divenne肌肉营养不良(DMD)是由于缺乏肌营养不良蛋白而导致的致命肌肉疾病,该疾病维持肌肉膜完整性。我们使用腺嘌呤碱基编辑器(ABE)修改了肌营养不良蛋白基因的剪接供体部位,从而导致外显子51(∆EX51)的常见DMD缺失突变在人类诱导的多能干细胞中得出的外显子细胞中的常见DMD缺失突变,并恢复了耐肿瘤的表达。主要的编辑还能够在这些心肌细胞中重新培养肌营养不良蛋白的开放式阅读框。用腺体相关的病毒血清型-9编码ABE组件作为分裂 - inintein跨跨切割系统的肌内注射ΔEX51小鼠允许体内基因编辑和疾病校正。我们的发现证明了核苷酸编辑对基因组进行最小修饰校正不同DMD突变的有效性,尽管需要改进的递送方法,然后才能使用这些策略来充分编辑DMD患者的基因组。
divenne肌肉营养不良(DMD)是由肌营养不良蛋白表达受损引起的严重肌肉疾病。虽然线粒体功能障碍被认为在DMD中起着重要作用,但这种功能障碍的机制仍然有意义。在这里我们证明,在DMD和其他肌肉运动障碍中,大量的DLK1-DIO3聚集的miRNA(DD-MIRNA)在再生肌纤维和血清中的再生。为了表征这种功能障碍的生物学作用,在小鼠肌肉中同时在体内过度表达了14个DD-MIRNA。转录组分析揭示了肌肉异位过表达14个DD-MIRNA和MDX diaphragm的高度相似的变化,具有自然上调的DD-MIRNA。在通常失调的途径中,我们发现抑制线粒体代谢,尤其是氧化磷酸化(OXPHOS)。在IPS衍生的骨骼肌管中击倒DD-MIRNA导致OXPHOS活性增加。数据表明(1)DD-MIRNA是DMD肌肉中营养不良变化的重要介体,(2)线粒体代谢,尤其是通过协调的上调节的DD-MIRNA在DMD中靶向DMD。这些发现提供了有关肌肉营养不良中线粒体功能障碍的机理的洞察力。
摘要 据报道,英国不同的专科神经肌肉中心对杜氏肌营养不良症 (DMD) 的呼吸护理提供存在显著不一致。缺乏强有力的临床证据和专家共识是公共医疗保健系统实施护理建议的障碍,同时需要提高对 DMD 患者护理关键方面的认识。在这里,我们为英国患有 DMD 的儿童和成人提供基于证据和/或基于共识的呼吸护理最佳实践,既作为常规护理的一部分,也作为紧急情况。 方法 由英国呼吸科医生(包括英国胸科学会 (BTS) 代表)、神经肌肉临床医生、物理治疗师和患者代表组成的专家工作组发起,根据已发表的证据、现行实践和专家意见制定了指南草案。在与英国呼吸团队和神经肌肉服务部门进行更广泛磋商后,就 DMD 呼吸护理的最佳实践建议达成了共识。结果 最终的建议以流程图的形式呈现,用于评估和监测,并附有附加指南和单独的图表,列出了紧急情况管理的关键考虑因素。这些建议已得到 BTS 的认可。 结论 这些指南为所有管理 DMD 儿童和成人日常和急性呼吸护理的人提供了实用、合理的建议。希望这将支持患者和医疗保健专业人员在英国各地获得高标准的护理。
干细胞分泌的蛋白质越来越受到赞赏,以驱动多种组织和细胞类型的再生效应。这些效果的进口应用正在利用它们识别和开发生物制剂,从而在特定的生物学过程中引起重新启动,并在衰老,疾病或发育状况中发生变性。利用这种方法,Juvena Therapeatics将JUV-161作为一种重组融合蛋白开发为激烈的靶向MAPK/ERK和PI3K/AKT再生级联反应。这些途径是骨骼肌中的主要信号传导介质,可增强肌发生,肌肉表面,代谢和力量。To advance the preclinical development of JUV-161, Juvena Therapeutics developed a pan- inducible, TREDT960I transgenic mouse model containing a human genomic segment containing exons 11-15 of DMPK gene with 960 interrupted CTG repeats (CUG960) under direction of the tetO (tet-responsive element) promoter.这种Pancug960/+鼠模型涵盖了DM1肌肉劣化的关键方面,如使用功能和组织学测试所示,以确定远端肌肉浪费和RNA焦点在IM构成的组织中的积累。在此DM1小鼠模型中施用JUV-161导致握力强度的显着改善,与雄性和雌性小鼠的显着增加的胫骨前横截面区域相吻合。结合测定与小鼠PK Pro填充相结合的反映了在DM1小鼠模型中获得的临床前结果的潜在临床转换性。受体结合以及对受体序列同源性的评估(在所有评估的物种中> 94%;未显示)允许选择具有药理学相关的物种(大鼠和狗),以进行PK/PD和非临床安全研究。基于这些研究的结果以及JUV-161在临床前和非临床研究中的有希望的活性,Juvena Therapeutics计划评估2024年成人发作DM1患者JUV-161的潜在治疗益处。JUV-161治疗可以改善肌肉强度,耐力,质量和葡萄糖调节,导致成人发作DM1患者的萎缩以及更快的步行速度和降低速度降低。
1中国科学院生命科学学院,中国北京101408; zhaoxiaoy@genomics.cn 2拉尔斯·博伦德(Lars Bolund)再生医学研究所,金丁欧(Europe)高级生命科学研究所,bgi-qingdao,bgi-shenzhen,qingdao 2666555,中国; qukunli@genomics.cn(K.Q. ); yanghm@genomics.cn(H.Y. ); bolund@biomed.au.dk(L.B.) 3 Aarhus大学生物医学系,丹麦8000 Aarhus; benedetta.curci@outlook.it(B.C. ); lin.lin@biomed.au.dk(L.L.) 4 Department of Biology, Copenhagen University, 2200 Copenhagen, Denmark 5 HIM-BGI Center, Hangzhou Institute of Medicine (HIM), Chinese Academy of Sciences, Hangzhou 310022, China 6 Steno Diabetes Center Aarhus, Aarhus University Hospital, 8200 Aarhus, Denmark * Correspondence: alun@biomed.au.dk;电话。 : +45-224119441中国科学院生命科学学院,中国北京101408; zhaoxiaoy@genomics.cn 2拉尔斯·博伦德(Lars Bolund)再生医学研究所,金丁欧(Europe)高级生命科学研究所,bgi-qingdao,bgi-shenzhen,qingdao 2666555,中国; qukunli@genomics.cn(K.Q.); yanghm@genomics.cn(H.Y.); bolund@biomed.au.dk(L.B.)3 Aarhus大学生物医学系,丹麦8000 Aarhus; benedetta.curci@outlook.it(B.C. ); lin.lin@biomed.au.dk(L.L.) 4 Department of Biology, Copenhagen University, 2200 Copenhagen, Denmark 5 HIM-BGI Center, Hangzhou Institute of Medicine (HIM), Chinese Academy of Sciences, Hangzhou 310022, China 6 Steno Diabetes Center Aarhus, Aarhus University Hospital, 8200 Aarhus, Denmark * Correspondence: alun@biomed.au.dk;电话。 : +45-224119443 Aarhus大学生物医学系,丹麦8000 Aarhus; benedetta.curci@outlook.it(B.C.); lin.lin@biomed.au.dk(L.L.)4 Department of Biology, Copenhagen University, 2200 Copenhagen, Denmark 5 HIM-BGI Center, Hangzhou Institute of Medicine (HIM), Chinese Academy of Sciences, Hangzhou 310022, China 6 Steno Diabetes Center Aarhus, Aarhus University Hospital, 8200 Aarhus, Denmark * Correspondence: alun@biomed.au.dk;电话。: +45-22411944
摘要旨在报告小儿患者的voretigene nenparvovec(Luxturna)治疗后的主要结果和并发症。通过视网膜下给药的17岁以下患者的记录记录了确认的双质RPE65介导的遗传性视网膜营养不良的确认的voretigene Neparvovec的记录。最校正的视力(BCVA)和来自光谱域光学相干断层扫描,超宽底面视野(VF)(VF)的数据。结果分析了六名患者(平均年龄:7.8岁)的12眼。未发生术中并发症。BCVA在12个月的随访(平均logmar(分辨率最小角度的对数))BCVA下显着改善:基线时:1.0±0.8在12个月时为0.6±0.3,p = 0.001)。平均中央黄斑厚度和中央外核层厚度在12个月的随访中没有变化。vf v4e iSopter没有显示重大变化。术后并发症包括:同一患者的两只眼睛的眼内压升高,治疗后3个月时的侧伏层层孔和在所有眼睛中观察到的注射部位的萎缩,除1个月以外,在12个月内显着肿大(p = 0.008)。结论大多数通过Voretigene Neparvovec治疗的儿科患者在12个月的随访中的视觉功能显着增加。术后并发症均未阻止视觉功能的收益。
摘要 杜氏肌营养不良症是一种 X 连锁隐性遗传性单基因疾病,因无法产生肌营养不良蛋白而引起。在大多数患者中,由于开放阅读框的破坏性突变,肌营养不良蛋白的表达丧失。尽管迄今为止在大量不同的治疗方法上做出了努力,但可用于治疗杜氏肌营养不良症的治疗方法仍然只是缓解和支持疾病症状,而不是治愈疾病。CRISPR/Cas9 技术的出现彻底改变了基因组编辑的范围,被认为是有效基因组工程的先驱。通过 CRISPR 删除或切除基因内 DNA,以及通过反义寡核苷酸诱导的 DNA 水平外显子跳跃的类似策略,是纠正杜氏肌营养不良症基因的新颖且有前途的方法,它们可以恢复截短但有功能的肌营养不良蛋白的表达。此外,CRISPR/Cas9 技术还可用于治疗 DMD,方法是去除重复的外显子、通过基于 HDR 的途径精确校正致病突变以及诱导补偿蛋白(如 utrophin)的表达。在本研究中,我们简要介绍了 DMD 的分子遗传学和 DMD 基因治疗的历史概述。我们特别关注了用于治疗 DMD 的 CRISPR/Cas9 介导的治疗方法。版权所有 ª 2020,重庆医科大学。由 Elsevier BV 制作和托管 这是一篇根据 CC BY-NC-ND 许可(http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/)发表的开放获取文章。
Duchenne肌肉营养不良(DMD)是由DMD基因突变引起的致命性,退化性肌肉疾病,导致严重降低或缺乏蛋白质肌营养不良蛋白。基因治疗策略旨在增加功能性肌营养不良蛋白(微型淋巴蛋白)的表达。准确量化肌营养不良蛋白/微型肺炎蛋白的能力对于评估基因转导水平至关重要。我们证明了一种新型肽免疫缺陷液相色谱 - 串联质谱法(IA-LC-MS/MS)测定法的验证和应用。数据表明,贝克尔肌肉营养不良和DMD组织中的肌营养不良蛋白表达相对于非疾病对照组织的平均值(n = 20)的平均值为4-84.5%(平均32%,n = 20)和0.4 - 24.1%(分别为5%,n = 20)。In a DMD rat model, biceps femoris tissue from dystrophin-de fi cient rats treated with AAV9.hCK.Hopti-Dys3978.spA, an adeno-associated virus vector containing a mini-dystrophin transgene, showed a dose-dependent increase in mini-dystrophin expression at 6 months post-dose, exceeding wildtype dystrophin高剂量的水平。验证数据表明,测定和测定内的精度≤20%(在量化的下限[LLOQ]下极限为≤25%),并且运行内和运行内相对误差在±20%以内(LLOQ时为±25%)。IA-LC-MS/MS准确地量化具有舒适灵敏度的人和临床前物种中的肌营养不良蛋白/微型肌营养素,可立即在临床前/临床试验中应用。
道格拉斯·埃拉拉纳加 - 摩尔6,克里斯蒂安·梅多7,弗朗西斯·贝尔穆德斯·米米尼斯(FrancissesBermúdez-Mimenez)8,拉巴·本(Rabah Ben),星期四9,法国文学10,阿恩霍布斯(Ainhoobs)11:12,“马里尼·贝托洛(Ainhoobs),“马里尼·贝托洛Luisa Master 7,Matthew R.G.泰勒7,维多利亚N. Parikh 16,Ashley Ashley 16,Roberto 11,12,19,John Bourke 13.14,Constantinos 1.2.2
细胞治疗肌营养不良症的成功率有限,这主要是由于供体细胞的植入不良,尤其是在疾病晚期阶段的纤维性肌肉。我们开发了一种细胞介导的外显子跳过,该外显子跳过,利用了肌纤维的多核性质,以通过U7小型核RNA进行跳过肿瘤基因的51外显子的外显子,以实现居民的dysentent dys-营养性核的交叉校正。我们观察到,遗传校正的人DMD肌原性细胞(但不是WT细胞)的共同培养,其营养不良的对应物的比例为1:10或1:30,导致肌营养不良蛋白在一个水平上产生的水平比简单稀释预测的高几个水平。这是由于U7 SnRNA扩散到邻近营养不良的居民核。当移植到带有外显子51突变的NSG-MDX-δ51MITE中时,遗传校正的人肌生成细胞在治疗范围内会产生比WT细胞高得多的肌营养不良蛋白的水平,并且即使仅3-5%的急诊量也会导致势能恢复。这种肌营养不良蛋白的水平是迈向细胞疗法临床效率的重要一步。