirong Li,LSR2270@163. COM关键字:1类Integron;沙门氏菌;抗生素抗性;发起人。缩写:氨苄青霉素的放大器; AZ,阿奇霉素; Caz,头孢济; CIP,环丙沙星; CRO,头孢曲松; Inti1,1级整数; Lev,左氧氟沙星; MDR,多药电阻; MIC,最小抑制浓度; PCR,聚合酶链反应; SXT,甲氧苄啶/磺胺甲恶唑。存储库:GenBank No。KY399738.1(样本号 68); GenBank No。 KY399738.1(样本号 77); GenBank No。 fr875297.1(示例号 45); GenBank No。 CP054232.1(样本号 79); GenBank No。 CP033636.1(样本号 35); GenBank No。 EU675686.2(样本号 44)。 001574©2022作者KY399738.1(样本号68); GenBank No。KY399738.1(样本号 77); GenBank No。 fr875297.1(示例号 45); GenBank No。 CP054232.1(样本号 79); GenBank No。 CP033636.1(样本号 35); GenBank No。 EU675686.2(样本号 44)。 001574©2022作者KY399738.1(样本号77); GenBank No。fr875297.1(示例号45); GenBank No。CP054232.1(样本号79); GenBank No。CP033636.1(样本号 35); GenBank No。 EU675686.2(样本号 44)。 001574©2022作者CP033636.1(样本号35); GenBank No。EU675686.2(样本号 44)。 001574©2022作者EU675686.2(样本号44)。001574©2022作者
摘要:金黄色葡萄球菌对食物和食物接触表面的污染是公共卫生的关注点,鉴于其全球有力和抗菌抗性特性。在这项研究中,总共分析了181个MSSA分离株的SE基因,抗菌抗性模式和水疗类型。总体而言,SE基因检测的24.9%的分离株为阳性,海洋是最普遍的经典SE(18.8%)。SE基因污染的最主要样品源是海洋的手拭子(6/48),SEB的肉类菜肴(3/14)和SEC的海鲜菜肴(2/24)。在临床上重要的抗生素青霉素G和氨苄青霉素(均为54.7%)的频率相对较高的频率下,还观察到抗菌耐药性,其次是四环素(14.9%)和阿兹罗霉素(8.8%)。此外,SPA类型的表征显示,Spa Type T5078是最主要的(40.3%),Spa类型T127和T5521和T5521和SEA GEN之间具有显着关联。这项研究提供了对肠毒素基因和金黄色葡萄球菌在烹饪或即食食品中的抗菌素耐药性的见解,以告知未来的监测和流行病学研究。